曾富佳 張 玨 高玉瓊 劉建華 丁麗娜*

1.遵義醫(yī)藥高等專(zhuān)科學(xué)校，貴州 遵義 563002;2.貴州省生物基地，貴州 貴陽(yáng) 550002

山茱萸系山茱萸科植物Cornus of ficinalis Sieb.et Zucc.的干燥成熟果實(shí)，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，本品酸、澀，微溫，歸肝、腎經(jīng)，具有補(bǔ)肝益腎，澀精固脫之功效。生長(zhǎng)于山坡灌叢中。分布于陜西、山西、山東、安微、浙江、四川等省。山茱萸含有生理活性較強(qiáng)的山茱萸甙、酒石酸、沒(méi)食子酸、蘋(píng)果酸、樹(shù)酯、鞣質(zhì)和多種維生素等有效成分，具有增強(qiáng)免疫、抗炎、抗菌等藥理作用，是中醫(yī)臨床中常用的一味藥［1-4］。本文首次對(duì)貴州地道藥材山茱萸進(jìn)行采水蒸氣蒸餾法，從山茱萸植物果實(shí)中提取了揮發(fā)油，并用氣相色譜-質(zhì)譜-計(jì)算機(jī)聯(lián)用系統(tǒng)對(duì)山茱萸揮發(fā)油化學(xué)組成進(jìn)行了定性定量研究，分析鑒定了57個(gè)化學(xué)成分。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)材料 山茱萸藥材產(chǎn)自貴州地道藥材，由貴州大學(xué)生物與科學(xué)學(xué)院生物系關(guān)平教授鑒定為Cornus of ficinalis Sieb.et Zucc.的干燥成熟果實(shí)。

1.1.2 試劑 所用試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純?cè)噭?/p>

1.1.3 儀器 美國(guó)惠普公司 (Hcwlctt Packard)HP-6890/HP5973 GC-MS氣質(zhì)聯(lián)用儀。

HP-INnowax Polyethylene Glycol彈性石英毛細(xì)管柱(30.0m ×320μm ×0.25μm)

1.2 方法

1.2.1 樣品供試液的制備 取山茱萸藥材250g，粉碎，加入水2000ml，正己烷4ml，充分搖勻，進(jìn)行水蒸氣蒸餾，得油狀物0.5ml(含正己烷)，用無(wú)水硫酸鈉干燥，作為供試品。

1.2.2 山茱萸揮發(fā)油定性定量分析 取山茱萸有機(jī)溶劑萃取物1μl，進(jìn)樣，用GC-MS進(jìn)行測(cè)定。

氣相色譜條件 ：色譜柱為HP-INnowax Polyethylene Glycol彈性石英毛細(xì)管柱 (30.0μm × 320μm × 0.25μm)。柱溫50℃，保持2min，然后以4℃·min-1升溫至230℃，保持20min;氣化室溫度250℃;載氣為高純度氦氣(99.999%); 柱前壓 15.08psi，載氣流量 2.0mL·min-1;進(jìn)樣量1μL(揮發(fā)油與乙醚混合溶液);分流比40∶1。

質(zhì)譜條件：離子源：EI源;離子源溫度230℃;四極桿溫度150℃;電子能量70 eV;發(fā)射電流34.6 μA;倍增器電壓1936V;接口溫度280℃;質(zhì)量范圍10～550amu。

定性分析：通過(guò)HP MSD化學(xué)工作站檢索Nist98標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖庫(kù)和WILEY275質(zhì)譜圖庫(kù)，同時(shí)結(jié)合有關(guān)質(zhì)譜圖文獻(xiàn)解析，以確認(rèn)山茱萸揮發(fā)性物質(zhì)的化學(xué)成分。

定量分析：并通過(guò)HP MSD化學(xué)工作站數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)，按峰面積歸一化法進(jìn)行計(jì)算求出各化學(xué)成分的峰面積相對(duì)百分含量。

2 結(jié)果

山茱萸化學(xué)成分圖譜及各化學(xué)成分的峰面積相對(duì)百分含量見(jiàn)圖1，表1。

表1 山茱萸揮發(fā)性物質(zhì)的化學(xué)成分和相對(duì)百分含量

序號(hào) 出峰時(shí)間 化合物名稱 分子量 分子式 相對(duì)含量50 27.025 .beta.-Maaliene 204 C15H240.62%51 27.421(-)-.DELTA.-SELINENE 204 C15H24 1.64%52 27.666 .alpha.-Copaene 204 C15H24 2.44%53 27.977 2-Propenoic acid，3-(4-methoxyphenyl)-，ethyl ester 206 C12H14O3 2.56%54 28.165 1，4-dimethyl-7-(1-methylethyl)azulene 198 C15H18 1.81%55 30.286 Anthracene(CAS)178 C14H10 1.14%56 30.842 Butyl phthalate 278 C16H22O4 3.63%57 34.442 Hexadecanoic acid，1-methylethyl ester(CAS)298 C19H38O21.47%

3 討論

在黔產(chǎn)山茱萸揮發(fā)性成分研究中，共分離提取74個(gè)成分，檢測(cè)出57個(gè)。占揮發(fā)油總量的93.74%。大于2%的成分有12個(gè)，其中相對(duì)百分含量較高的為肉桂酸乙酯 (Ethyl cinnamate)21.9%，1，2-亞甲二氧基-4-甲氧基-5-(-2烯丙基)-苯8.53%，苯二甲酸丁酯 (Butyl phthalate)3.63%，冰 片 (BorneolL)3.37%，茴 香 腦 (Anethole)3.33%，α-古巴烯 (Alpha-Copaene)2.86%，α-松油醇(Alpha.-Terpinene)2.63%。對(duì)黔產(chǎn)山茱萸進(jìn)行揮發(fā)性成分的分析可以看出，酯類(lèi)揮發(fā)油成分最高。其它［5-6］文獻(xiàn)認(rèn)為山茱萸揮發(fā)性成分中最高酯類(lèi)揮發(fā)油多為鄰苯二甲酯類(lèi)揮發(fā)性成分較高，而黔產(chǎn)山茱萸則肉桂酸酯類(lèi)含量最高。本研究通過(guò)對(duì)山茱萸揮發(fā)油進(jìn)行分析鑒定及相對(duì)含量測(cè)定，為綜合利用黔產(chǎn)山茱萸植物資源等提供科學(xué)依據(jù)。

［1］李平，王艷輝，馬潤(rùn)宇.水提山茱萸多糖的理化性質(zhì)及抗氧化活性研究［J］.食品科學(xué)，2003，24(7)：133-137.

［2］李平，王艷輝，馬潤(rùn)宇.山茱萸多糖PFCA m的理化性質(zhì)及生物活性研究［J］.中國(guó)藥學(xué)雜志，2003，38(8)：583-586.

［3］苗明三，方曉燕，楊云山.山茱萸多糖對(duì)小鼠免疫功能的影響［J］.河南中醫(yī)，2002，22(2)：12—13.

［4］江蘇新醫(yī)學(xué)院《中藥大辭典》編寫(xiě)組.中藥大辭典［M］.上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，2003，189-190.

［5］韓志慧，曹文豪，李心寶，等.GC-MS分析山茱萸揮發(fā)油的化學(xué)成分［J］.精細(xì)化工，2006，23(2)：130-132.

［6］王學(xué)斌，何娟，楊柳，等.用GC-MS法觀察3個(gè)不同產(chǎn)地山茱萸的揮發(fā)油成分［J］.分析測(cè)試技術(shù)與儀器，2006，12(2)：116-120.