趙春蘭 張會(huì)辰 王建 李利

宮頸癌的發(fā)病率僅次于乳腺癌，居女性惡性腫瘤的第二位。全世界每年約20萬(wàn)女性死于宮頸癌，而新發(fā)宮頸癌病例更高達(dá) 45.9 ～50 萬(wàn)人［1，2］，其中我國(guó)每年新發(fā)病例 13.15 萬(wàn)，占世界新發(fā)病例的28.7%［3］，約95%的宮頸癌的發(fā)生與人乳頭瘤病毒(human papilloma virus，HPV)感染有關(guān)［4，5］。近些年，液基細(xì)胞學(xué)(TCT)檢查逐步替代了傳統(tǒng)的宮頸涂片，TBS診斷法使細(xì)胞學(xué)與組織學(xué)的診斷術(shù)語(yǔ)得到了較好的統(tǒng)一，但細(xì)胞病理學(xué)診斷方法作為一種篩查手段，對(duì)宮頸癌前病變的發(fā)展趨勢(shì)無(wú)法進(jìn)行預(yù)測(cè)評(píng)估。有學(xué)者建議把HPV-DNA檢測(cè)及宮頸細(xì)胞DNA定量分析等手段應(yīng)用于宮頸病變的早期診斷［5］。本研究通過(guò)比較分析TCT、HPV-DNA和ICM-DNA定量分析3種篩查方法在宮頸癌及癌前病變篩查中的應(yīng)用價(jià)值，旨在為宮頸癌的早期發(fā)現(xiàn)、早期診斷及合理治療提供一些理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2008年9月至2009年12月于保定市婦幼保健院行宮頸脫落細(xì)胞學(xué)檢查的患者3000 例，年齡17～65歲;孕次0～7次，平均2次;產(chǎn)次為0～4次，平均為1次。

1.2 試劑 液基薄層細(xì)胞保存液為湖北德立森科技有限公司產(chǎn)品，人乳頭狀瘤病毒(HPV)核酸擴(kuò)增分型檢測(cè)試劑盒及HPV-DNA分型檢測(cè)儀購(gòu)自凱普生物儀器有限公司，全自動(dòng)細(xì)胞DNA定量分析儀產(chǎn)自武漢蘭丁醫(yī)學(xué)高科技公司。

1.3 方法

1.3.1 TCT

1.3.1.1 標(biāo)本采集與制備:臨床醫(yī)師用宮頸刷在3000 例受檢者宮頸鱗柱狀上皮交界處單向旋轉(zhuǎn)6圈以上收集脫落細(xì)胞，將收集的宮頸細(xì)胞連采樣刷頭一并置入盛有保存液的標(biāo)本瓶中，送檢至我院病理科，由專門(mén)技術(shù)人員用液基薄層細(xì)胞制片儀將標(biāo)本制成直徑為2cm的薄層液基細(xì)胞涂片，95%乙醇固定15～30 min，行巴氏染色，標(biāo)本瓶常規(guī)保存1年。

1.3.1.2 判定細(xì)胞學(xué)診斷結(jié)果陽(yáng)性的標(biāo)準(zhǔn)為［6－8］:①LSIL 及以上需要進(jìn)行病理活檢的病例視為細(xì)胞學(xué)檢查陽(yáng)性結(jié)果;②鱗狀上皮細(xì)胞癌和腺癌統(tǒng)稱為癌(carcinoma)。

1.3.2 HPV-DNA 檢測(cè)

1.3.2.1 標(biāo)本采集與保存:對(duì)細(xì)胞學(xué)檢查篩查出的ASC-US及以上病變患者行HPV-DNA檢測(cè)。用雜交捕獲二代檢測(cè)系統(tǒng)專用配套采樣器采集宮頸細(xì)胞標(biāo)本，將標(biāo)本連同采樣刷頭一并置入保存液。標(biāo)本置于4℃冰箱保存?zhèn)溆茫?周內(nèi)上機(jī)檢測(cè)。

1.3.2.2 用雜交捕獲二代系統(tǒng)檢測(cè)高危型HPV病毒:通過(guò)雜交捕獲二代檢測(cè)系統(tǒng)對(duì)所取標(biāo)本行 HPV16、18、31、33、35、39、45等13種常見(jiàn)的HPV高危型檢測(cè)。并設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照。

