鄭春芳 雷元順 于桂陽

（1湖南永州職業(yè)技術(shù)學(xué)院農(nóng)學(xué)系，湖南永州 425000；2湖南寧遠(yuǎn)縣畜牧水產(chǎn)局鯉溪獸醫(yī)站，湖南寧遠(yuǎn) 425614）

湖南省永州市豬肉中四環(huán)素類藥物殘留的現(xiàn)狀分析

鄭春芳1雷元順2于桂陽1

（1湖南永州職業(yè)技術(shù)學(xué)院農(nóng)學(xué)系，湖南永州 425000；2湖南寧遠(yuǎn)縣畜牧水產(chǎn)局鯉溪獸醫(yī)站，湖南寧遠(yuǎn) 425614）

為了解湖南省永州市豬肉中四環(huán)素類藥物的殘留情況，分批隨機(jī)采集永州市八個(gè)縣區(qū)超市、農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)和生豬屠宰場(chǎng)的豬肉樣品200份，采用高效液相色譜法進(jìn)行土霉素、四環(huán)素和金霉素等四環(huán)素類藥物殘留的分析監(jiān)測(cè)。抽檢八個(gè)縣區(qū)中冷水灘、零陵、祁陽和東安四個(gè)縣區(qū)被檢出四環(huán)素類藥物的殘留，其檢測(cè)出的殘留量均超過國(guó)家規(guī)定的四環(huán)素類藥物最大殘留限量0.1μg/g（或100μg/kg），在200個(gè)樣品中有9個(gè)樣品含有被測(cè)的四環(huán)素類藥物成分，占被調(diào)查樣品的4.5%。這表明當(dāng)?shù)厣i養(yǎng)殖過程存在濫用四環(huán)素類藥物的現(xiàn)象，從而造成豬肉的四環(huán)素類藥物殘留。

四環(huán)素類藥物；殘留；豬肉；永州

四環(huán)素類藥物是由鏈霉菌產(chǎn)生的一類廣譜抗生素，主要有四環(huán)素(TC)、金霉素(CT)、土霉素(OTC)、多西環(huán)素(DOTC)和美他環(huán)素(METC)等。由于四環(huán)素類藥物價(jià)格低廉，抗菌譜廣，被廣泛用作促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)和防治動(dòng)物疾病的飼料添加劑。但如果不合理地使用四環(huán)素類藥物，會(huì)導(dǎo)致其在豬肉中殘留，危害人類健康，因此該類藥物已成為全世界頗為關(guān)注的抗菌類藥物。對(duì)動(dòng)物源食品中該類藥物殘留量的檢測(cè)和監(jiān)控，也已列入《中華人民共和國(guó)動(dòng)物及動(dòng)物源食品殘留監(jiān)控計(jì)劃》。為了解湖南省永州市豬肉中的該類藥物殘留情況，永州市采用高效液相色譜法對(duì)當(dāng)?shù)刎i肉樣品進(jìn)行了土霉素、四環(huán)素和金霉素等四環(huán)素類藥物殘留的分析監(jiān)測(cè)。

1 試驗(yàn)材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

2012年1 ～12月從湖南省永州市八個(gè)縣區(qū)（冷水灘區(qū)、零陵區(qū)、祁陽縣、東安縣、雙牌縣、道縣、寧遠(yuǎn)縣及藍(lán)山縣）超市、農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)和生豬屠宰場(chǎng)隨機(jī)采取豬肉樣品，共采集豬肉樣品200份。

1.2 檢測(cè)內(nèi)容與方法

檢測(cè)方法：采用高效液相色譜法，按《畜禽肉中土霉素、四環(huán)素、金霉素殘留量測(cè)定方法》（GB/T14931.1-94）測(cè)定豬肉中土霉素、四環(huán)素和金霉素的含量。

檢測(cè)儀器：高效液相色譜儀(HP1100，美國(guó)Agilent公司)附紫外檢測(cè)器，HQ-60型旋渦混合器，KQ-1000DB型超聲波振蕩器，高速離心機(jī)，電子分析天平，UFENG型真空抽濾機(jī)，MS1型組織勻漿機(jī)，PHS-3C精密酸度計(jì)，C18固相萃取柱（科瑞科技），RE-3000C旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，HH-8恒溫水浴鍋。

檢測(cè)試劑：土霉素、四環(huán)素標(biāo)準(zhǔn)品(購(gòu)于中國(guó)藥品生物制品檢定所)；乙腈（分析純，購(gòu)于天津科密歐）；0.01mol/L鹽酸溶液；稱取1.56g±0.01g磷酸二氫鈉溶于蒸餾水中，定容到100mL，經(jīng)微孔濾膜過濾(0.45μm)備用；水為三蒸水；其他試劑均為分析純。

