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        靜脈全血放置時間對網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)結(jié)果的影響

        2013-09-11 07:11:08劉艷紅
        檢驗(yàn)醫(yī)學(xué) 2013年2期
        關(guān)鍵詞:全血分析儀貧血

        劉艷紅, 李 艷, 何 穎, 萬 獎

        (武漢大學(xué)人民醫(yī)院檢驗(yàn)科,湖北 武漢 430060)

        血液分析儀因其方便、快速、準(zhǔn)確已被廣泛應(yīng)用,靜脈全血樣本的存放時間對血液分析結(jié)果的影響已有較多報道[1-2],但大多探討的是對血液分析常規(guī)項(xiàng)目結(jié)果的影響,而對網(wǎng)織紅細(xì)胞(RET)測定的影響少有報道。因RET測定項(xiàng)目非部分醫(yī)院每日必查常規(guī)項(xiàng)目,可能會集中幾天的標(biāo)本統(tǒng)一測定。但標(biāo)本放置時間是否會影響RET檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性,且貧血與非貧血患者標(biāo)本是否有存在差異,我們采集了20例門診非貧血患者和30例住院部貧血患者血常規(guī)標(biāo)本于不同時間節(jié)點(diǎn)做了比較實(shí)驗(yàn)。

        材料和方法

        一、研究對象

        隨機(jī)選取武漢大學(xué)人民醫(yī)院2010年5月至7月門診非貧血患者20例及住院貧血患者30例,其中營養(yǎng)性貧血9例,溶血性貧血4例,骨髓增殖性疾病7例,慢性病(高血壓、惡性腫瘤、慢性炎癥等)貧血10例。

        二、儀器和試劑

        日本Sysmex公司XE-2100全自動血液分析儀;進(jìn)口專用配套試劑、質(zhì)控液及校準(zhǔn)液。

        三、方法

        1.XE-2100 RET參數(shù)精密度評價 血液分析儀檢測靜脈全血之前進(jìn)行全面保養(yǎng),并進(jìn)行重新校準(zhǔn),RET的校正按照廠家維修手冊指定的方法進(jìn)行,再采用配套質(zhì)控品 CHECK分別評價RET參數(shù)的批內(nèi)精密度和天間精密度,結(jié)果均達(dá)到廠家規(guī)定要求。

        2.正規(guī)采集門診患者靜脈血2 mL,顛倒5~8次充分混勻。共收集20例標(biāo)本,標(biāo)本中紅細(xì)胞相關(guān)參數(shù)均為正常。立即在XE-2100全自動血液分析儀上進(jìn)行RET測定,并分別于采血后2、4、8、24、48及72 h再重復(fù)進(jìn)行 RET檢測,并記錄RET各參數(shù)及白細(xì)胞計(jì)數(shù)的結(jié)果。

        3.收集住院貧血患者標(biāo)本30例,于采血后2 h檢測RET,然后分別于采血后8、24、48及72 h再重復(fù)進(jìn)行RET檢測,并記錄 RET各參數(shù)及WBC計(jì)數(shù)的結(jié)果。

        4.門診及住院貧血患者標(biāo)本均于每次檢測后存放于4℃冰箱保存,每次檢測前從冰箱中取出標(biāo)本在室溫下放置15 min,恢復(fù)至室溫后再進(jìn)行檢測。

        四、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

        結(jié) 果

        將20例門診非貧血患者采血后于即時、2、4、8、24、48及72 h分別進(jìn)行RET檢測,結(jié)果顯示:采血后2、4、8、24、48 及 72 h 分別與即時檢測結(jié)果相比較,RET計(jì)數(shù)(RET#)及RET%的結(jié)果差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);其他參數(shù)未成熟RET比率(IRF%)、高熒光強(qiáng)度RET(HFR%)、中熒光強(qiáng)度RET(MFR%)及低熒光強(qiáng)度RET(LFR%)的結(jié)果在48 h及以前各時間點(diǎn)亦差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),而在72 h時檢測結(jié)果出現(xiàn)明顯變化,具體表現(xiàn)為HFR%、MFR%和IRF%呈極明顯增高(P<0.01),而 LFR%呈極明顯降低(P <0.01),見表1。

        將30例住院貧血患者采血后于2、8、24、48及72 h分別進(jìn)行RET檢測,結(jié)果顯示:采血后8、24及48 h分別與2 h時檢測結(jié)果進(jìn)行比較,RET#及RET%的檢測結(jié)果差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),僅在72 h時出現(xiàn)明顯降低(P <0.05);其他參數(shù)IRF%、HFR%、MFR%及LFR%的結(jié)果從24 h開始即出現(xiàn)明顯變化,具體表現(xiàn)為IRF%和MFR%呈極明顯增高(P<0.01),HFR%呈明顯增高(P<0.05),而LFR%呈極明顯降低(P<0.01),見表2。

        比較20例門診非貧血患者采血后于72 h與即時的白細(xì)胞計(jì)數(shù)差異,另將30例住院貧血患者采血后于24 h及72 h分別與2 h進(jìn)行白細(xì)胞計(jì)數(shù)差異的比較,結(jié)果顯示:2組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P >0.05),見表3。

