西安市中心醫(yī)院心胸外科（西安710003） 劉晨旭 周 斌

食管癌是消化道最常見腫瘤，在我國發(fā)病率較高，嚴重威脅著人民的健康［1］。近年來，許多與腫瘤浸潤、轉(zhuǎn)移有密切關(guān)系的基因已相繼被克隆出，其中腫瘤轉(zhuǎn)移基因（MTA1）是進幾年來發(fā)現(xiàn)的和信號傳導及基因調(diào)節(jié)有關(guān)的腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)基因。大量研究表明［2－3］，MTA1和許多種惡性腫瘤的浸潤和轉(zhuǎn)移有著密切的關(guān)系。FLIP（FLICE－inhibitory protein）是近年來發(fā)現(xiàn)的一類含有死亡效應結(jié)構(gòu)域的凋亡、抑制蛋白，它廣泛存在于病毒、真核生物和哺乳動物等許多物種中。目前可證實FLIP與炎癥、腫瘤及自身免疫性疾病的發(fā)生、發(fā)展有密切的關(guān)系。本實驗對人類食管癌組織中MTA1、FLIP的表達情況及兩者間的關(guān)系進行分析，以探討MTA1和FLIP蛋白的表達與食管鱗癌的侵潤、轉(zhuǎn)移和分化程度之間的關(guān)系，以及它們兩者之間的相關(guān)性。

材料與方法

1 材 料 選取81例食管癌患者的癌組織作為研究對象，31例距癌組織邊緣＞5cm的正常食管組織作為對照組。標本均為西安交通大學第二醫(yī)院胸外科手術(shù)切除的組織，入選的患者術(shù)前均未行放療、化療和其他激素免疫治療，術(shù)后病理診斷均為鱗癌。其中男65例，女16例，年齡42～72歲。病理類型、分期及淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移情況，經(jīng)病理科醫(yī)師確定。

2 方 法 使用SP法進行抗MTA1和抗FLIP免疫組織化學染色。陰性對照則使用PBS代替一抗。結(jié)果判定：陽性表達的細胞核內(nèi)見棕黃色的顆粒。光學顯微鏡下每張切片在診斷確切的食管癌組織中隨機選取5個高倍視野，每高倍視野計數(shù)100個細胞。切片內(nèi)的陽性細胞數(shù)＞10%做為MTA1或FLIP陽性表達。

3 統(tǒng)計學方法 所有數(shù)據(jù)經(jīng)SPSS 11．0軟件進行處理，使用χ2檢驗，變量之間的關(guān)系分析則采用spearman等級相關(guān)分析，P＜0．05差異有統(tǒng)計學意義。

結(jié) 果

MTA1蛋白、FLIP蛋白在食管癌組織中陽性率均高于正常組織中陽性表達率（P＜0．05）。MTA1、FLIP蛋白在食管癌組織陽性表達與患者年齡、性別、腫瘤的長度均無關(guān)。MTA1表達與腫瘤的組織分化程度、T分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有明顯相關(guān)性。FLIP的表達與腫瘤的組織分化程度無關(guān)，與腫瘤的T分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有明顯相關(guān)性。MTA1和FLIP陽性表達存在明顯正相關(guān)。見表1～5。

