羅 霞，魏 巍，余夢瑤，江 南，伍 明,2，許曉燕,*

(1.四川省中醫(yī)藥科學(xué)院，四川 成都 610041；2.四川大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，四川 成都 610064)

甘薯(Ipomoea batata Lam.)是旋花科1年生或多年生草本植物，又稱紅薯、白薯、番薯、紅苕等。目前，我國的甘薯總種植面積保持在620萬公頃左右，總產(chǎn)量穩(wěn)定在1億t以上，占全世界的80%，是世界上最大的生產(chǎn)國。然而，當(dāng)收獲甘薯的塊莖后，還留下大量地面的藤蔓(包括葉、柄和莖)部分，其中小部分作為家畜飼料，其余大部分被棄置于田間自然降解，既污染環(huán)境，又造成極大的資源浪費(fèi)。

現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)，甘薯藤蔓除含有豐富的纖維素、蛋白質(zhì)、礦物質(zhì)和維生素等營養(yǎng)物質(zhì)外，還有含有大量的多糖、黃酮類化合物、多酚、類胡蘿卜素、綠原酸、咖啡酸等生物活性的物質(zhì)，具有抗腫瘤[1]、抑菌[2]、降血脂[3]、抗氧化[4]、提高免疫[5]等功能，此外具有降低多種糖尿病動物模型血糖的功能[6-8]，可作為保健品甚至藥品開發(fā)的原料。而現(xiàn)有文獻(xiàn)大多是對甘薯藤蔓化學(xué)成分的分析研究，少有對多個(gè)品種甘薯藤蔓的化學(xué)成分進(jìn)行比較，對此，本實(shí)驗(yàn)通過對四川不同甘薯主栽品種的藤蔓進(jìn)行活性物質(zhì)的含量測定，比較不同品種間活性成分的差異，為其精深加工研究提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

渝甘、綿粉等7個(gè)不同品種甘薯的藤蔓，由四川光友薯業(yè)有限公司提供，均產(chǎn)自四川省綿陽市的甘薯種植基地，為收獲甘薯后的地面部分(包括葉、柄和莖)，清凈晾干，粉碎后在干燥箱中60℃烘至恒質(zhì)量，編號樣品A、B、C、D、E、F、G，干燥器中保存。

β-胡蘿卜素、綠原酸、咖啡酸、矢車菊素-3-O-葡萄糖苷標(biāo)準(zhǔn)品 中國食品藥品檢定研究院；蘆丁、沒食子酸、牛血清白蛋白標(biāo)準(zhǔn)品 美國Sigma公司；HPLC測試中所用乙腈、甲醇為色譜純，其余試劑均為國產(chǎn)分析純。

1.2 儀器與設(shè)備

KXH-101-2A電熱鼓風(fēng)干燥箱 上?？莆鲈囼?yàn)儀器廠；SY-1000E多用途超聲恒溫提取機(jī) 北京弘祥隆生物技術(shù)有限公司；00-048型中藥粉碎機(jī) 上海淀久中藥機(jī)械制造有限公司；Sorvall Evolution RC高速冷凍離心機(jī) 美國Thermo公司；UV-2802紫外-可見分光光度計(jì) 美國優(yōu)尼科公司；1525-2487高效液相色譜 美國Waters公司。

1.3 方法

1.3.1 水溶性蛋白含量的測定

取樣品0.1g，放研缽內(nèi)加pH7.5磷酸緩沖液2mL研磨至糊狀，然后加5mL緩沖液浸提30min，5000r/min離心，將上清液定容至25mL。取定容提取液1mL，放入試管，以牛血清白蛋白作為標(biāo)準(zhǔn)對照，采用Bradford法[9]在595nm處測定吸光度。

