★ 易長勝 王鳳林 余良忠 廖 坤（.廣東省東莞市清溪鎮(zhèn)社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心 東莞 5660；.武警總醫(yī)院 北京 0009；.江西省中醫(yī)藥研究院 南昌 006；.廣東省東莞市清溪醫(yī)院 東莞 5660）

山楂麥曲顆粒載于部頒中藥第14冊，由山楂、麥芽、黔曲組成，功能為開胃消食，用于食欲不振，消化不良，脘腹脹滿。本次研究用高效液相色譜法對制劑中橙皮苷的含量進(jìn)行了測定。

1 儀器與試藥

HP-1100高效液相色譜儀（美國，HP化學(xué)工作站，DAD檢測器，四元梯度泵），SimplicityTM個人型超純水系統(tǒng)（Millipore公司），AG-135電子天平（梅特勒-托利多）。

橙皮苷對照品（批號：110721-200613，含量測定用，中國藥品生物制品檢定所提供），山楂麥曲顆粒（批號：20100401、20100601、20100602、20100801、20100802、20100803，江西省中醫(yī)藥研究院中試車間研制），乙腈為色譜純，其他試劑為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱：Diamonsil C18柱（4.6mm×250mm 5μ），流動相：乙腈-0.1%磷酸溶液（18：82），流速：1mL/分，檢測波長283nm，柱溫：室溫。理論板數(shù)按橙皮苷峰計算應(yīng)不低于2 500。在此條件下對照品、供試品在約15分鐘有一色譜峰（圖1）。

圖1 山楂麥曲HPLC圖

2.2 對照品溶液的制備

取橙皮苷對照品，加甲醇制成每1mL含約50 g的溶液。

2.3 供試品溶液的制備

取本品適量，研細(xì)，取約5.0g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入50%甲醇25mL，稱定重量，超聲處理45分鐘，放冷，再稱定重量，用50%甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.4 陰性對照試驗

按處方取不含黔曲的其他藥材，照本制劑的制備工藝制成陰性對照樣品，再按供試品溶液制備方法制成陰性對照溶液，取陰性對照溶液10μL，按樣品測定方法注入液相色譜儀，結(jié)果在對照品橙皮苷色譜峰相應(yīng)的位置上，無其它色譜峰出現(xiàn)，陰性對照對樣品測定無干擾。

2.5 線性關(guān)系的考察

精密稱取橙皮苷對照品5.42mg，置25mL量瓶中，加甲醇近刻度，超聲處理使溶解，并加甲醇至刻度，搖勻，即得（每1mL含橙皮苷0.2168mg）。取此對照品加甲醇稀釋成以下濃度：13.55、27.1、54.2、86.72、108.4、216.8μg/mL，分別吸取10μL，注入液相色譜儀中，按確定色譜條件測定，將樣品濃度與峰面積進(jìn)行回歸處理，回歸方程為：Y=8.426+1059.8X，r=0.99996（n=6），進(jìn)樣量0.1355-2.168μg，線性關(guān)系良好。

2.6 精密度試驗

精密吸取同一供試品溶液10μL，連續(xù)重復(fù)進(jìn)樣6次，測定橙皮苷峰面積值，數(shù)據(jù)結(jié)果分析RSD為1.94%。

2.7 穩(wěn)定性試驗

精密吸取同一供試品溶液10μL，每間隔1、2、4、8、12小時測定橙皮苷峰面積值，結(jié)果表明，供試品溶液在12小時內(nèi)穩(wěn)定，數(shù)據(jù)結(jié)果分析RSD為1.36%。

2.8 重復(fù)性試驗

取同一批樣品（20100401）以確定方法進(jìn)行提取和測定，共6份，測定橙皮苷平均含量為0.2952 mg/g，數(shù)據(jù)結(jié)果分析RSD為2.37%。

2.9 加樣回收率試驗

取同一批樣品（20100401），研細(xì)，共6份，取約2.5g精密稱定，置具塞三角瓶中，各精密加入橙皮苷對照品溶液（濃度為0.0312mg/mL，以50%甲醇為溶劑）25mL，余下同確定方法制成供試品溶液，并進(jìn)行測定，計算回收率，結(jié)果見表1。

表1 回收率測定結(jié)果

2.10 樣品測定

取山楂麥曲顆粒制劑按確定的制備方法制成供試品溶液，注入液相色譜儀進(jìn)行測定，測得另5批樣品中橙皮苷含量為0.3232、0.3549、0.1174、0.1274、0.119 mg/g。

3 討論

黔曲為曲類中藥制劑，載于部頒中藥02冊，由陳皮、青皮、枳實等藥材經(jīng)發(fā)酵制成，具有健脾開胃，理氣導(dǎo)滯，清暑化濕的功效，用于食積飽脹，胸悶腹痛，不思飲食，暑濕感冒。由于在山楂麥曲顆粒制劑中沒有找到合適的山楂中的有效成分作為含量測定指標(biāo)，因此選取黔曲中的橙皮苷進(jìn)行測定，參照文獻(xiàn)資料[1-3]采用高效液相色譜法測定本制劑中橙皮苷的含量，進(jìn)行了方法學(xué)研究，對提取溶劑（甲醇、50%甲醇、乙醇、70%乙醇）、提取方法（超聲處理、回流）、提取溶劑用量（15mL、25mL、50mL）和提取時間（30、45、60分鐘）分別進(jìn)行了考察，并優(yōu)化了色譜條件，確定了最佳的實驗方法。

[1]國家藥典委員會.中國藥典（一部）[S].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：176-177.

[2]余良忠，文萍，李晶，等.維血康顆粒中藥材的鑒定及橙皮苷的測定[J].華西藥學(xué)雜志，2010，25（2）：195-197.

[3]文萍，趙雯，余良忠，等.黔曲質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[J].中國實驗方劑學(xué)雜志，2011，17（24）：77-79.