劉迎嘉 張晨

樹突狀細(xì)胞在維吾爾族宮頸癌中的臨床病理特征及意義

劉迎嘉 張晨

目的 研究宮頸正常組織、慢性炎癥、宮頸上皮內(nèi)瘤變(cervical intraepithelial neoplasia, CIN)組織、宮頸癌中樹突狀細(xì)胞(dendritic cells, DC)分布變化, 探討腫瘤局部免疫功能狀態(tài)。方法 應(yīng)用免疫組化S-P法檢測正常宮頸、慢性炎癥、CIN組織及宮頸癌中的DC形態(tài)分布特征。結(jié)果 宮頸癌組中DC高度浸潤13例, 低度浸潤27例；CIN組中高度浸潤24例, 低度浸潤6例；慢性炎癥組中高度浸潤11例, 低度浸潤4例；正常對照組中高度浸潤10例, 低度浸潤5例。CIN 組的DC高度浸潤率高于宮頸癌組和正常對照組, 相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05), CIN組與炎癥組DC高度浸潤率相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。宮頸癌組DC高度浸潤率小于正常對照組和炎癥組, 差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。結(jié)論 DC在子宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展中起著重要的作用, 反映腫瘤局部的免疫狀態(tài), 為宮頸癌預(yù)后的判斷和生物治療提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

子宮頸癌；樹突狀細(xì)胞；免疫組化；維吾爾族

在新疆宮頸癌一直居維吾爾族婦女惡性腫瘤之首［1］。近年來其發(fā)病呈明顯上升趨勢和年輕化［2］。樹突狀細(xì)胞(dendritic cells, DC)在抗腫瘤免疫反應(yīng)中起重要作用。研究腫瘤微環(huán)境中的免疫狀態(tài)往往比外周血免疫功能更能確切反映宿主的抗瘤免疫狀態(tài)。

本實(shí)驗(yàn)通過研究維吾爾族宮頸癌腫瘤微環(huán)境中DC的數(shù)目、形態(tài)、分布特征推測腫瘤局部免疫功能狀態(tài), 為宮頸癌預(yù)后的判斷和生物治療提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料 宮頸對照組、慢性炎癥組、CIN組、腫瘤組取自新疆醫(yī)科大學(xué)第五附屬醫(yī)院病理科2008年4月至2012年3月間存檔組織蠟塊。標(biāo)本共計100例, 其中對照組15例；慢性炎癥組15例；CIN組30例；宮頸癌40例；均為維吾爾族；臨床分期：0～Ⅰ期7例, Ⅱ期16例, Ⅲ期17例；病理分級：高中分化17例, 低分化23例；腫瘤直徑＜ 4 cm者14例, ≥4 cm者26例。

1.2 方法

1.2.1 免疫組化 所有標(biāo)本經(jīng)10%福爾馬林液固定, 取材脫水后, 石蠟包埋, 4 μm厚連續(xù)切片, 分別行HE染色和DC免疫組化染色。鼠抗人單克隆S-100抗體購自福州邁新公司。免疫組化采用S-P法, 嚴(yán)格按S-P試劑盒說明書操作。用已知陽性片做對照, PBS代一抗做陰性對照。

1.2.2 結(jié)果判定 S-100蛋白陽性標(biāo)記的DC呈棕黃色, 定位在胞漿。DC的浸潤程度, 依據(jù)Furukawa［3］等提出的分級標(biāo)準(zhǔn)：在低倍鏡下選擇細(xì)胞最密集的區(qū)域, 用400倍鏡觀察10個不連續(xù)視野計數(shù), 0～20個陽性細(xì)胞為無～輕度浸潤,＞20個為顯著浸潤。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計軟件包進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析, 對相關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行χ2檢驗(yàn), 檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 DC 在子宮頸各級上皮中的形態(tài)特點(diǎn)和分布 對照組、慢性炎癥組DC分布于鱗狀上皮基底細(xì)胞層及棘細(xì)胞層, 呈分枝狀, 有較多突起。CIN中部分DC的突起與周圍異型上皮細(xì)胞接觸, 包繞細(xì)胞。早期癌周圍組織中, DC散在分布于距癌巢較遠(yuǎn)的癌周區(qū), 多數(shù)胞漿有多個突起, 呈分枝狀；分布于癌巢內(nèi)的DC多呈圓形或橢圓形, 少數(shù)有較多分支, 也可見到DC的突起與腫瘤細(xì)胞接觸。晚期DC的數(shù)量明顯少于早期癌組織, 少見DC與腫瘤細(xì)胞接觸。

2.2 DC與宮頸癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系(見表1)

表1 DC與宮頸癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系

臨床0～Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ 期宮頸癌患者DC高度浸潤組例數(shù)分別是：4例、7例、2例, 高度浸潤率分別是57.1%、43.75%、11.76%, 其高度浸潤率隨腫瘤分期而降低, 差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。

