孫爽

【摘 要】文章分析了北豆根總堿（TAMD）軟膠囊的生產(chǎn)工藝和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

【關(guān)鍵詞】北豆根總堿；生產(chǎn)工藝

北豆根總堿軟膠囊的內(nèi)容物為黃色膏狀物，由北豆根總堿與基質(zhì)、潤濕劑和助懸劑組成。目前國內(nèi)尚無該產(chǎn)品，測定軟膠囊內(nèi)容物中總堿和主要單體蝙蝠葛堿的含量并在此基礎(chǔ)上制訂軟膠囊的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，是保證產(chǎn)品質(zhì)量的基礎(chǔ)。

1.儀器與試劑

（1）儀器JASCO高效液相色譜儀：RU1580泵，UV-15紫外-可見檢測器（日本）；HP-8453紫外-可見分光光度計（惠普公司）；AG-254型電子分析天平（瑞士梅特勒）；ZFQ85-A型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海醫(yī)械專機(jī)廠）；JMS-80膠體磨（廊坊通用機(jī)械廠）；RJNJ-1型壓丸機(jī)（上海延安制藥廠制藥機(jī)械分廠）。

（2）試劑。北豆根總堿軟膠囊（自制，規(guī)格60mg）；蝙蝠葛堿（對照品，自制，含量99.0%）；無水甲醇、磷酸、酚酞（分析純）；甲醇、乙腈（色譜純）；注射用大豆油（廣東環(huán)葉制藥有限公司）；蜂蠟（廣東威而特精臘開發(fā)有限公司）；聚甘油酯（池田物產(chǎn)公司）；明膠（青海明膠股份有限公司）；甘油（廣州啟得利化工商貿(mào)有限公司）；二氧化鈦（美國WC&D;公司）；丁烯二酸（太原市僑友化工有限公司）；食用檸檬黃（上?；瘜W(xué)染料二廠）。

2.處方與制備

（1）內(nèi)容物處方。中藥軟膠囊內(nèi)容物一般由主藥和稀釋劑、潤濕劑、助懸劑組成。通過文獻(xiàn)檢索，兼顧成本，將稀釋劑定為大豆油，助懸劑定為蜂蠟。潤濕劑常用吐溫類，但吐溫類可致紅細(xì)胞膜破裂而溶血，故選用聚甘油酯這一新型表面活性劑，具備良好的乳化性能[1]。選用正交實驗法確定各組分用量，取處方量的大豆油，水浴加熱，依處方加入蜂蠟、聚甘油酯，酯化后充分?jǐn)嚢?，加入處方量的主藥，用膠體磨研磨后超聲除去氣泡。內(nèi)容物的質(zhì)量以沉降系數(shù)作為考察指標(biāo)，將內(nèi)容物置于10ml刻度試管中，測定內(nèi)容物原始高度H0，以500r·min-1的速度離心4h，測定沉降后的高度H，計算沉降比F=H/H0，F(xiàn)值越大，內(nèi)容物越穩(wěn)定。

（2）囊殼的制備。北豆根總堿在光照情況下易分解，故在囊殼中加入二氧化鈦做遮光劑，加入檸檬黃改變外觀色澤。此外，北豆根總堿為堿性，可加速囊殼的老化，所以在囊殼中加入1%的丁烯二酸來改變囊殼的溶解性。稱取明膠1.0kg置化膠罐中備用，另外稱取食用檸檬黃0.4g溶于1500ml水中，將明膠浸泡36h，使明膠充分吸水膨脹。40℃水浴加熱使明膠溶解，加入甘油750g，阿拉伯膠漿250g，二氧化鈦8g，丁烯二酸20g，攪拌均勻。60℃蒸發(fā)水分至處方量，超聲波排除氣泡后涂于不銹鋼板，厚度1mm，90℃干燥既可。

（3）軟膠囊的制備。稱取大豆油1266g，水浴加熱，加入蜂蠟80g，聚甘油酯6g，熔化后攪拌均勻，加入北豆根提取物648g（含北豆根總堿600g），用膠體磨研磨后壓制軟膠囊。每粒軟膠囊內(nèi)容物重0.20g。

（4）整丸與干燥將軟膠囊在室溫（20～30℃）冷風(fēng)干燥后置95%乙醇中，洗去油污后取出，于50℃干燥24h。將干燥后的軟膠囊置包衣鍋內(nèi)，加入適量液體石蠟使均勻涂布。鋁塑泡罩包裝。批號分別為20051006，20051011，20051016。

3.質(zhì)量控制

（1）形狀本品為黃色膏狀物，味苦。

（2）鑒別取本品4粒，刮取內(nèi)容物，加稀鹽酸10ml，振搖提取30min，濾過。取濾液2ml，加碘化鉀碘試液2滴，即生成紅棕色沉淀；另取濾液2ml，加三硝基苯酚試液2滴，即生成黃色沉淀。