藥物殘留量的計(jì)算公式：X=A/M

式中:X為樣品中抗生素的含量(mg/kg)；A為樣品溶液測(cè)得抗生素的含量（μg）；M為樣品質(zhì)量（g）。

1.3 數(shù)據(jù)處理與分析

利用Excel2003對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行整理和統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 豬肉中四環(huán)素類藥物殘留量的檢測(cè)結(jié)果

通過測(cè)定計(jì)算出土霉素、四環(huán)素和金霉素分別在濃度為0.2～1.0μg/mL、0.5～1.0μg/mL和1.25～2.5μg/mL呈線性關(guān)系，土霉素標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程為Y=10440X+9631，相關(guān)系數(shù)為0.9989；四環(huán)素標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程為Y=23261X-939，相關(guān)系數(shù)為0.9978；金霉素標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程為Y=8114.3X-4245，相關(guān)系數(shù)為0.9975。結(jié)果表明，四環(huán)素、土霉素和金霉素在0.2～2.5μg/mL濃度范圍內(nèi)呈現(xiàn)良好線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)均大于0.997，平均回收率為72.3%～94.6%，批內(nèi)批間相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD） 均小于20%。土霉素、四環(huán)素和金霉素藥物殘留檢測(cè)結(jié)果見表1。

在畜禽生產(chǎn)使用四環(huán)素類藥物的過程中，如果不認(rèn)真遵守休藥期的規(guī)定，動(dòng)物體內(nèi)的藥物在屠宰之前就不能被完全代謝掉，有很大一部分會(huì)殘留在動(dòng)物體內(nèi)，因此許多國(guó)家對(duì)四環(huán)素類藥物規(guī)定了最大殘留限量并實(shí)施監(jiān)控，歐盟與我國(guó)規(guī)定的最大殘留限量為畜禽肌肉中不能超過100μg/kg。從表1可以看出，抽檢的八個(gè)縣區(qū)中冷水灘、零陵、祁陽和東安四個(gè)縣區(qū)都檢出四環(huán)素類藥物殘留超標(biāo)的現(xiàn)象，且均超過國(guó)家規(guī)定的四環(huán)素類藥物最大殘留限量100μg/kg，其中冷水灘和零陵兩個(gè)區(qū)檢出土霉素、四環(huán)素和金霉素藥物的殘留超標(biāo)，且差異極顯著（P＜0.01）；祁陽縣檢出土霉素和金霉素藥物殘留超標(biāo)；東安縣檢出土霉素藥物殘留超標(biāo)；雙牌、道縣、寧遠(yuǎn)和藍(lán)山四個(gè)縣未檢出四環(huán)素類藥物殘留。藥物殘留抽檢結(jié)果說明，冷水灘、零陵、祁陽和東安在飼料中均添加了四環(huán)素類藥物，冷水灘和零陵兩個(gè)縣區(qū)更要加強(qiáng)對(duì)四環(huán)素類藥物殘留的監(jiān)控。

2.2 豬肉中四環(huán)素類藥物殘留檢出情況

從表2可以看出，抽檢八個(gè)縣區(qū)共200份豬肉樣品中有9份被檢出四環(huán)素類藥物殘留，檢出率為4.5%，其殘留量均超出國(guó)家規(guī)定的最高殘留限量；抽檢八個(gè)縣區(qū)中冷水灘和零陵的檢出率及不合格率最高，均為12%；其次是祁陽，均為8%；東安縣均為4%；雙牌、道縣、寧遠(yuǎn)和藍(lán)山等四縣均未檢出有四環(huán)素類藥物殘留。

表1 豬肉中土霉素、四環(huán)素和金霉素殘留的檢測(cè)結(jié)果 （mg/kg）

3 討論

3.1 永州市豬肉中四環(huán)素類藥物殘留現(xiàn)狀及分析

2012年，對(duì)永州市八個(gè)縣區(qū)豬肉中的土霉素、四環(huán)素和金霉素等三種四環(huán)素類藥物殘留進(jìn)行抽檢，檢測(cè)結(jié)果說明永州市豬肉中四環(huán)素類藥物殘留超標(biāo)問題比較嚴(yán)重。抽檢八個(gè)縣區(qū)中冷水灘、零陵、祁陽和東安四個(gè)縣區(qū)均檢出四環(huán)素類藥物殘留超標(biāo)，且均超過國(guó)家規(guī)定的最大殘留限量，雙牌、道縣、寧遠(yuǎn)和藍(lán)山四個(gè)縣未檢出四環(huán)素類藥物殘留。這說明永州市部分養(yǎng)殖戶對(duì)畜產(chǎn)品的質(zhì)量安全意識(shí)比較淡薄，在飼養(yǎng)過程中大量使用了四環(huán)素類藥物，且不嚴(yán)格遵守休藥期的規(guī)定，故極易造成豬肉中四環(huán)素類藥物殘留超標(biāo)。因此永州市要進(jìn)一步加強(qiáng)對(duì)四環(huán)素類藥物殘留的監(jiān)測(cè)，當(dāng)?shù)孬F醫(yī)行政部門要指導(dǎo)養(yǎng)殖戶，并嚴(yán)格規(guī)范四環(huán)素類藥物的使用。

