王笑石

（沙洋縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，湖北 荊門 448200）

乙型肝炎病毒DNA定量與血清學(xué)標(biāo)志物檢測(cè)的相關(guān)分析及臨床意義

王笑石

（沙洋縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，湖北 荊門 448200）

目的 分析HBV-DNA定量與血清學(xué)標(biāo)志物定量檢測(cè)之間的相關(guān)性及臨床意義。方法 采用ELISA檢測(cè)386例HBV感染者的HBV血清學(xué)標(biāo)志物，同時(shí)采用PCR-熒光探針?lè)ǘ繖z測(cè)HBV-DNA拷貝值。比較大三陽(yáng)組（HBsAg、HBeAg和HBcAb陽(yáng)性）與小三陽(yáng)組（HBsAg、HBeAb和HBcAb陽(yáng)性）的HBV-DNA定量平均對(duì)數(shù)值；并分析血清學(xué)標(biāo)志物與HBV-DNA定量的相關(guān)性。比較慢性肝炎、重型肝炎和肝硬變者HBV-DNA定量平均對(duì)數(shù)值的差異。結(jié)果 大三陽(yáng)組與小三陽(yáng)組的HBV-DNA定量平均對(duì)數(shù)值分別為（7.82±1.02）vs（3.52±0.76）IU/mL（P=0.024）；HBsAg、HbeAg與HBV-DNA定量呈正相關(guān)，而HbeAb、HBcAb與HBV-DNA定量無(wú)相關(guān)。慢性肝炎、重型肝炎和肝硬變者HBV-DNA定量平均對(duì)數(shù)值為分別為（9.23±1.73）、（9.45±1.26）、（8.93±1.38）IU/mL（P＜0.001）。結(jié)論 HBV血清學(xué)標(biāo)志物結(jié)合DNA定量檢測(cè)對(duì)于評(píng)價(jià)傳染性有意義，但對(duì)分析臨床類型無(wú)意義。

乙型肝炎病毒；熒光定量PCR；酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)

乙型肝炎病毒（HBV）的血清標(biāo)志物能反映機(jī)體對(duì)HBV的免疫反應(yīng)狀態(tài)，但是較難以反映HBV在體內(nèi)的復(fù)制水平、傳染性以及治療效果[1]。而目前公認(rèn)乙型肝炎病毒脫氧核糖核酸（HBV-DNA）是HBV復(fù)制情況及傳染性最可靠和最直接的指標(biāo)，并且對(duì)于療效、耐藥性及復(fù)發(fā)狀況進(jìn)行動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)[2]。但目前對(duì)于HBV-DNA定量與血清學(xué)標(biāo)志物定量檢測(cè)之間的相關(guān)性，以及二者檢測(cè)對(duì)于HBV感染的臨床類型分類研究尚不充分，因此本研究回顧分析HBV感染者的HBV-DNA定量、血清標(biāo)志物與臨床類型之間的關(guān)系進(jìn)行了比較分析，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象及分組

選取2008年1月至2011年9月我院就診的HBV感染患者386例，作為研究對(duì)象進(jìn)行回顧性研究，其中男203例，女183例，平均年齡（32.2±8.6）歲。診斷標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)符合2000年全國(guó)病毒性肝炎和肝病學(xué)術(shù)會(huì)議修訂的《病毒性肝炎防治方案》。臨床類型：慢性肝炎患者198例、重型肝炎患者72例、肝硬變患者116例。所有患者在本研究2月前，均無(wú)應(yīng)用抗病毒、激素或免疫抑制劑史。

按照HBV血清學(xué)標(biāo)志物，分為兩組：大三陽(yáng)組，即HBsAg、HBeAg和HBcAb陽(yáng)性；小三陽(yáng)組，即HBsAg、HBeAb和HBcAb陽(yáng)性。

1.2 HBV血清學(xué)標(biāo)志物的檢測(cè)

按照試劑盒（購(gòu)自英科新創(chuàng)科技有限公司）操作說(shuō)明書進(jìn)行檢測(cè)乙肝5項(xiàng)，其中HBsAg、HBeAg、HBeAb和HbcAb的結(jié)果。

1.3 血清HBV-DNA定量檢測(cè)

采用PCR-熒光探針?lè)ǘ繖z測(cè)血清HBV-DNA，嚴(yán)格按試劑操作說(shuō)明書操作。設(shè)立空白、陰性、臨界陽(yáng)性和強(qiáng)陽(yáng)性對(duì)照，以檢測(cè)試劑和操作過(guò)程中的污染情況以及檢測(cè)的靈敏度，同時(shí)檢測(cè)低值和中值室內(nèi)質(zhì)控物進(jìn)行質(zhì)量控制。所有標(biāo)本均在同一條件下同一批檢驗(yàn)，其陽(yáng)性截止值為≥2×106copy/L。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

應(yīng)用SPSS 15.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)，計(jì)量資料數(shù)值以（）表示，兩組數(shù)據(jù)比較采取組間t檢驗(yàn)，多組數(shù)據(jù)比較采取ANONVA檢驗(yàn)，組間比較應(yīng)用SNK檢驗(yàn)。相關(guān)性采用直線回歸分析，以P＜0.05為存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