（3）檢查符合《中國藥典》2005版膠囊劑項下的各項規(guī)定。

（4）北豆根總堿含量測定。

比色原理溴甲酚綠為一酸性染料，它的顯色與pH值有關(guān)，溴甲酚綠在無水甲醇（pH=6）的條件下，可與北豆根總堿直接絡(luò)合成綠色化合物，用于比色測定。

檢測波長的選擇分別稱取一定量的北豆根總堿軟膠囊內(nèi)容物（約相當(dāng)于總堿15mg）和空白制劑的內(nèi)容物置10ml容量瓶中，加入無水甲醇至刻度，超聲提取30min，補足失去的甲醇量，過濾。取續(xù)濾液0.2ml置10ml容量瓶中，加入0.1%溴甲酚綠溶液0.2ml，用無水甲醇定容，在200～700nm進(jìn)行掃描。軟膠囊內(nèi)容物的甲醇提取液在620nm處有最大吸收，而空白制劑沒有吸收。說明輔料對測定無影響。

線性關(guān)系考察精密稱取蝙蝠葛堿對照品2.0mg，置10ml容量瓶中，加無水甲醇溶解并定容作為對照品溶液。分別精密稱取對照品溶液0.3，0.5，0.8，1.0，1.2，1.5，2.0ml，置10ml容量瓶中，加入0.1%溴甲酚綠溶液0.2ml，于620nm處測定吸收度，隨行試劑空白。以蝙蝠葛堿濃度C對吸收度A進(jìn)行線性回歸，得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程：C=49.82A-0.84，r=0.9998（n=7），線性范圍為6～40μg·ml-1。

回收率實驗取經(jīng)過含量測定的北豆根總堿（含量92.71%）約15mg，分別精密稱定5份置10ml容量瓶中，按處方比例加入輔料，用自動渦流混合器混勻。加入無水甲醇10ml，超聲提取30min，補足失去的甲醇量，過濾。取續(xù)濾液0.2ml置10ml容量瓶中，加入0.1%溴甲酚綠溶液0.2ml ，用無水甲醇定容。在620nm處測定吸收度。隨行試劑空白。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計算北豆根總堿的量和回收率。

樣品含量測定 按北豆根總堿軟膠囊的最佳處方，制備3批樣品，取3種批號樣品各40mg （約含總堿10mg），置50ml容量瓶中，用無水甲醇定容，超聲提取30min，補足失去的甲醇量，過濾。精密吸取續(xù)濾液1.0ml置10ml容量瓶中（濃度為2%），加入0.1%溴甲酚綠溶液0.2ml，用無水甲醇定容。在620nm處測定吸收度，隨行試劑空白。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計算北豆根總堿的量。結(jié)果3批樣品的標(biāo)示量分別為98.2%，99.6%，100.3%，符合方法學(xué)要求。

（5）蝙蝠葛堿含量測定。

色譜條件色譜柱為Discovery-C18（5μm，4.6mm×250mm）；流動相為乙腈∶水∶磷酸=16∶84∶0.15（V∶V∶V）；流速0.5ml·min-1；波長208nm；柱溫為室溫；進(jìn)樣量20μl；理論塔板數(shù)：2300。

干擾實驗分別稱取一定量的北豆根總堿軟膠囊內(nèi)容物（約相當(dāng)于總堿15mg）和空白制劑的內(nèi)容物置25ml容量瓶中，加入無水甲醇至刻度，超聲提取30min，補足失去的甲醇量，過濾。取續(xù)濾液1.0ml，置10ml容量瓶中，揮干甲醇，用流動相溶解并定容。按色譜條件檢測?？瞻字苿┰?5min時無吸收峰，說明輔料對測定沒有影響。

樣品含量測定 取3種批號樣品40mg （約含蝙蝠葛堿5mg），置25ml容量瓶中，用無水甲醇定容，超聲提取30min，補足失去的甲醇量，過濾。精密吸取續(xù)濾液2.0ml置10ml容量瓶中，（濃度為4%），揮干甲醇，用流動相溶解并定容。按上述色譜條件測定。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計算蝙蝠葛堿的量。取3種批號樣品40mg （約含總堿10mg），結(jié)果3批樣品的標(biāo)示量分別為99.1%，100.5%，99.6%，符合方法學(xué)要求，其中蝙蝠葛堿含量不低于北豆根總堿的45.0%。

4.討論

北豆根提取物味苦、疏水性強、對光熱不穩(wěn)定，適宜制成軟膠囊。建立北豆根總堿軟膠囊的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，需要解決兩個問題：一是能否完全地把北豆根總堿從內(nèi)容物中提取出來；二是輔料是否對測定造成影響。本實驗在參考北豆根提取物含量測定方法的基礎(chǔ)上，很好地解決了上述兩個問題，完成了北豆根總堿軟膠囊的含量測定。

【參考文獻(xiàn)】

[1]朱孝芹，韓鐵剛，劉翠哲.北豆根總堿軟膠囊的制備及質(zhì)量控制.論文網(wǎng)，2011，03.

[2]時軍，程怡.輔料在軟膠囊劑型中的應(yīng)用[J].中醫(yī)藥學(xué)刊，2003，21（9）∶1429.