陳雪禮，李觀華，湯金萍，劉曉峰

(九江市第一人民醫(yī)院/南昌大學(xué)附屬九江醫(yī)院檢驗科，江西 九江 33200)

細菌感染是導(dǎo)致人類發(fā)病和死亡的主要原因之一[1]。近年來，多項研究發(fā)現(xiàn)中性粒細胞CD64的定量分析是早期診斷和鑒別細菌感染的可靠的敏感指標[2]。筆者通過對九江市第一人民醫(yī)院108例標本的中性粒細胞CD64進行定量分析，并對細菌感染的診斷價值進行回顧性研究。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取對象為2012年5月至2013年5月間九江市第一人民醫(yī)院正常體檢者32例(其中男20例，女12例，平均年齡42.8歲)，收治住院的感染患者52例(其中男24例，女28例，平均年齡55.2歲)，非細菌感染24例(其中男11例，女13例，平均年齡53.8歲)。所有對象共計男性59例，女性49例，平均50.6歲。

1.2 儀器與試劑 Beckman Coulter FC500流式細胞儀及配套試劑由美國Beckman Coulter公司提供；Beckman Coulter IMMAGE800全自動特定蛋白儀及配套試劑由美國Beckman Coulter公司提供；Siemens ADVIAR2120五分類血細胞流水線系統(tǒng)及配套試劑由德國西門子公司提供；PhoenixTM-100全自動細菌鑒定/藥敏系統(tǒng)及配套試劑由美國BD公司提供。

1.3 方法 患者入院后24～48h內(nèi)靜脈采血，中性粒細胞CD64、血液分析采集靜脈血用乙二胺二鉀抗凝，C反應(yīng)蛋白采集靜脈血用非抗凝普通試管，細菌培養(yǎng)采集靜脈血直接注入血培養(yǎng)瓶。分別進行中性粒細胞CD64、血液分析、C反應(yīng)蛋白、細菌培養(yǎng)。按臨床表現(xiàn)和細菌學(xué)檢測結(jié)果分為細菌感染組、非細菌感染組和正常對照組。中性粒細胞CD64檢測按配套試劑CD64FITC試劑盒說明書檢測。取兩支流式專用試管每支試管分別加入CD64FITC和同型對照 10μl，再分別加入 100μl全血(EDTA-K2抗凝)，混勻避光保存20min后，溶血，洗滌，加入500μlPBS溶液，靜置15min后置于流式細胞儀，檢測并計算出中性粒細胞CD64指數(shù)。C反應(yīng)蛋白、WBC及中性粒細胞百分比、細菌培養(yǎng)及鑒定均按照儀器和配套試劑的操作說明操作，且室內(nèi)質(zhì)控均在控。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 16.0統(tǒng)計軟件，對實驗數(shù)據(jù)進行配對統(tǒng)計學(xué)處理，統(tǒng)計學(xué)方法t檢驗，P<0.05為有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 細菌感染組、非細菌感染組和正常對照組CD64、WBC、中性粒細胞百分比以及C反應(yīng)蛋白檢測結(jié)果比較 見表1。

2.2 CD64指數(shù)、CRP、WBC計數(shù)、中性粒細胞百分比的敏感性和特異性 將細菌感染組、非細菌感染組和健康對照組的數(shù)據(jù)作ROC曲線(圖1)。計算出CD64指數(shù)臨界值、敏感性及特異性，見表2。

3 討論

CD64相對分子量為72000，其編碼定位于染色體 1q21.2-q21.3，是 IgG Fc 片段受體 I(FcγR I)，其能夠識別免疫球蛋白，對IgG單體具有高親和力，在介導(dǎo)體液免疫和細胞免疫間起到橋梁作用，對感染性疾病具有早期診斷的價值[3]。正常情況下，CD64主要分布于巨噬細胞、單核細胞及樹突狀細胞等抗原遞呈細胞(APC)表面，中性粒細胞表面CD64呈低水平表達，甚至幾乎不表達，且表達無性別差異[4]。當患者患感染性疾病時，受炎癥因子細菌細胞壁脂多糖、白介素-12、γ-干擾素等刺激下，中性粒細胞表面CD64表達在4~6h內(nèi)即可升高[5，6]。

