陜西能源職業(yè)技術(shù)學(xué)院醫(yī)學(xué)校區(qū)（西安710613） 李東芳 黃 葶

近幾年隨著抗菌藥物種類的不斷增加及廣譜抗生素的廣泛使用，促使了葡萄球菌屬細(xì)菌在機(jī)體內(nèi)和醫(yī)院環(huán)境的定植和繁衍，并產(chǎn)生了對(duì)臨床常用多種抗生素的多重耐藥性［1］，已成為醫(yī)院內(nèi)感染的重要病原菌。文獻(xiàn)報(bào)道醫(yī)院內(nèi)分離的金黃色葡萄球菌中耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）高達(dá)79．6%［2－4］，凝固酶陰性葡萄球菌的檢出率也達(dá)到了62．5%［1］。有效、安全的防治葡萄球菌屬細(xì)菌引起的感染成為臨床上值得注意的問題。本實(shí)驗(yàn)對(duì)西安地區(qū)部分人群葡萄球菌屬的帶菌及耐藥狀況，進(jìn)行了初步探討，現(xiàn)報(bào)告如下。

材料與方法

1 材 料 ①標(biāo)本來源：正常人群（71例，男35例，女36例，年齡22．65±1．11歲）、病人（79例，男40例，女39例，年齡25．32±1．01歲）、醫(yī)護(hù)人員（66例，男33例，女33例，年齡30．02±1．25歲）。標(biāo)本均來自鼻咽分泌物，用無菌咽拭子采取。②培養(yǎng)基：高鹽增菌肉湯、甘露醇氯化鈉瓊脂培養(yǎng)基、M－H瓊脂培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基、斜面培養(yǎng)基，均為自配。③藥敏紙片：青霉素（10units）、紅霉素（15μg）、慶大霉素（10μg）、頭孢西?。?0μg）、克林霉素（2μg）、頭孢曲松（30μg）、頭孢呋新鈉（30μg）、左氧氟沙星（5μg），均為英國 OXOID公司產(chǎn)品。④質(zhì)控菌：金黃色葡萄球菌ATCC?25923。

2 方 法 ①取樣增菌：分別取正常人群、醫(yī)護(hù)人員、病人的咽拭子，直接放入高鹽增菌肉湯，37℃增菌48h。②分離培養(yǎng)鑒定：增菌后的標(biāo)本，接種于甘露醇氯化鈉瓊脂培養(yǎng)基，37℃培養(yǎng)48h，挑取典型的單個(gè)菌落，先用革蘭染色鑒定是否是葡萄球菌，再用血漿凝固酶試驗(yàn)區(qū)分金黃色葡萄球菌和凝固酶陰性葡萄球菌，陽性標(biāo)本保存于半固體及斜面培養(yǎng)基備用。③藥敏試驗(yàn)：陽性標(biāo)本，根據(jù)CLSI2006版推薦的K－B法，用0．5麥?zhǔn)蠁挝痪鋺乙壕鶆蛲磕ㄓ贛－H瓊脂培養(yǎng)基，貼藥敏紙片，置于35℃孵箱中培養(yǎng)16h，后用游標(biāo)卡尺量出抑菌環(huán)直徑。④根據(jù)CLSI2010版藥敏試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)分析判斷結(jié)果。

結(jié) 果

分離結(jié)果：采集標(biāo)本共計(jì)216份，分離出葡萄球菌90株，其中金黃色葡萄球菌52株。分離結(jié)果見表1。耐藥率：90株葡萄球菌中金黃色葡萄球菌52株，凝固酶陰性葡萄球菌38株，對(duì)8種抗生素的耐藥率見表2。耐藥情況：對(duì)分離出的90株葡萄球菌用8種抗生素做藥敏試驗(yàn)，結(jié)果見表3。由表1～3可以看出本試驗(yàn)中正常人群、醫(yī)護(hù)人員、病人標(biāo)本中葡萄球菌分離率分別為61．97%、37．88%、26．58%，且病人分離的標(biāo)本中，凝固酶陰性菌明顯高于金黃色葡萄菌（12∶9）；分離的90株葡萄球菌耐藥狀況：病人的標(biāo)本幾乎對(duì)8種抗生素都有耐藥性，且凝固酶陰性菌的耐藥性明顯高于金黃色葡萄球菌；而正常人群和醫(yī)護(hù)人員的標(biāo)本只對(duì)青霉素、紅霉素和克林霉素等有明顯的耐藥性，凝固酶陰性菌與金黃色葡萄球菌的耐藥性無明顯差異。