3.2 四環(huán)素殘留原因分析

目前，四環(huán)素是我國(guó)廣泛用于防治感染性疾病的獸藥之一，在食用性動(dòng)物的養(yǎng)殖過程中，四環(huán)素類藥物的給藥可通過口服（添加到飼料或飲用水中）、注射及通過乳腺注入。生豬喂飼了一定量的四環(huán)素后，如代謝時(shí)間不足，則殘留于肌肉及各器官組織內(nèi)，四環(huán)素在體內(nèi)主要貯存于膽、脾，尤其易沉積于骨骼和牙齒，造成牙齒持久染色。還可在肝臟中富集，造成肝臟損害。其主要經(jīng)腎臟排泄，腎功能障礙時(shí)易出現(xiàn)消除半衰期延長(zhǎng)。

表2豬肉中四環(huán)素類藥物殘留檢出情況

3.3 四環(huán)素的毒性與殘留限量

四環(huán)素類藥物是一類具有共同多環(huán)并四苯羧基酰胺母核的衍生物，僅在5、6、7位取代基有所不同。四環(huán)素、土霉素和金霉素對(duì)革蘭氏陽性菌、陰性菌、螺旋體、霉形體、衣原體、原蟲等均可產(chǎn)生抑制作用，是獸醫(yī)臨床上經(jīng)常使用的廣譜抗菌素藥物。但由于該類藥物的不合理使用會(huì)導(dǎo)致動(dòng)物性食品的殘留問題，食用這些豬肉后，該類藥物經(jīng)食物鏈進(jìn)入人體，不僅損害人類健康，產(chǎn)生過敏反應(yīng)及多種急慢性中毒，干擾激素平衡及引起癌變，造成人體內(nèi)腸道菌群紊亂，引起人類的感染性疾病，且人體內(nèi)的病原菌因長(zhǎng)期接觸低濃度的四環(huán)素類藥物，易于產(chǎn)生對(duì)該類藥物的耐藥性[1]。為此，許多國(guó)家對(duì)四環(huán)素類藥物殘留規(guī)定了最大殘留限量，并實(shí)施監(jiān)控。我國(guó)和歐盟等國(guó)際組織規(guī)定該類藥物的最高殘留限量為:所有食用性動(dòng)物肌肉組織中四環(huán)素、土霉素和金霉素的單個(gè)或混合物含量不得超過100μg/kg[2]。

3.4 四環(huán)素殘留檢測(cè)方法

在四環(huán)素類藥物殘留檢測(cè)中，目前四環(huán)素類藥物的含量測(cè)定方法有微生物法、高效毛細(xì)管區(qū)帶電泳法、薄層色譜法和高效液相色譜法[3]。本試驗(yàn)采用高效液相色譜法，參照GB/T14931.1-94檢測(cè)豬肉及內(nèi)臟組織中土霉素、四環(huán)素、金霉素的殘留量，在0.2～2.5μg/mL濃度范圍內(nèi)呈現(xiàn)良好線性，標(biāo)準(zhǔn)添加樣品回收率72.3%～94.6%，具有高效、快速、靈敏度高等特點(diǎn)。為使方法更為準(zhǔn)確可靠，建議在原實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上再做回收率和精密度試驗(yàn)；四環(huán)素在酸性水溶液中紫外光區(qū)270nm處有最大吸收；不同pH值流動(dòng)相條件下四環(huán)素類藥物出峰效果不同，pH值越高，峰的拖尾現(xiàn)象越嚴(yán)重，但是過低的pH值會(huì)使填料柱水解，損壞柱子，故選用pH值2.5的乙腈與磷酸二氫鈉溶液組成流動(dòng)相，具有較好峰形。

[1]辜雪冬，陳一資，胡濱，等.動(dòng)物食品中四環(huán)素殘留的研究進(jìn)展.肉類研究，2007（3）：30-32.

[2]尹華，陸衛(wèi)明.固相萃取-高效液相色譜法測(cè)定畜禽肉中四環(huán)素類抗生素殘留.中 國(guó) 衛(wèi) 生 檢 驗(yàn) 雜 志，2012，22（10）：2330-2332.

[3]申玉軍，高振波，孫公文.動(dòng)物性食品中四環(huán)素殘留檢測(cè)方法.上海畜牧獸醫(yī)通訊，2006（6）：56-57.

S851.34+7，X836（264YZ）

B

1673-4645（2013）07-0061-03

2013-02-06