表1 各組CD64、WBC、中性粒細胞百分比以及C反應(yīng)蛋白檢測結(jié)果比較

圖 1CD64、WBC、CRP、Neu%ROC 曲線

表2 CD64指數(shù)、CRP、WBC計數(shù)、中性粒細胞百分比的敏感性和特異性比較

隨著流式細胞儀的普及和應(yīng)用，外周血中性粒細胞CD64的表達在臨床診斷和治療細菌性感染中越來越多地得到應(yīng)用。近些年來，國內(nèi)很多學(xué)者也開始對中性粒細胞CD64進行了相關(guān)研究。許文芳等[7]報道CD64指數(shù)可作為診斷細菌感染的敏感指標，是重癥細菌性感染的診斷、判斷病情的可靠指標。Livaditi等[8]學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，中性粒細胞CD64的表達與細菌感染的嚴重程度和預(yù)后密切相關(guān)，可依據(jù)中性粒細胞CD64感染指數(shù)將病程劃分為膿毒癥、重癥膿毒癥和膿毒性休克，同時還發(fā)現(xiàn)其與患者死亡率呈正相關(guān)。

通過對不同病原體感染情況分組分析發(fā)現(xiàn)，細菌感染組CD64感染指數(shù)明顯高于非細菌感染組，P<0.05，組間具有顯著性差異；細菌感染組的CD64指數(shù)與WBC計數(shù)、中性粒細胞百分比以及C反應(yīng)蛋白比較呈正相關(guān)，P<0.05。且CD64指數(shù)臨界值取1時，敏感性為83.6%，特異性為90.8%，與Cid等報道的中性粒細胞CD64表達用于診斷細菌感染的敏感性79%，特異性91%一致[9]。因此，有以上數(shù)據(jù)顯示，中性粒細胞CD64能夠較為準確地顯示感染的狀態(tài)，特別在細菌性和非細菌性感染的鑒別上有較高的特異性。

綜上所述，筆者認為中性粒細胞CD64在感染性疾病的診斷和治療中具有重要作用，同時其敏感性和特異性也較白細胞、中性粒細胞百分比和C反應(yīng)蛋白高，能夠正確判斷和發(fā)現(xiàn)感染性疾病，以及在細菌性感染危重患者的預(yù)后和效果評價上具有重要的臨床意義。

[1]李彩紅.CRP、WBC及N%的聯(lián)合檢測在老年細菌性感染疾病中的應(yīng)用[J].實驗與檢驗醫(yī)學(xué)，2011,29(4):425.

[2]張曉微,趙麗,張羿,等.中性粒細胞CD64檢測對感染性疾病的診斷價值分析[J].國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2012,33(19):2315-2316.

[3]李德紅,居軍.診斷感染性疾病的新指標：中性粒細胞CD64[J].檢驗醫(yī)學(xué),2012,27(1):67-69.

[4]Elghetany MT,Lacombe F.Physiologic variations in granulocytic surface antigen expression:impact of age,gender,pregnancy,race,and stress[J].J Leukocyte Biol,2004,75(2):157-162.

[5]Hoffman JJ.Neutrophil CD64:a diagnostic marker fo infection and sepsis[J].Clin Chem Lab Med,2009,47(8):903-916.

[6]Okayama Y,Kirshenbaum AS,Metcalfe DD,et al.Expression of a functional high-affinity IgG receptor,Fc gamma RI,on human mast cells:up-regulation by IFN-gamma[J].J Immunol,2000,164(8):4332-4339.

[7]許文芳.CD64、CRP在重癥細菌感染中的診斷價值[J].檢驗醫(yī)學(xué),2011,26(2)：127-129.

[8]Livaditi O,Kotanidou A,Psarra A,et al.Neutrophil CD64expression and serum IL-8:sensitive early markers of severity and outcome in sepsis[J].Cytokine,2006,36(5-6):283-290.

[9]Cid J，Aguinaco R,Sánchez R,et al.Neutrophil CD64 expression as marker of bacterial infection:a systematic review and meta-analysis[J].J Infect,2010,60(5):313-319.