1.3.2 多糖的測定

樣品粉碎后過100目篩，精密稱取本品粉末2g，置索氏提取器中，加入90mL蒸餾水，100℃加熱回流提取至提取液無色，定容至100mL，精密量取10mL，加入95%乙醇150mL，搖勻，4℃沉淀過夜。取出，離心，傾去上清液，沉淀加水溶解定容至50mL，以葡萄糖作為標(biāo)準(zhǔn)對照，采用“硫酸-蒽酮法”[10]在620nm波長處測定吸光度。

1.3.3 多酚的測定

精密稱取樣品2g，加入50mL 60%乙醇80℃回流提取1h，過濾，于60℃減壓旋至無乙醇味，蒸餾水定容至250 mL，以沒食子酸作為標(biāo)準(zhǔn)對照，采用“福林酚法”[11]，在760nm波長處測定吸光度。

1.3.4 黃酮的測定

精密稱取樣品2g，加入50mL 70%乙醇回流提取2h，粗提液冷卻后，減壓抽濾，并用少量25%乙醇溶液洗滌濾渣，合并濾液。在50℃條件下減壓蒸餾，除去其中的乙醇。倒出瓶內(nèi)溶液，用30mL熱水分3次洗滌燒瓶，抽濾后，濾液以75mL氯仿萃取3次，收集水層溶液定容至60mL。稱取1～2g經(jīng)預(yù)處理的聚酰胺樹脂粉末，濕法裝柱，用水飽和，吸取上述脫脂后的水溶液2mL，沿層析柱慢慢滴入柱內(nèi)，放置一定時(shí)間待充分吸附后，用50mL 70%乙醇洗脫，定容至100mL，以蘆丁作為標(biāo)準(zhǔn)對照，采用“亞硝酸鈉-硝酸鋁-氫氧化鈉比色法”[12]，在510nm波長處測定吸光度。

1.3.5 花青素的測定

樣品粉碎至20目。取樣品1g加入甲醇試劑，置振蕩機(jī)上振蕩20min，過濾。共萃取3次，固液比分別為1： 9、1：8、1：7，將3次萃取液合并定容于25mL容量瓶中。以矢車菊素-3-O-葡萄糖苷為標(biāo)準(zhǔn)品，采用“草醛-鹽酸法”[13]，在500nm 波長處測定吸光度。

1.3.6 β-胡蘿卜素的測定

樣品粉碎后過100目篩，稱取1g于100mL具塞三角瓶中，加入40mL丙酮-石油醚溶液(3：7，V/V)，塞緊瓶塞，暗處放置15h以上，抽濾，定容至50mL，以β-胡蘿卜素為標(biāo)準(zhǔn)對照，在波長450nm處測定吸光度[14]。

1.3.7 綠原酸的測定

樣品粉碎后過40目篩，稱取0.5g加70%乙醇100mL，密塞，浸漬0.5h，超聲提取40min(功率250W，頻率35kHz)，取出，冷卻，用70%乙醇定容至刻度，搖勻，靜止，上清液用0.45μm濾膜濾過。以綠原酸標(biāo)準(zhǔn)品為對照。色譜柱：Waters Symmetry C18柱(4.6m×250mm，5μm)；流動相：乙腈-0.4%磷酸溶液(15：85，V/V)；進(jìn)樣量：10μL；流速：1.0mL/min；柱溫：30℃；檢測波長：327nm[15]。

1.3.8 咖啡酸的測定

樣品粉碎后過40目篩，稱取1g烘干樣品置250mL圓底燒瓶中, 精密加入50%甲醇50mL浸泡1h后回流提取2h。放冷濾過，用50%甲醇沖洗2～3次，蒸干。殘?jiān)勇确逻m量浸漬3min，棄去氯仿液，殘?jiān)鼡]去氯仿，用50%甲醇溶解并定容至10mL，用0.45μm濾膜濾過。以咖啡酸標(biāo)準(zhǔn)品為對照，色譜條件除以下兩項(xiàng)外同1.3.7節(jié)：柱溫：25℃；波長：323nm[16]。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