2 結(jié) 果

2.1 傳染性不同的血清HBV-DNA定量分析

大三陽(yáng)組與小三陽(yáng)組的HBV-DNA定量平均對(duì)數(shù)值分別為（7.82± 1.02）vs（3.52±0.76）IU/mL（P=0.024）。

2.2 血清HBV-DNA定量與血清學(xué)標(biāo)志物相關(guān)性

HBsAg、HbeAg與HBV-DNA定量呈正相關(guān)，r值分別為0.002、0.007；而HbeAb、HBcAb與HBV-DNA定量無(wú)相關(guān)，r值分別為0.085、0.033（表1）。

表1 血清HBV-DNA定量與血清學(xué)標(biāo)志物相關(guān)性

2.3 臨床類型與血清HBV-DNA定量比較

慢性肝炎、重型肝炎和肝硬變者HBV-DNA定量平均對(duì)數(shù)值為分別為（9.23±1.73）、（9.45±1.26）、（8.93±1.38）IU/mL（P＜0.001）（表2）。

表2 臨床類型與血清HBV-DNA定量比較

3 討 論

臨床上確診HBV感染有賴于病原學(xué)診斷，主要的檢測(cè)方法是應(yīng)用免疫血清學(xué)方法檢測(cè)HBV血清學(xué)標(biāo)志物以及應(yīng)用分子生物學(xué)方法檢測(cè)HBV-DNA。HBV血清學(xué)標(biāo)志物主要反映的是人體對(duì)乙肝病毒的免疫狀態(tài)，而HBV-DNA是病毒復(fù)制活動(dòng)最直接，也是最可靠的實(shí)驗(yàn)標(biāo)志物，也是HBV感染最為直接的證據(jù)[3]。既往認(rèn)為HBsAg、HBeAg和HBcAb陽(yáng)性，即“大三陽(yáng)”患者，傳染性最大，而HBsAg、HBeAg和HBcAb陽(yáng)性，即“小三陽(yáng)”患者，HBeAg轉(zhuǎn)陰且產(chǎn)生HBeAb，表明HBV病毒的復(fù)制水平減少，拷貝數(shù)減少，因此傳染性減弱，病變趨于靜止?fàn)顟B(tài)。從本研究結(jié)果來(lái)看，“大三陽(yáng)”患者的血清HBV-DNA定量明顯較“小三陽(yáng)”患者高，這證實(shí)了臨床的觀點(diǎn)。但是也有臨床證據(jù)顯示，由于HBV存在pre-c基因變異，進(jìn)而出現(xiàn)雖然HBeAg陰性且HBeAb陽(yáng)性，但是病毒復(fù)制仍然活躍的情況，因此臨床上不能僅根據(jù)免疫血清學(xué)的結(jié)果來(lái)對(duì)“小三陽(yáng)”患者的病毒復(fù)制水平以及傳染性進(jìn)行判斷，而應(yīng)該結(jié)合血清HBV-DNA定量分析來(lái)綜合評(píng)價(jià)，最佳方法是進(jìn)行動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)。

本研究分析血清HBV-DNA定量與血清學(xué)標(biāo)志物相關(guān)性，顯示HBsAg和HBeAg值與血清HBV-DNA定量呈正相關(guān)，而HbeAb、HBcAb與HBV-DNA定量無(wú)顯著相關(guān)性[4]。因此，測(cè)定血清中HBsAg和HbeAg水平可以間接反映血清HBV-DNA的量，這對(duì)于基層醫(yī)療機(jī)構(gòu)快捷判斷抗病毒藥物治療療效和預(yù)后判斷均有很好的臨床意義。在分析不同臨床類型與血清HBV-DNA定量的相關(guān)性中，本研究顯示慢性肝炎、重型肝炎以及肝硬變的血清HBV-DNA定量并無(wú)明顯差異，這一點(diǎn)與國(guó)內(nèi)的報(bào)道有不一致[5]。因此需要進(jìn)行大規(guī)模、多中心臨床研究來(lái)判斷。

[1] 陳小晶,王奕忠,鄭映玉,等.乙肝病毒載量與血清標(biāo)志物定量的相關(guān)性[J].廣東醫(yī)學(xué),2009,30(2):239-241.

[2] 楊婷,謝亞榮,王波.乙肝病毒攜帶產(chǎn)婦血清和乳汁中HBV-DNA定量檢測(cè)及其臨床意義[J].實(shí)用醫(yī)技雜志,2008,15(24):3213-3214.

[3] 蔡惠興,吳英,梁鵬.乙肝血清標(biāo)志物與HBV-DNA定量檢測(cè)結(jié)果分析[J].國(guó)際醫(yī)藥衛(wèi)生導(dǎo)報(bào),2010,16(2):218-219.

[4] 溫旺榮,蘇芳,昊勇,等.乳汁處理方法對(duì)檢測(cè)HBV-DNA結(jié)果的影響[J].臨床檢驗(yàn)雜志,2007,25(1):31-33.

[5] 周平,張木森,蔡慶,等.定量聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè)HBV感染者血清HBV-DNA的臨床意義[J].空軍總醫(yī)院學(xué)報(bào),1997,13(4):193-195.

R512.6+2

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1671-8194（2013）27-0176-02