高中分化與低分化宮頸癌患者DC浸潤程度相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。

腫瘤直徑≥4與＜4宮頸癌患者DC浸潤程度相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。

3 討論

DC作為功能最強(qiáng)的專職抗原呈遞細(xì)胞, 能激活靜息型T細(xì)胞激發(fā)初始免疫應(yīng)答, 在體內(nèi)發(fā)揮強(qiáng)大的免疫監(jiān)視功能［4］。DC在啟動抗腫瘤免疫反應(yīng)中起關(guān)鍵作用［5］。當(dāng)DC受到炎性刺激后在受體CCR7的誘導(dǎo)下經(jīng)淋巴管進(jìn)入淋巴結(jié)的T細(xì)胞區(qū), 遞呈抗原并激活T淋巴細(xì)胞［6］。

本研究發(fā)現(xiàn)宮頸癌組織中大多數(shù)DC細(xì)胞形態(tài)為橢圓形或圓形, 樹突少, 無法與腫瘤細(xì)胞抗原接觸, 這種形態(tài)提示這些存在于腫瘤組織中的DC多數(shù)是不成熟的或處于靜息狀態(tài), 不具有抗原提呈能力, 導(dǎo)致局部免疫能力降低, 使腫瘤發(fā)生發(fā)展。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示CIN組中DC浸潤程度顯著增高,說明CIN患者局部免疫能力增強(qiáng), DC在病變區(qū)增多, 發(fā)揮其抗原呈遞功能, 激活細(xì)胞免疫, 抵御疾病發(fā)展。

本研究顯示DC浸潤程度隨臨床分期而降低, 其差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05), 而與組織分化程度、腫瘤直徑無關(guān), 其差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。上述結(jié)果提示DC并不能改變腫瘤細(xì)胞的分化等特征, 但與臨床分期呈負(fù)相關(guān)。因此推測DC高度浸潤組的宮頸癌患者患者預(yù)后較好。同時也證實(shí)了臨床分期是影響子宮頸癌預(yù)后的一個重要因素。由于DC與影響預(yù)后的指標(biāo)有著密切的關(guān)系, 提示DC是一個重要的影響宮頸癌預(yù)后的因素, 可能成為子宮頸癌預(yù)后的重要指標(biāo)。

［1］ 拉萊, 蘇祖克,彭玉華.新疆不同民族子宮頸癌發(fā)病趨勢分析.新疆醫(yī)科大學(xué)學(xué)報, 2006,29(7):569-571.

［2］ 于黎明, 哈春芳, 熊英.宮頸癌發(fā)病因素及年輕化趨勢的探討.寧夏醫(yī)學(xué)雜志, 2004,10:613-615.

［3］ Furukawa T, Watanabe S, Kodama T, et al.T-zone histiocytes in adenocarcinoma of the lung in relation to postoperative prognosis .Cancer,1985,56:2651-2657.

［4］ Lenz P Lowy DR , S e hiller JT.Pillomavirus virue like particles induce cytokines characteristic of innate immune responses in plasmacytoid dendritic cells.Eur J Immunol, 2005,35(5):1548.

［5］ Almand B, Resser JR, Lindman B,et al.Clinical significance of defective dendritic cell differentiation in cancer.Clin Cancer Res, 2000,6:1755-1766.

［6］ Sharma S,Stolina M,L zhu,et al.Secondary lymphoid organ chemokine reduces pulmonary tumor burden in spontaneous murine bronchoalveolar cell carcinoma.Cancer Res, 2001,61(17):6406-6412.

The clinical pathological features and significance of DC in cervical cancer in Uighur

L IU Ying-jia,

ZHANG Chen. Fifth Affiliated Hospital,Xinjiang Medical University, Urumqi 830011, China

Objective To study the infiltrating degree and distributing of dendritic cells(DC) in uterine cervical tissue, and the relation between them, to discuss the immune function of local tumor.Methods Normal uterine cervix, inflammatory uterine cervix , CIN and of cervical carcinoma were identified the expression of DC by immunehistochemical method (S-P).Results The infiltrating degree of DC in epithelial CIN was higher than that in normal uterine and cervical carcinoma, their difference had statistic significance(P＜0.05), the difference in the CIN and inflammatory cervix had no statistic significance (P＞0.05).Conclusion DC react on the pathogenesis and development of cervical squmous carcinoma, provide experiment there under to prognosis and biological treatment in cervical carcinoma.

Cervical carcinoma; Dendritic cell; Immunehistochemical method; Uyghur

新疆醫(yī)科大學(xué)科研創(chuàng)新基金(項(xiàng)目編號：XJC201074)

830011 烏魯木齊, 新疆醫(yī)科大學(xué)第五附屬醫(yī)院新疆