劉抗倫 丁偉 向燕 徐培平

冰香散是國家自然科學基金課題(81072948）中運用中藥預防流感所研制的純中藥制劑。它是由廣藿香、野菊花、小茴香、冰片等中藥提取的揮發(fā)油制劑。廣藿香為唇形科植物廣藿香的干燥地上部分。辛，微溫。具有芳香化濁、和中止嘔、發(fā)表解暑作用。野菊花為菊科植物野菊的干燥頭狀花序?？唷⑿痢⑽⒑＞哂星鍩峤舛?、瀉火平肝作用。小茴香為傘形科植物茴香的干燥成熟果實。辛、溫。具有散寒止痛、理氣和胃作用。艾葉為菊科植物艾的干燥葉。辛、苦、溫，具有溫經(jīng)止血、散寒止痛作用。冰片辛、苦、微寒，具有開竅醒神、清熱止痛作用［1］。經(jīng)實驗表明，冰香散體外對甲Ⅰ型流感病毒有預防作用和直接抑制作用［2］。

課題組以冰香散揮發(fā)油得率為指標，采用共水蒸餾法，用L9(34)正交試驗優(yōu)選提取條件，選取冰香散的顆粒粒度、加水量、提取時間、提取次數(shù)4個因素，每個因素設(shè)3個水平，篩選冰香散的最佳提取工藝，為冰香散的藥物制備和質(zhì)量控制提供依據(jù)。

1 材料和儀器

1.1 藥材

冰香散處方為廣藿香15 g、野菊花15 g、艾草10 g、茴香10 g、冰片1 g，購自廣州中醫(yī)藥大學第一附屬醫(yī)院。

1.2 儀器

TC-15套式恒溫器(海寧市新華醫(yī)療器械廠);揮發(fā)油測定器(上海玻璃儀器廠);BS224S型電子分析天平(德國Sartorius公司);KQ5200E型超聲儀(昆山市超聲儀器有限公司)。

2 方法與結(jié)果

2.1 正交試驗設(shè)計

根據(jù)預試驗及冰香散中所含有中藥材的揮發(fā)油提取工藝研究文獻［3-5］，綜合考慮影響揮發(fā)油的提取因素，選擇冰香散顆粒粒度(A)、加水倍量(B)、浸泡時間(C)、蒸餾時間(D)4項為考察因素，每個因素設(shè)3個水平，以揮發(fā)油提取率作為考察指標，設(shè)計L9(34)正交試驗。采用共水蒸餾法，所得揮發(fā)油收集在揮發(fā)油測定器中，精確讀取揮發(fā)油得油量。冰香散提取因素水平表見表1。

表1 冰香散提取工藝因素水平

2.2 揮發(fā)油提取

以冰香散處方準確稱取50 g冰香散藥材，按照中國藥典2010版標準制成粗粉、中粉、細粉，放置于2000 ml圓底燒瓶中，采用L9(34)正交表安排實驗，按《中國藥典》2010年版一部附錄XD甲法揮發(fā)油測定法，提取揮發(fā)油，放置2小時，精確讀取揮發(fā)油量，平行實驗3次，計算揮發(fā)油得油率。公式為:得油率(%)=(得油量×揮發(fā)油密度/冰香散重量)× 100%［3］。

正交試驗結(jié)果見表2，各因素組合的極差分別為:顆粒粒度(RA)0.15，加水量(RB)0.18，浸泡時間(RC)0.12，蒸餾時間(RD)0.39，它們之間的關(guān)系是RD＞RB＞RA＞RC，極差分析結(jié)果表明，4個因素的影響大小依次為:蒸餾時間(D)＞加水量(B)＞顆粒粒度(A)＞浸泡時間(C)，浸泡時間對得油率的影響最小，所以將此列作為誤差列進行方差分析。

表2 正交試驗結(jié)果

2.3 方差分析

為進一步確定各因素對結(jié)果的影響大小，對試驗結(jié)果進行了方差分析。見表3。方差分析結(jié)果表明，顆粒粒度(A)、加水量(B)、浸泡時間(C)、蒸餾時間(D)四個影響因素的P值都大于0.05，即這4個因素對實驗結(jié)果均無顯著影響。根據(jù)正交試驗結(jié)果，得出的最佳提取工藝組合為A2B1C2D3，即將藥材粉碎成中粉，加10倍量水，浸泡1.5小時，提取6小時。

表3 方差分析表

3 結(jié)論與討論

采用正交試驗，運用方差分析，對影響共水蒸餾法提取冰香散揮發(fā)油的主要因素進行分析，本實驗以得油率為考察指標，對冰香散揮發(fā)油的最佳提取工藝進行了優(yōu)選。結(jié)果表明，冰香散揮發(fā)油的最佳提取工藝條件為選用冰香散藥材粉碎成中粉，加10倍量水，浸泡1.5小時，提取6小時。

本實驗中，由極差RD＞RB＞RA＞RC，由此可知提取時間是影響揮發(fā)油得率的重要因素，提取時間越長，得油率越高，表明隨著提取時間的延長，提取越來越充分。提示提取冰香散揮發(fā)油時需要重視提取時間的選擇。一般認為，藥材顆粒粒度與有效成分提取率正相關(guān)，但含揮發(fā)油類藥材要在一定的粒度下，才能提取出最多的油量。粉末過細，在蒸餾提取過程中容易吸附揮發(fā)油，使揮發(fā)油不能隨水蒸氣蒸出［6］。而且揮發(fā)油提取裝置中所用的圓底燒瓶的容積也影響揮發(fā)油的得率，燒瓶內(nèi)容物超過其容積的50% 以上，提取時容易爆沸，從而使藥材粗粉隨水流入收集裝置，這也是試驗中需要注意的問題［7］。

［1］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部)［S］.北京:中國醫(yī)藥科技出版社，2010.

［2］丁偉，趙昉，許秀妮，等.冰香散揮發(fā)油對甲Ⅰ型流感病毒體外作用研究［J］.中藥材，35(8):1298-1300.

［3］魯爭，魯雨，左杰，等.艾葉揮發(fā)油提取工藝研究［J］.時珍國醫(yī)國藥，2011，22(2):389-390.

［4］陳秋實，吳杰，翁濤，等.野菊花揮發(fā)油的提取工藝研究［J］.武漢生物工程學院學報，2008，4(3):140-142.

［5］王允忠，陳妍，烏莉婭·沙依提.正交試驗法優(yōu)選小茴香中揮發(fā)油的提取工藝［J］.新疆中醫(yī)藥，2008，26(1):12-13.

［6］崔紅花，趙英日，沈志濱.砂仁中揮發(fā)油成分的多指標均勻設(shè)計提取工藝分析［J］.時珍國醫(yī)國藥，2010，21(7):1816.

［7］魏運姣，趙熠.降香揮發(fā)油提取工藝的正交設(shè)計法優(yōu)選［J］.時珍國醫(yī)國藥，2012，23(12):3155-3156.