表1 兩組MTA1、PLIP表達比較

表2 MTA1、FLIP在食管癌患者中表達與腫瘤長度關(guān)系比較

表3 MTA1、FLIP在食管癌患者中表達與年齡、性別的關(guān)系比較

表4 MTA1、FLIP在食管癌患者中的表達與臨床病理因素的關(guān)系

表5 MTA1、FLIP在食管癌中的表達相關(guān)性

討 論

1 MTA1在食管癌組織中的表達及意義 本組資料食管鱗癌組織中MTA1的陽性表達率為72．84%，正常的組織為6．45%。這兩者比較有顯著差異性（P＜0．05），提示MTA1在食管癌的發(fā)生中起到重要的作用，可以作為診斷食管癌的一種重要的生物學指標。本研究發(fā)現(xiàn)，MTA1蛋白的陽性表達和患者的年齡、性別及腫瘤長度均無關(guān)系（P＞0．05）；MTA1蛋白在中、高分化組中的陽性表達率為60．00%，低分化組為88．89%，二者比較有顯著差異性（P＜0．05），這說明MTA1蛋白的陽性表達和腫瘤的組織學的分級有關(guān)系，并隨著其分級的降低陽性表達水平明顯的升高；MTA1蛋白的陽性表達和腫瘤的T分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有顯著的相關(guān)性（P＜0．05），說明MTA1蛋白在腫瘤的浸潤、轉(zhuǎn)移中起著顯著的作用。推測其機制可能是因為在MTA1陽性表達的癌細胞中，MTA1蛋白可以和組蛋白去乙酰化酶結(jié)合，募集組蛋白去乙酰化酶到目的基因啟動子的區(qū)域，通過除去組蛋白的乙?；厮苋旧|(zhì)結(jié)構(gòu)，使目的基因變得更加得緊密而不利于繼續(xù)轉(zhuǎn)錄［4］。進而MTA1可通過這種功能直接或間接的作用于某些可以抑制腫瘤浸潤、轉(zhuǎn)移基因，下調(diào)其轉(zhuǎn)錄過程，使腫瘤抑制基因的數(shù)量下降，從而促使腫瘤的發(fā)生、發(fā)展。綜上所述，MTA1基因在食管鱗癌的、增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移及臨床進展中可能起著重要的調(diào)節(jié)作用。

2 FLIP在食管癌組織中的表達及意義 本研究結(jié)果表明，F(xiàn)LIP在食管癌組織中的陽性表達率為76．54%，在正常肺組織為19．35%，兩者比較差異有顯著性（P＜0．05），說明FLIP在食管癌組織中表達明顯上調(diào)。FLIP的表達與患者年齡、性別及腫瘤長度無相關(guān)性（P＞0．05）。FLIP與腫瘤的分化程度盡管無明顯相關(guān)性（P＞0．05）。FLIP的表達與食管癌的T分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均有顯著相關(guān)性（P＜0．05），并隨著腫瘤臨床分期的增加、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，其表達水平逐漸升高。這可能與以下機制有關(guān)：①FLIP的抑制凋亡作用。FLIP含量增加，食管癌細胞凋亡減少，食管癌細胞過度生長并易產(chǎn)生侵犯，同時過度生長的瘤體上癌細胞脫落，造成轉(zhuǎn)移。②FLIP增多，癌細胞得以對抗T細胞的殺傷作用［5］。以上研究結(jié)果提示，F(xiàn)LIP蛋白的表達與食管癌的惡性轉(zhuǎn)化密切相關(guān)，其在腫瘤中的高表達能夠抑制正常的細胞凋亡過程，從而細胞異常增生和惡性轉(zhuǎn)化，使癌細胞獲得永生性。FLIP在腫瘤細胞中表達越強，癌細胞的生存能力和腫瘤的惡性程度也隨之增高，癌細胞更容易侵襲周圍組織而發(fā)生轉(zhuǎn)移，從而增加治療難度。表明FLIP蛋白的高表達是預示預后不良的標志。FLIP可成為腫瘤基因診斷性標志物和腫瘤治療的新靶點［6－7］。

3 MTA1、FLIP在食管癌中陽性表達的相關(guān)性 惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、侵襲轉(zhuǎn)移，是一種高度選擇的非隨機過程，是多個基因共同參與的結(jié)果，與多種分子水平密切相關(guān)。FLIP基因的增多能夠使正常的細胞凋亡過程受到抑制。MTA1基因為腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)基因，通過此種功能直接或間接作用于某些抑制腫瘤浸潤轉(zhuǎn)移基因，下調(diào)其轉(zhuǎn)錄，使腫瘤抑制基因的數(shù)量減少，從而促使腫瘤的發(fā)生、發(fā)展，而與細胞凋亡過程無關(guān)。但是與細胞凋亡抑制基因FLIP存在明顯的正相關(guān)。這可能是由于MTAI下調(diào)腫瘤抑制基因的數(shù)量，而其數(shù)量的減少也間接的影響細胞凋亡的過程，但其具體作用機制有待于進一步研究。聯(lián)合檢測MTA1、FLIP、表達對于臨床高危復發(fā)病例，給予積極治療，對提高預后具有重要意義，并可作為建立食管癌預后模型的重要指標。

［1］ 賀宇彤，侯 浚，陳志峰，等．河北省磁縣近30年食管癌發(fā)病死亡趨勢分析［J］．中華流行病學雜志，2006，27（2）：127－131．

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