1.3.3 ICM-DNA 定量分析

1.3.3.1 標(biāo)本采集與制備:將TCT篩查出的ASC-US及以上病變患者的剩余保存液再次制片，95%酒精固定后，經(jīng)Feulgon染色行DNA定量分析。

1.3.3.2 DNA倍體檢測(cè):制備好的玻片行全自動(dòng)細(xì)胞圖像分析儀掃描:玻片置于顯微鏡載物臺(tái)，以同一玻片上淋巴細(xì)胞核DNA含量作為正常2倍體參照細(xì)胞，保證參照細(xì)胞與分析細(xì)胞同時(shí)固定、染色，并在相同光照系統(tǒng)下進(jìn)行測(cè)量。

1.3.4 病理組織學(xué)檢查:對(duì)TCT篩查出的陽(yáng)性病例同時(shí)行HPV-DNA檢測(cè)和組織病理學(xué)檢查。根據(jù)2004年世界衛(wèi)生組織腫瘤分類及診斷標(biāo)準(zhǔn)叢書(shū)“乳腺及女性生殖器官腫瘤病理學(xué)和遺傳學(xué)”分冊(cè)，關(guān)于宮頸上皮內(nèi)病變及宮頸癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)及相關(guān)文獻(xiàn)［9，10］，將病理組織學(xué)檢查 CINⅡ級(jí)及以上病變定為陽(yáng)性。

1.4 3種檢測(cè)方法的評(píng)價(jià) 采用靈敏性、特異性及準(zhǔn)確率指標(biāo)將三種檢測(cè)方法與病理組織學(xué)進(jìn)行比較。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 應(yīng)用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件，進(jìn)行多配對(duì)樣本的非參數(shù)檢驗(yàn)(Pearson 2檢驗(yàn))，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 TCT與病理組織學(xué)驗(yàn)證結(jié)果 TCT結(jié)果:ASC-US及以上病變377例，其中陰性(ASC-US)275例，陽(yáng)性102例(包括LSIL 62例、HSIL 40例、SCC 0例)。病理組織學(xué)檢查結(jié)果:TCT陰性275例，其中組織學(xué)陰性(CINⅠ級(jí)及BCC病例)255例，組織學(xué)陽(yáng)性(CINⅡ級(jí)及以上)20例;TCT陽(yáng)性102例，其中組織學(xué)陰性52例，組織學(xué)陽(yáng)性50例。TCT的敏感性為71.43%，特異性為 83.06%，準(zhǔn)確率為 80.90%。見(jiàn)表 1、4。

表1 TCT與病理組織學(xué)驗(yàn)證 例

2.2 HPV-DNA檢測(cè)與病理組織學(xué)驗(yàn)證結(jié)果 HPV-DNA檢測(cè)陰性185例，陽(yáng)性192例。病理組織學(xué)檢查結(jié)果:HPV-DNA陰性185例中，組織學(xué)陰性(CINⅠ級(jí)及BCC病例)182例，陽(yáng)性(CINⅡ級(jí)及以上)3例;HPV-DNA陽(yáng)性192例，其中組織學(xué)陰性125例，陽(yáng)性67例。HPV-DNA檢測(cè)的敏感性為95.71%，特異性為59.28%，準(zhǔn)確率為66.05%。見(jiàn)表2、4。

表2 HPV-DNA檢測(cè)與病理組織學(xué)驗(yàn)證 例

2.3 CM-DNA檢測(cè)與病理組織學(xué)驗(yàn)證結(jié)果 ICM-DNA檢測(cè)陰性287例，陽(yáng)性90例。病理組織學(xué)檢查結(jié)果:ICM-DNA檢測(cè)陰性組287例，其中組織學(xué)陰性270例，陽(yáng)性17例;ICM-DNA檢測(cè)陽(yáng)性組90例，其中組織學(xué)陰性37例，陽(yáng)性53例。ICM-DNA檢測(cè)的敏感性為 75.71%，特異性為 87.95%，準(zhǔn)確率為85.68%。見(jiàn)表 3、4。

