王 帥 李忠海 付湘晉 劉芳芳

（中南林業(yè)科技大學(xué)食品學(xué)院，湖南 長沙 410004）

擬除蟲菊酯類農(nóng)藥因其高效、廣譜、低毒、低殘留的特點(diǎn)被廣泛用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中。近年來，擬除蟲菊酯類農(nóng)藥被大量用于漁業(yè)養(yǎng)殖中，主要用于清塘、殺有害微生物等［1］。這些農(nóng)藥進(jìn)入水體后，對水體會造成污染，還可富集于魚類體內(nèi)，并經(jīng)食物鏈進(jìn)入人體，影響人類健康［2］。但目前水體中擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留的檢測方法多涉及飲用水和地表水，針對魚塘養(yǎng)殖水的研究較少［3，4］。

目前提取水中擬除蟲菊酯類農(nóng)藥的方法主要有液－液萃取法［5，6］和固 相萃 取 法［7，8］。 但 在 擬 除 蟲 菊 酯 類 農(nóng) 藥 的 富集效果上，固相萃取效果較差，液液萃效果較理想［9，10］。因此，在萃取水中擬除蟲菊酯類農(nóng)藥時，多選用液液萃取法。GB／T 5750.9——2006就是以石油醚為提取溶劑，采用液液萃取法測定生活飲用水中聯(lián)苯菊酯、甲氰菊酯、功夫菊酯、氯氰菊酯、溴氰菊酯的。但該方法的定量限較高（0.04～0.64μg／L），無法滿足漁業(yè)水質(zhì)擬除蟲菊酯類農(nóng)藥檢測的要求。因此，急需建立魚塘養(yǎng)殖水中擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留測定的方法。

本試驗在GB／T 5750.9——2006的基礎(chǔ)上，改變提取溶劑，建立以正己烷為萃取溶劑，氣相色譜法測定魚塘水中5種擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留量的方法。該方法操作簡便、快速、靈敏度高，其方法的定量限（0.02～0.10μg／L）顯著低于中國國標(biāo)，能滿足魚塘養(yǎng)殖水中擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留檢測的要求。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

水樣：于2012年9月采自長沙郊區(qū)5個具有代表性的漁場分別是河石村漁場、長塘漁場、湘廚旺俯釣魚臺、遠(yuǎn)征釣魚臺、山鷹潭漁場。用帶聚四氟乙烯襯墊旋蓋的棕色廣口瓶采集樣品。所采集的樣品于4℃冰箱內(nèi)保存，盡快在24h內(nèi)萃取；

石油醚、正己烷：色譜純，國藥集團(tuán)（上海）化學(xué)試劑有限公司；

氯化鈉、無水硫酸鈉：分析純，國藥集團(tuán)（上海）化學(xué)試劑有限公司；

甲氰菊酯、聯(lián)苯菊酯、功夫菊酯、氯氰菊酯、溴氰菊酯：1mg／L，國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心。

1.2 主要儀器設(shè)備

氣相色譜儀（配有63Ni電子捕獲檢測器）：GC－2010，日本島津公司；

色譜柱（30m×0.25mm×0.25μm）：Agilent DB－5，美國Agilent公司；

分液漏斗：250mL，國藥集團(tuán)（上海）化學(xué)試劑有限公司；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀：SY－5000，上海亞榮生化儀器廠。

1.3 樣品前處理

取200mL均勻水樣置于250mL分液漏斗中，加入5.0g氯化鈉，搖勻。向水樣中加入10mL正己烷，劇烈震蕩萃取5min，待分層后，收集有機(jī)相；再用正己烷萃取1次（每次25mL），合并兩次萃取的有機(jī)相，并過無水硫酸鈉小柱脫水，收集于100mL旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶中；用少量正己烷多次淋洗分液漏斗和無水硫酸鈉，洗液一并收集于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶中。將萃取液在40℃下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干，用正己烷定容至1.0mL，供氣相色譜分析。采用單點(diǎn)校正法定量，樣品中擬除蟲菊酯類農(nóng)藥的含量可按式（1）計算：

式中：

X—— 樣品中被測組分殘留量，μg／L；

Csi—— 用于單點(diǎn)校正的標(biāo)樣濃度，μg／mL；

A——樣品的峰面積；

Asi——用于單點(diǎn)校正標(biāo)樣的峰面積；

V—— 樣品溶液定容體積，mL；

m—— 樣品的體積，L。

1.4 樣品前處理條件優(yōu)化

1.4.1 萃取溶劑的選擇 由于測定的5種菊酯類農(nóng)藥的辛醇－水分配系數(shù)（Kow）值較低，易溶于非極性較強(qiáng)的溶劑，因此本試驗選擇非極性較強(qiáng)的正己烷溶液、石油醚溶液及二者混合液（V／V，50∶50）作為萃取溶劑，進(jìn)行比較選擇。取200mL加標(biāo)水樣倒入250mL分液漏斗內(nèi)，并用20mL萃取溶劑進(jìn)行萃取。

1.4.2 萃取溶劑體積的確定 分別用10，20，30mL正己烷溶液對200mL加標(biāo)水樣進(jìn)行萃取，考察不同體積的正己烷溶液對萃取效果的影響。

1.4.3 萃取次數(shù)的選擇 取加標(biāo)水樣200mL，分別用20mL正己烷溶液進(jìn)行1次和2次萃取，考察萃取次數(shù)對萃取效率的影響。

