劉永勝，陳 華，金偉華，米婷婷（成都軍區(qū)總醫(yī)院藥劑科，成都 610083）

氫化可的松為腎上腺皮質(zhì)激素類藥，具有抗炎、免疫抑制、抗毒素和抗休克作用[1]。氫化可的松制成灌腸液后，使藥物在結(jié)腸的局部濃度增加，從而增加療效，減少不良反應(yīng)的發(fā)生，在治療各種結(jié)腸炎癥上具有明顯的優(yōu)勢(shì)。為此，我院制備了氫化可的松灌腸劑[制劑批準(zhǔn)文號(hào)：成制字（2011）F02016]，可直接用于結(jié)腸等病變部位。現(xiàn)將其制備與質(zhì)量控制方法介紹如下。

1 材料

1200型高效液相色譜儀，配備四元泵、可變波長(zhǎng)檢測(cè)器、1200化學(xué)工作站（美國(guó)Agilent公司）；DU730型紫外-可見分光光度計(jì)（美國(guó)貝克曼公司）；AL204電子天平（梅特勒-托利多儀器公司）；AP-01P真空泵（天津奧特賽恩斯儀器公司）；SZ-97自動(dòng)三重純水蒸餾器（上海亞榮生化儀器廠）；HHS11-Ni2電熱恒溫水浴鍋（北京長(zhǎng)安永創(chuàng)科學(xué)儀器有限公司）。

氫化可的松標(biāo)準(zhǔn)品（中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)：100152-200206，純度：100.0%）；氫化可的松原料藥（江蘇揚(yáng)州制藥有限公司，批號(hào)：20060601，純度：99.16%）；羧甲基纖維素鈉（湖南爾康制藥有限公司，批號(hào)：20080601）；氫化可的松灌腸液樣品（自制，批號(hào)：20100724、20100801、20100805，規(guī)格：100 mg∶60 ml）；甘油、無(wú)水乙醇均為藥用規(guī)格；甲醇為色譜純，其他試劑均為分析純，水為三重蒸餾水。

2 處方與制備

2.1 處方

氫化可的松原料藥3 g，羧甲基纖維素鈉30 g，50%稀乙醇300 ml，蒸餾水加至1 800 ml。

2.2 制備

將羧甲基纖維素鈉撒于適量蒸餾水中溶脹。另將氫化可的松原料藥加入300 ml 50%稀乙醇中，攪拌使其溶解。將上述羧甲基纖維素鈉膠漿緩緩加入氫化可的松溶液中，邊加邊攪拌，加蒸餾水至全量。分裝，壓鋁蓋，100℃流通蒸氣滅菌30 min，即得。

3 質(zhì)量控制

3.1 性狀

本品為無(wú)色的黏稠液體。

3.2 鑒別[2]

氫化可的松：（1）取樣品1 ml，加臨用新制的硫酸苯肼試液8 ml，在70 ℃加熱15 min，即顯黃色。（2）取樣品2 ml，置于水浴上蒸干，殘?jiān)恿蛩? ml使溶解，顯棕黃色至紅色，并顯綠色熒光；將此溶液傾入10 ml水中，即變成黃色至橙黃色，并微帶綠色熒光，同時(shí)生成少量絮狀沉淀。

3.3 微生物限度檢查

樣品符合2010年版《中國(guó)藥典》（二部）附錄ⅪJ中微生物限度檢查法的相關(guān)規(guī)定[2]。

3.4 含量測(cè)定

3.4.1 色譜條件。色譜柱：Eclipse XDB-C18（150 mm×4.6 mm，5 μm）；流動(dòng)相：乙腈-水（28∶72），流速：1.0 ml/min；柱溫：30℃；檢測(cè)波長(zhǎng)：245 nm；進(jìn)樣量：10 μl。理論板數(shù)按氫化可的松計(jì)不得低于5 000。

3.4.2 溶液的制備。供試品溶液：精密量取樣品6 ml，置于100 ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，過濾，作為供試品溶液。對(duì)照品溶液：取氫化可的松標(biāo)準(zhǔn)品約10 mg，精密稱定，加甲醇溶解并稀釋成氫化可的松對(duì)照品貯備液（1 mg/ml），再精密量取適量制成氫化可的松質(zhì)量濃度為0.1 mg/ml的溶液，搖勻，即得。陰性對(duì)照品溶液：按照氫化可的松灌腸液處方配制不含主成分的乙醇水溶液，同供試品溶液配制方法配制陰性對(duì)照品溶液。

3.4.3 方法專屬性試驗(yàn)。精密吸取對(duì)照品溶液、供試品溶液及陰性對(duì)照品溶液各10 μl，注入高效液相色譜儀測(cè)定，記錄色譜圖，見圖1。

圖1 高效液相色譜圖A.對(duì)照品；B.陰性對(duì)照品；C.供試品；1.氫化可的松；2.甲醇Fig1 HPLC chromatogramsA.reference substance；B.negative control；C.sample；1.hydrocortisone；2.methanol

由圖1可見，陰性對(duì)照品溶液在與氫化可的松對(duì)照品溶液相對(duì)應(yīng)的保留時(shí)間位置上未見吸收峰，說明輔料等對(duì)主成分的分析無(wú)干擾。