        表1 20例非貧血患者靜脈全血不同檢測時間下RET相關(guān)參數(shù)的比較

        表2 30例貧血患者靜脈全血不同檢測時間下RET相關(guān)參數(shù)的比較

        表3 貧血及非貧血患者靜脈全血不同檢測時間下白細(xì)胞計(jì)數(shù)的比較

        討 論

        高端血液分析儀檢測速度快、精密度高,且可進(jìn)行RET多項(xiàng)參數(shù)的檢測。RET是晚幼紅細(xì)胞脫核后發(fā)育為成熟RBC過程中胞漿中含有殘留RNA的RBC,Sysmex XE-2100全自動血液分析儀根據(jù)RET RNA含量的不同用熒光染料使其著色,用流式細(xì)胞術(shù)將 RET分成 HFR、MFR和LFR,熒光強(qiáng)度越高,RET越幼稚。IRF是指含高RNA的RET與總RET的比值,是評價紅系增生活躍有用的指標(biāo),各參數(shù)間的關(guān)系是:IRF%=HFR%+MFR%。然而由于RET測定非常規(guī)項(xiàng)目,標(biāo)本量較少,有些醫(yī)院可能會集中幾天的標(biāo)本一起進(jìn)行測定。為明確標(biāo)本放置時間過長進(jìn)行RET檢測是否會影響結(jié)果的準(zhǔn)確性,本實(shí)驗(yàn)比較了貧血及非貧血患者采血后不同時間點(diǎn)RET檢測結(jié)果的差異。

        我們認(rèn)為,采血后立即進(jìn)行檢測(如床邊檢測)結(jié)果應(yīng)為準(zhǔn)確值,此時血液成分尚來不及與抗凝劑發(fā)生充分作用,產(chǎn)生形態(tài)變化及假性凝集等情況從而影響檢測結(jié)果。本組研究結(jié)果顯示,非貧血患者采血后即刻直至72 h為止,RET#及RET%檢測結(jié)果均無明顯改變(P>0.05);而IRF%、HFR%、MFR%及LFR%的結(jié)果至72 h時檢測結(jié)果才出現(xiàn)明顯變化(詳見表1)。與此結(jié)果略有不同的是,貧血患者RET#及RET%至72 h時檢測結(jié)果開始出現(xiàn)明顯降低(P<0.05);而IRF%、HFR%、MFR%及LFR%的結(jié)果從24 h開始即出現(xiàn)明顯變化(詳見表2)。該結(jié)果與國內(nèi)張春平等[3]報道的“RET、IRF、LFR 在 3d的保存時間內(nèi)雖有輕微的變化趨勢,但與初次檢測值比較均未發(fā)生明顯改變”的結(jié)論并不完全一致,這可能是由于所選病例組成不同的原因。

        雖然貧血與非貧血患者RET各指標(biāo)發(fā)生變化出現(xiàn)的時間有所不同,但變化的趨勢是一致的,均表現(xiàn)為IRF%、HFR%和MFR%呈明顯增高(P<0.05),LFR%呈明顯降低(P <0.05)。推測此現(xiàn)象產(chǎn)生的原因可能是由于RET離體后會在體外繼續(xù)發(fā)育成熟,首先表現(xiàn)為較成熟的網(wǎng)織紅細(xì)胞(LFR)先轉(zhuǎn)變?yōu)槌墒霷BC,LFR的減少導(dǎo)致HFR和MFR的相對比例增加,而RET總量會逐漸減少[4]。貧血患者標(biāo)本各指標(biāo)出現(xiàn)明顯變化較非貧血患者早,可能是由于貧血患者RET體外發(fā)育所需時間較正常人短所致。當(dāng)然,貧血的嚴(yán)重程度不同時由于RET含量不同也可能對標(biāo)本放置時間的反應(yīng)有不同影響,還有待進(jìn)一步探討。另外,通過比較2組患者在不同時間點(diǎn)白細(xì)胞計(jì)數(shù)的差異,結(jié)果顯示差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(見表3),因此,可以排除WBC降解碎片混入RET檢測區(qū)域致使核酸含量增高所帶來的干擾影響。

        一般來說,臨床上有檢測RET相關(guān)參數(shù)需求的患者多數(shù)為RBC系統(tǒng)生成障礙患者,即貧血患者。因此,原則上對于凡是需要進(jìn)行RET檢測患者的標(biāo)本,應(yīng)最好在24 h以內(nèi)檢測方能較好地反映結(jié)果的準(zhǔn)確性。

        [1]史占林,劉新記,付紅芹.標(biāo)本放置時間對血細(xì)胞分析儀檢測結(jié)果的影響[J].職業(yè)與健康,2010,26(5):509-510.

        [2]劉華森.保存標(biāo)本的時間和溫度對血細(xì)胞參數(shù)的影響[J].現(xiàn)代臨床醫(yī)學(xué)生物工程學(xué)雜志,2006,12(2):191-192.

        [3]張春平,唐小平,鐘亞玲,等.全血標(biāo)本不同保存溫度和時間對Sysmex XE-2100測定血細(xì)胞參數(shù)的影響[J].西部醫(yī)學(xué),2010,22(7):1312-1314.

        [4]李雪光,梁月桂,王 薇,等.采血后體外放置時間對網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的影響[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,1996,19(6):32.

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