1.5 色譜條件

色譜柱溫度：初始溫度150℃，保持2min，以6℃／min速率升至270℃，保持25min；載氣為高純氮?dú)?，色譜柱流速0.6mL／min。進(jìn)樣口溫度270℃，不分流進(jìn)樣，進(jìn)樣量1μL。電 子 捕 獲 檢 測 器 （ECD）溫 度 300 ℃，尾 吹30mL／min。在此色譜條件下，5種菊酯類農(nóng)藥得到良好分離，5種菊酯類磷農(nóng)藥的色譜圖見圖1。

2 結(jié)果與討論

2.1 萃取溶劑的選擇

不同萃取溶劑對5種菊酯類農(nóng)藥回收率的影響見表1。試驗結(jié)果表明，3種萃取溶劑得到的回收率均在75%以上，其中正己烷的萃取效果最好，這可能是因為5種菊酯類農(nóng)藥的Kow較低，更易于溶于非極性更強(qiáng)的正己烷。

圖1 5種菊酯類農(nóng)藥的色譜圖Figure 1 Chromatograms of 5pyrethroids

表1 不同萃取溶劑對5種菊酯類農(nóng)藥回收率的影響Table 1 Effect of different solvent on the recoveries of 5pyrethroids ／%

2.2 萃取溶劑體積的確定

不同體積的正己烷萃取劑對5種菊酯類農(nóng)藥回收率的影響見表2。由表2可知，5種菊酯類農(nóng)藥的回收率隨著正己烷體積的加大而增加，都能滿足農(nóng)殘回收分析的要求。當(dāng)正己烷為30mL時萃取效果達(dá)到最高，但此時色譜圖中干擾信號增大。因此，試驗選擇正己烷體積為20mL。

表2 不同體積的正己烷萃取劑對5種菊酯類農(nóng)藥回收率的影響Table 2 Effect of different solvent volumes on the recoveries of 5pyrethroids ／%

2.3 萃取次數(shù)的選擇

不同萃取次數(shù)對5種菊酯類農(nóng)藥回收率的影響結(jié)果見表3。由表3可知，萃取1次和萃取2次得到的回收率均在82%以上，且2次萃取的效果比1次萃取效果好。因此，選擇萃取的次數(shù)為2次。

表3 萃取次數(shù)對5種菊酯類農(nóng)藥回收率的影響Table 3 Effect of numbers of extraction on the recoveries of 5pyrethroids ／%

2.4 加標(biāo)回收率和相對標(biāo)準(zhǔn)偏差

在水樣中添加相當(dāng)于0.5，1.0，5.0μg／L 3個水平的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，按1.3的方法，每個加標(biāo)水平重復(fù)測定6次，結(jié)果見表4。由表4可知，5種擬除蟲菊酯類農(nóng)藥的加標(biāo)回收率在80.52%～91.59%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差在3.47%～6.21%。

表4 5種擬除蟲菊酯農(nóng)藥加標(biāo)回收率和相對標(biāo)準(zhǔn)偏差Table 4 Recovery（%）± RSD（%）for 5pyrethroids（n＝6）／%

2.5 定量檢測限（LOQ）

LOQ以10倍信噪比（S／N ＝10）計算，經(jīng)計算聯(lián)苯菊酯的LOQ為0.02μg／L，甲氰菊酯的LOQ為0.04μg／L，功夫菊 酯 的 LOQ 為 0.03μg／L，氯 氰 菊 酯 的 LOQ 為0.08μg／L、溴氰菊酯的LOQ為0.10μg／L。

2.6 實際樣品分析

采自5個漁場的30瓶水樣均未有待測農(nóng)藥檢出。經(jīng)調(diào)研得知5～7月是中華鳋和錨頭鳋病的高發(fā)期，擬除蟲菊酯類農(nóng)藥能有效殺滅這類寄生蟲，因此，每到夏季各漁場都會定期向魚塘噴灑該類農(nóng)藥。由于采樣時間是在9月，正值魚寄生蟲病高峰期剛過，加之?dāng)M除蟲菊酯類農(nóng)藥在水中極不穩(wěn)定，見光易分解，因此無待測農(nóng)藥檢出。

3 結(jié)論

建立了魚塘養(yǎng)殖水中5種擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留量的測定方法。結(jié)果表明，該方法能得到較高的回收率（80.52%～91.59%）和較低的定量限（0.02～0.10μg／L）。為魚塘養(yǎng)殖水中農(nóng)藥殘留量的測定提供依據(jù)。

1 萬譯文，肖維，黃華偉.氣相色譜法測定水產(chǎn)品中擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留量［J］.食品與機(jī)械，2010，26（5）：68～70.

2 林玉鎖，龔瑞忠，朱忠林.農(nóng)藥與生態(tài)環(huán)境保護(hù)［M］.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，1999：78.

3 G N Kasozi，B T Kiremire，F(xiàn) W B Bugenyi，et al.Organochlorine Residues in fish and water samples from Lake Victoria，U－ganda［J］.Journal of Environmental，2006，35（2）：584～589.

4 馬志梅.氣相色譜法同時測定生活飲用水中五種菊酯類農(nóng)藥殘留量［J］.福建分析測試，2007，16（3）：61～64.

5 胡冠九，劉建琳.毛細(xì)管柱氣相色譜法測定水中痕量擬除蟲菊酯殺蟲劑［J］.中國環(huán)境監(jiān)測，2001，17（2）：45～46.

6 李紅光，李永波，徐清，等.采用不同萃取方法測定飲用水中7種擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留量的比較研究［J］.中國衛(wèi)生檢驗雜志，2008，18（12）：2 557～2 558.

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9 Guan H Tan.Comparison of solvent extraction and solid－phase extraction for the determination of organochlorine pesticide residues in water［J］.Analyst，1992，117：1 129～1 132.

10 張利飛.水體中甲胺磷等農(nóng)藥的測定－氣相色譜質(zhì)譜法［D］.北京：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院，2005.