董瑩瑩，王 欣，楊文新，鄒 俠，姜長陽

（遼寧師范大學(xué) 生命科學(xué)學(xué)院，遼寧 大連 116081）

1 引言

繡線菊屬于薔薇科繡線菊屬灌木植物，金焰繡線菊（Spiraea bumalda cv.Gold Flame）是白花繡線菊與日本繡線菊（S.albiflora×S.japonica）的雜交種[1]。適宜種在花壇、花境、草坪、池畔等地，不僅可叢植、孤植、列植，做綠籬，也可成片地栽種成在花壇、花境、草坪、池畔等。金焰繡線菊葉色多變，橙紅色新葉，黃色葉片，在溫暖地區(qū)冬季紅葉頗顯得非常美麗動人。并且花量多、花期長。使其成為觀賞效果最好的小灌木，近年來倍受大連地區(qū)人們的青睞。金焰繡線菊通常是采用扦插的方法進(jìn)行繁殖[2]，不僅需要大量枝條作為接穗，而且成活率較低，從而嚴(yán)重地影響了繁殖速度，難以滿足觀賞栽培對種苗的大量需求。為此，對金焰繡線菊進(jìn)行了試管苗繁殖的研究，以期達(dá)到獲得大量種苗，滿足栽培的需求的目的。目前已有繡線菊類植物組織培養(yǎng)研究的報道[3，4]，但迄今未見金焰繡線菊試管苗繁殖研究的報告。

2 材料與方法

2.1 材料來源及前處理

2008年11月初，將大連市區(qū)花壇上生長旺盛的獨(dú)株金焰繡線菊做好標(biāo)記。2009年5月上旬，待當(dāng)年由根部發(fā)出的萌蘗芽即將生長出地面時，用5mg·L－1的慶大霉素溶液將根部澆透。24h后，將其根部周圍的土壤挖開，并把即將長出地面，長10cm左右的萌蘗芽剪下，帶回實(shí)驗室作為本研究的實(shí)驗材料。

2.2 材料滅菌與培養(yǎng)條件

在實(shí)驗室中，將萌蘗芽切成長3cm左右的有芽莖段后，按照艾蒿的研究方法[5]進(jìn)行滅菌，并按照艾蒿的培養(yǎng)條件進(jìn)行培養(yǎng)。

2.3 試驗方法

2.3.1 不同培養(yǎng)基對萌蘗芽莖段試管苗培養(yǎng)的影響

將無菌萌蘗芽的有芽莖段兩端切口各切掉0.3cm左右，以達(dá)到將滅菌材料在滅菌中受到滅菌劑嚴(yán)重傷害的材料兩段切口部分從材料上除掉的目的。接著，將至少具有兩個芽的材料接種到以下9種培養(yǎng)基上，進(jìn)行不同培養(yǎng)基對萌蘗芽莖段試管苗培養(yǎng)的影響試驗。這9種培養(yǎng)基分別是：1／2MS＋蔗糖12g／L＋ABT2號（生根粉2號，以下均簡稱 ABT2號）1.5mg·L－1＋I(xiàn)AA0.2mg·L－1；1／2MS＋蔗糖12g／L＋ABT2號1.5mg·L－1＋I(xiàn)AA0.4mg·L－1；1／2MS＋蔗糖12g／L＋ABT2號1.5mg·L－1＋I(xiàn)AA0.6mg·L－1；1／2MS＋蔗糖12g／L＋ABT2號1.5mg·L－1＋I(xiàn)BA0.2mg·L－1；1／2MS＋蔗糖12g／L＋ABT2號1.5mg·L－1＋I(xiàn)BA0.4mg·L－1；1／2MS＋蔗糖12g／L＋ABT2號1.5mg·L－1＋I(xiàn)BA0.6mg·L－1；1／2MS＋蔗糖12g／L＋ABT2號1.5mg·L－1＋NAA0.2mg·L－1；1／2MS＋蔗糖12g／L＋ABT2號1.5mg·L－1＋NAA0.4mg·L－1；1／2MS＋蔗糖12g／L＋ABT2號1.5mg·L－1＋NAA0.6mg·L－1。這一實(shí)驗重復(fù)了2次，每種處理100個材料。