每個(gè)樣品重復(fù)測定5次，結(jié)果取平均值進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。

2 結(jié)果與分析

2.1 水溶性蛋白

由表1可以看出，水溶性蛋白在不同品種之間存在差異，以樣品B可溶性蛋白含量最高，達(dá)到16.89mg/g，其次為樣品C和E，水溶性蛋白含量分別為13.739mg/g和13.419mg/g，樣品D的水溶性蛋白含量最低為9.54mg/g。

表1 不同藤蔓中水溶性蛋白、多糖、多酚、黃酮、花青素、β-胡蘿卜素、綠原酸、咖啡酸的含量Table 1 Chemical composition of sweet potato vines from seven cultivars

2.2 多糖

由表1可以看出，甘薯藤蔓多糖含量在品種間的差異較大，以樣品F含量最高，含量達(dá)到8.79mg/g，其次為樣品D、E和C分別為5.95、4.48、4.29mg/g，樣品A、G多糖含量較低為2.95、2.63mg/g。

2.3 多酚

由表1 可以看出，樣品B 多酚含量最高，達(dá)到43.21mg/g，樣品F的多酚含量最低僅為18.89mg/g。

2.4 黃酮

由表1可以看出，黃酮在樣品D中含量最高，含量達(dá)到41.52mg/g，其次為C、E和G含量分別為30.96、30.61mg/g和28.71mg/g，其余樣品多酚含量較低均不到20mg/g。

2.5 花青素

由表1可以看出，花青素在樣品B、G、A、C和E中含量豐富，含量最高的樣品為B，花青素含量達(dá)到4.00mg/g，其余含量均在3.40～4.00mg/g之間；樣品D和F花青素含量較低分別為2.11mg/g和1.83mg/g。

2.6 β-胡蘿卜素

由表1可以看出，β-胡蘿卜素在幾個(gè)樣品中的含量存在差異，其中樣品C中的β-胡蘿卜素含量最高為2.88mg/g，其次為樣品G，含量為2.03mg/g，最低樣品F，含量為1.26mg/g。

2.7 綠原酸

由表1可以看出，綠原酸含量在樣品之間的差異較明顯，樣品B、E和G中綠原酸含量最高，分別為1150.61、1080.46、924.51μg/g，其次樣品A、C和D含量在500～600μg/g之間，而樣品F的綠原酸含量僅有69.38μg/g。

2.8 咖啡酸

由表1可以看出，咖啡酸含量在樣品之間的差異較明顯，樣品B中咖啡酸含量達(dá)到426.85μg/g，其次樣品D、E含量為214.32、107.89μg/g，其余樣品均不到100μg/g。

3 結(jié) 論

甘薯藤蔓中含有豐富的生物活性成分，是巨大的藥用資源寶庫，其生物活性成分與其功效的研究近年來也逐步受到重視，具有重要的科研價(jià)值。雖然目前對甘薯藤蔓中活性成分的研究不少，但基于不同品種的研究卻沒有。本實(shí)驗(yàn)通過對四川省內(nèi)7個(gè)主栽品種的研究，發(fā)現(xiàn)生物活性成分在不同的品種間存在明顯的差異，除水溶性蛋白以外，咖啡酸，多糖、多酚、黃酮等生物活性成分，其含量在不同甘薯品種的藤蔓間差異顯著。其中差異最大的是綠原酸，品種間含量差異可達(dá)16倍，其次為咖啡酸，多糖、多酚、黃酮、花青素、β-胡蘿卜素含量最高值與最低值之間也有2～4倍的差異。因此，本研究認(rèn)為，在進(jìn)行甘薯藤蔓的開發(fā)利用中，首先應(yīng)對品種進(jìn)行確定，再有針對性的進(jìn)行精深加工，根據(jù)不同品種的特性，開發(fā)不同的精深加工產(chǎn)品類型，滿足不同的市場的需求。

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