3.4.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備。分別精密量取氫化可的松對(duì)照品貯備液（1 mg/ml）適量，加甲醇稀釋制成質(zhì)量濃度為0.01、0.02、0.05、0.10、0.20 mg/ml的溶液。分別精密吸取10 μl，注入色譜儀，按“3.4.1”項(xiàng)下色譜條件，記錄色譜圖，分別測(cè)定氫化可的松峰面積。以氫化可的松質(zhì)量濃度（c）為橫坐標(biāo)，峰面積（Y）為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程：Y＝45 991c+670.21（r＝0.999 4）。結(jié)果表明，氫化可的松檢測(cè)質(zhì)量濃度線性范圍為0.01～0.2 mg/ml。

3.4.5 精密度試驗(yàn)。精密吸取質(zhì)量濃度為0.1 mg/ml的對(duì)照品溶液10 μl，連續(xù)進(jìn)樣6次，測(cè)定氫化可的松峰面積。結(jié)果，氫化可的松對(duì)照品峰面積RSD＝0.62%（n＝6），說明本法具有良好的精密度。

3.4.6 穩(wěn)定性試驗(yàn)。取同一批號(hào)樣品（批號(hào)：20100724）適量，按“3.4.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，在室溫放置，于2、4、6、8、10 h分別進(jìn)樣測(cè)定其峰面積。結(jié)果，氫化可的松峰面積RSD＝0.57%（n＝6），表明供試品溶液在10 h內(nèi)測(cè)定，穩(wěn)定性良好。

3.4.7 重復(fù)性試驗(yàn)。取同一批號(hào)樣品（批號(hào)：20100724）適量，精密稱取6份，按“3.4.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，重復(fù)平行測(cè)定，計(jì)算含量。結(jié)果，樣品中氫化可的松的平均占標(biāo)示量百分含量為99.87%，RSD＝0.32%（n＝6），表明此法重復(fù)性良好。

3.4.8 回收率試驗(yàn)。精密量取已知含量的樣品（批號(hào)：20100724）溶液6 ml，置于100 ml量瓶中，分別加入定量的對(duì)照品貯備液（1 mg/ml）4、5、6 ml，依法測(cè)定，計(jì)算回收率，結(jié)果見表1。

表1 回收率試驗(yàn)結(jié)果（n＝9）Tab 1Results of recovery test（n＝9）

3.4.9 樣品的含量測(cè)定。取3個(gè)批號(hào)的灌腸液樣品（批號(hào)：20100724、20100801、20100805），按“3.4.2”項(xiàng)下方法配制供試品溶液，照“3.4.1”項(xiàng)下的色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，記錄色譜圖，計(jì)算含量。結(jié)果，3批樣品中氫化可的松的平均占標(biāo)示量百分含量分別為 99.87%（RSD＝0.32%，n＝6）、102.72%（RSD＝0.58%，n＝6）、98.13%（RSD＝0.63%，n＝6）。

3.5 留樣觀察

采用留樣觀察法，取3批樣品經(jīng)檢測(cè)外觀、含量后，置于室溫下放置12個(gè)月（2010年7月－2011年7月），再同法進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果，檢測(cè)指標(biāo)均無(wú)明顯變化，說明本制劑穩(wěn)定性良好。

4 討論

氫化可的松通過直腸給藥，避免了肝臟首關(guān)效應(yīng)和胃腸道生理吸收功能，消除了對(duì)胃腸道的不良反應(yīng)，提高了生物利用度。本品具有抗菌消炎的作用，在臨床上可用于治療結(jié)腸炎，特別是潰瘍性腸炎。氫化可的松不溶于水，略溶于乙醇[2]，所以采用先將氫化可的松溶于乙醇再稀釋的方法進(jìn)行配制。氫化可的松及其制劑的含量測(cè)定方法目前文獻(xiàn)報(bào)道的有紫外-分光光度法、高效液相色譜法等[3-5]。筆者參照2010年版《中國(guó)藥典》（二部）“氫化可的松”項(xiàng)下[2]的含量測(cè)定方法，采用高效液相色譜法測(cè)定氫化可的松灌腸液中氫化可的松的含量，結(jié)果表明方法專屬性強(qiáng)、分離度好，處理方法簡(jiǎn)單、易于操作。

綜上所述，本制劑制備工藝簡(jiǎn)便可行，質(zhì)量穩(wěn)定可控。

[1]李端.藥理學(xué)[M].6版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2008：322.

[2]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典：二部[S].2010年版.北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：550、附錄107.

[3]徐興亞，姜輝.氫化可的松洗劑的制備及質(zhì)量控制[J].中國(guó)藥房，2009，20（4）：282.

[4]哈娜，哈力，楊習(xí)江.HPLC法測(cè)定口腔潰瘍膜中氫化可的松的含量[J].中國(guó)藥房，2011，22（20）：1 908.

[5]周建玉，左志輝，左文堅(jiān).RP-HPLC法測(cè)定醋酸氫化可的松滴眼液及注射液的含量[J].天津藥學(xué)，2005，17（2）：31.