表1 各人群葡萄球菌及金黃色葡萄球菌分離率

表2 不同人群凝固酶陰性葡萄球菌及金黃色葡萄球菌耐藥情況

表3 不同人群葡萄球菌耐藥情況

討 論

本項(xiàng)目的病人標(biāo)本取自某醫(yī)院的腫瘤內(nèi)科和呼吸內(nèi)科長期住院病人，由于長期使用頭孢類、左氧氟沙星等廣譜抗生素，抑制了葡萄球菌的生長，從而導(dǎo)致分離率較低。葡萄球菌由于分布廣泛，抵抗力強(qiáng)，是人口腔粘膜的正常菌群。文獻(xiàn)報(bào)道稱健康人群帶菌率為20%～50%，本實(shí)驗(yàn)結(jié)果分離率為67．09%，說明正常人群帶菌率明顯上升。據(jù)報(bào)道醫(yī)護(hù)人員葡萄球菌帶菌率高達(dá)70%［5］，我們的研究中醫(yī)護(hù)人員帶菌率偏低，與其他文獻(xiàn)報(bào)道有一定出入，可能與我們只采集了鼻咽腔一個(gè)部位的標(biāo)本有關(guān)。由于葡萄球菌致病性強(qiáng)，近年來在醫(yī)院內(nèi)感染率呈逐年上升趨勢［6］；同時(shí)隨著抗生素的開發(fā)和廣泛應(yīng)用，其耐藥性也在不斷變化，并出現(xiàn)了多重耐藥，尤其是耐甲氧西林的金黃色葡萄球菌更是成為醫(yī)院感染重要致病菌。本項(xiàng)研究表明，金黃色葡萄球菌對(duì)多數(shù)β－內(nèi)酰胺類、大環(huán)內(nèi)酯類耐藥性較強(qiáng)，與國內(nèi)報(bào)道基本一致［7］，臨床應(yīng)盡量避免使用。對(duì)氨基糖苷類、頭孢類Ⅱ、Ⅲ代、奎諾酮類、苯唑西林、克林霉素較為敏感，均小于30%，可以考慮作為經(jīng)驗(yàn)用藥的首選藥。病人與正常人群以及醫(yī)護(hù)人員相比，其對(duì)各類抗生素耐藥率均較高，尤其是凝固酶陰性葡萄球菌對(duì)氨基糖苷類、頭孢類Ⅱ、Ⅲ代、奎諾酮類、苯唑西林、克林霉素升高更為顯著，耐藥率達(dá)到20%～50%，說明凝固酶陰性葡萄球菌，已成為醫(yī)院感染的重要病原菌，應(yīng)予以高度重視。

本項(xiàng)目所涉及的醫(yī)院主要是應(yīng)用大環(huán)內(nèi)酯類＋頭孢類、左氧氟沙星＋頭孢類的聯(lián)合用藥，這可能是導(dǎo)致病人所攜帶的凝固酶陰性葡萄球菌耐藥性增強(qiáng)的主要原因。因此對(duì)長期住院病人應(yīng)該特別注意合理的聯(lián)合用藥和替換用藥，避免不適當(dāng)治療［8］，是減緩耐藥菌株產(chǎn)生重要環(huán)節(jié)。

［1］ 廖晚珍，彭衛(wèi)華，呂小林，等．耐藥葡萄球菌的檢測及臨床意義［J］．江西醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)，2006，18（2）：111．

［2］ 向友華，戴立人．耐甲氧西林金黃色葡萄球菌醫(yī)院內(nèi)感染的檢測及報(bào)告［J］．臨床檢驗(yàn)雜志，1991，9（3）：159．

［3］ 王 睿，Nishioka K，Tanneo Y．抗甲氧西林金葡菌耐藥性的研究［J］．中國抗生素雜志，1992，17（6）：438－442．

［4］ 婁婷葉，陳三敏，趙玉洲．醫(yī)院內(nèi)葡萄球菌感染的耐藥性分析［J］．醫(yī)藥論壇雜志，2005，26（11）：67．

［5］ 賈文祥．醫(yī)學(xué)微生物學(xué)［M］．北京：人民衛(wèi)生出版社，2005：185－187．

［6］ 韋莉萍，靳士英，李春梅，等．金黃色葡萄球菌醫(yī)院感染危險(xiǎn)因素的研究［J］．中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2002，12（3）：175．

［7］ 林 杉，黃慧珍，宋滄桑，等．醫(yī)院細(xì)菌耐藥性的研究［J］．中國醫(yī)院藥學(xué)雜志，1999，19（9）：542－543．

［8］ 鄒 晶，李 楠．細(xì)菌耐藥機(jī)制與控制對(duì)策［J］．基層醫(yī)學(xué)論壇，2006，10（11）：1052．