3 結(jié)果與分析

不同培養(yǎng)基對萌蘗芽莖段試管苗培養(yǎng)的影響。接種培養(yǎng)后觀察統(tǒng)計表明，在9種培養(yǎng)基上，所培養(yǎng)的材料都可以不同程度生長為試管苗。就加入了3種不同生長素的培養(yǎng)基而言，在加入了不同濃度的IAA和NAA的培養(yǎng)基上，萌蘗芽莖段生根生長為試管苗的效果一般，而在加入了不同濃度的IBA的培養(yǎng)基上，萌蘗芽莖段生根生長為試管苗的效果較好。其中在1／2MS＋蔗糖12g／L＋ABT2號1.5mg·L－1＋I(xiàn)BA0.2mg·L－1這種培養(yǎng)基上的生根效果最好。培養(yǎng)至35d時觀察統(tǒng)計證明：1／2MS＋蔗糖12g／L＋ABT2號1.5mg·L－1＋I(xiàn)BA0.2mg·L－1這一培養(yǎng)基上由萌蘗芽莖段培養(yǎng)的試管苗平均可長高到4.6cm，每株試管苗平均具有7.5條白色根，平均生根率達(dá)到了98.0%，并且外觀上試管苗生長旺盛。2次重復(fù)試驗的結(jié)果一致。以上結(jié)果說明：1／2MS＋蔗糖12g／L＋ABT2 號 1.5mg·L－1＋I(xiàn)BA0.2mg·L－1這種培養(yǎng)基是金焰繡線菊的萌蘗芽的有芽莖段試管苗培養(yǎng)的適宜培養(yǎng)基。

3.1.1 試管苗莖段生根繼代繁殖培養(yǎng)

在2009年2次萌蘗芽莖段試管苗培養(yǎng)的基礎(chǔ)上，2009年7月下旬，以1／2MS＋蔗糖12g／L＋ABT2號1.5mg·L－1＋I(xiàn)BA0.2mg·L－1這種培養(yǎng)基上第2次接種培養(yǎng)了100個萌蘗芽莖段培養(yǎng)的98株試管苗為材料。將其剪成長1.2－1.5cm、至少具有2個生長點(diǎn)（外觀上是具有2個葉片）的莖段后，再接種到1／2MS＋蔗糖12g／L＋ABT2號1.5mg·L－1＋I(xiàn)BA0.2mg·L－1這種培養(yǎng)基上，進(jìn)行試管苗莖段的生根繼代繁殖培養(yǎng)試驗。這一試驗連續(xù)生根繼代繁殖培養(yǎng)了4代。

連續(xù)生根繼代繁殖培養(yǎng)了4代的試驗結(jié)果證明：經(jīng)過33d為1個培養(yǎng)周期的培養(yǎng)，就會培養(yǎng)出平均1代生根率達(dá)到99%、株高4.8cm、生長著8.3條根，外觀上呈嫩綠色、生長旺盛的試管苗。連續(xù)的統(tǒng)計還證明：平均一代的繁殖系數(shù)為3.1。經(jīng)過連續(xù)4代的培養(yǎng)，共獲得9097株生長旺盛的試管苗。按照33d為1個培養(yǎng)周期，每個培養(yǎng)周期繁殖系數(shù)為3.0（實(shí)際上是3.1）計算，1株試管苗1年能繁殖出約20萬株試管苗。這種繁殖速度完全能滿足觀賞栽培對種苗的需求。上述結(jié)果說明：1／2MS＋蔗糖12g／L＋ABT2 號 1.5mg·L－1＋I(xiàn)BA0.2mg·L－1這種培養(yǎng)基也是金焰繡線菊萌蘗芽試管苗莖段生根繼代繁殖培養(yǎng)的適宜培養(yǎng)基。

3.1.2 試管苗移栽與定植

把生根繼代繁殖培養(yǎng)的2000株試管苗移栽到上半層為顆粒狀爐灰渣、下半層為肥沃園土的溫室營養(yǎng)缽中，移栽后10d內(nèi)保持濕度85%以上、無直射光的環(huán)境條件，之后按照溫室的正常環(huán)境進(jìn)行管理。

5月下旬，把在溫室中移栽成活的1940試管苗定植于大連金州的花壇上。移栽后除了澆透水外，其他條件按照花壇正常栽培的金焰繡線菊進(jìn)行管理。

在溫室中移栽35d后統(tǒng)計：成活了1946株，成活率為97.3%。定植后50d統(tǒng)計表明，共成活1930株，成活率為99.5%。對定植成活的試管苗觀察表明，定植的試管苗與野生移栽苗相比，前期生長緩慢、60d后生長加快。與同期栽培的扦插苗相比，試管苗明顯具有植株整齊，生長旺盛，更有利于觀賞的特點(diǎn)。試管苗翌年開花結(jié)果，不僅保持了金焰繡線菊的植物特征，也保持了觀賞效果好的特點(diǎn)。

4 結(jié)語

在以往的繡線菊和觀賞植物的試管苗培養(yǎng)研究中，其試管苗的培養(yǎng)過程和技術(shù)都遠(yuǎn)比本研究復(fù)雜[3，4，6，7]。本研究以萌蘗芽的有芽莖段為材料，僅用兩步就完成了試管苗的培養(yǎng)和繼代繁殖培養(yǎng)，不僅試管苗容易移栽和定植成活，而且定植于花壇上的試管苗觀賞效果好。這說明利用本研究所建立的簡化的技術(shù)也能培養(yǎng)出理想的觀賞植物試管苗。據(jù)此，研究者認(rèn)為在未來的觀賞植物或其他植物試管苗繁殖中，都應(yīng)盡力探索簡化的繁殖技術(shù)，這樣既能縮短培養(yǎng)繁殖時間，又能節(jié)省人力物力。

本研究是利用金焰繡線菊的萌蘗芽的有芽莖段直接進(jìn)行試管苗培養(yǎng)，并且取得較理想的培養(yǎng)效果。在前人的試管苗研究中，未見以萌蘗芽為材料進(jìn)行試管苗研究的報道。因此，這一研究證明：某些植物的萌蘗芽也可作為試管苗培養(yǎng)的理想材料。

[1]李作文，王玉晶.東北地區(qū)觀賞樹木圖譜[M].沈陽：遼寧人民出版社，1999.

[2]張穎文，張穎杰，賈文忱.金焰繡線菊的繁殖栽培技術(shù)[J].中國林福特產(chǎn)，2008（5）：59～60.

[3]張立磊，李保印，郭巧玲，等.菜葉植物今夜繡線菊組織培養(yǎng)研究[J].經(jīng)濟(jì)林研究，2005，23（1）：47～49.

[4]胡益明，甘煩遠(yuǎn)，彭麗萍，等.藥用植物粉花繡線菊的組織培養(yǎng)與快速繁殖[J].中草藥，2001，22（11）：1031～1033.

[5]王 艷，張 卓，王曉旭，等.艾蒿生長點(diǎn)及試管苗培養(yǎng)的研究[J].遼寧大學(xué)學(xué)報，2011，38（4）：353～356.

[6]李毅丹.幾種觀賞植物試管苗工廠化生產(chǎn)技術(shù)研究[D].長春：東北師范大學(xué)，2004.

[7]安利佳，姜長陽.植物組織培養(yǎng)技術(shù)導(dǎo)論[M].大連：遼寧師范大學(xué)出版社，1996：101～154.