表3 ICM-DNA檢測(cè)結(jié)果與病理組織學(xué)驗(yàn)證 例

2.4 3種檢測(cè)方法相比較 HPV-DNA檢測(cè)的敏感性高于TCT和ICM-DNA檢測(cè)，而TCT特異性高于其他兩項(xiàng)檢查(P＜0.05)，在3種檢測(cè)方法中ICM-DNA檢測(cè)的準(zhǔn)確率最高(P＜0.05)。見(jiàn)表4。

表4 TCT、HPV-DNA檢測(cè)、ICM-DNA檢測(cè)的比較 %

3 討論

宮頸癌是常見(jiàn)的女性生殖道惡性腫瘤之一，嚴(yán)重危害廣大女性的生命健康，篩查宮頸癌成為目前研究的熱點(diǎn)［11］。

細(xì)胞學(xué)檢查是1928年由Papanicolaou提出，運(yùn)用宮頸脫落細(xì)胞刮片以篩查宮頸癌的方法［12，13］。宮頸癌的病因?qū)W研究發(fā)現(xiàn)，目前可以分離鑒定出的HPV有100多種，其中與宮頸病變有關(guān)的有30余種，根據(jù)其致病性分為高危型、中危險(xiǎn)型和低危型三種，高危型HPV是宮頸癌及癌前病變的主要原因，低危型主要引起生殖道的良行病變，中危型多導(dǎo)致CIN。而生殖道HPV感染在有性生活的人群中普遍存在，在每個(gè)女性一生中都有感染的可能性，但60% ～70%的人僅僅是HPV陽(yáng)性而沒(méi)有宮頸病變，宮頸癌變的發(fā)生還與其他因素有關(guān)，如感染持續(xù)的時(shí)間、身體狀況等。由于HPV感染早于形態(tài)學(xué)改變，檢測(cè)HPV具有早期預(yù)警和跟蹤檢測(cè)意義。

宮頸癌的發(fā)生是一個(gè)多因素、多途徑、多步驟的過(guò)程，涉及到癌基因的激活與抑癌基因的失活，染色體數(shù)量和結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，從而導(dǎo)致非整倍體的產(chǎn)生，而非整倍體又是宮頸病變進(jìn)展中的一個(gè)顯著性標(biāo)志［14］。因此，可以通過(guò)檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)DNA含量的變化進(jìn)行腫瘤細(xì)胞及非腫瘤細(xì)胞的鑒別診斷。

3.1 液基細(xì)胞學(xué)對(duì)宮頸癌及癌前病變篩查的價(jià)值 TCT通過(guò)液基薄層細(xì)胞學(xué)技術(shù)，去除了玻片上的粘液、血液和大量的炎細(xì)胞，可以更清晰的觀察細(xì)胞形態(tài)和結(jié)構(gòu)的改變，且避免了刮板上大量細(xì)胞的丟失［15］，與巴氏刮片相比細(xì)胞學(xué)篩查的準(zhǔn)確度和敏感度有了較大的提高。錢德英［16］認(rèn)為T(mén)CT雖然是宮頸癌前病變篩查的一大革命，但是判讀涂片過(guò)程中易受到人為因素的影響，陰性率較高，易漏檢宮頸癌及癌前病變。在本實(shí)驗(yàn)中TCT的敏感性和準(zhǔn)確率均較其他兩者低，特異性高于HPVDNA檢測(cè)但是低于ICM-DNA檢測(cè)。TCT操作簡(jiǎn)單，是一種經(jīng)濟(jì)便捷的宮頸癌及癌前病變的篩查方法，且液基細(xì)胞學(xué)制片方法是進(jìn)行ICM-DNA檢測(cè)的基本步驟，便于進(jìn)行圖像的掃描。此外，液基細(xì)胞學(xué)與檢測(cè)高危型HPV聯(lián)合應(yīng)用除可提高篩查的敏感性［17］。

3.2 HPV-DNA檢測(cè)對(duì)宮頸癌及癌前病變篩查的價(jià)值

3.2.1 HPV-DNA檢測(cè)的常用方法:HPV感染與宮頸癌的關(guān)系是目前研究的熱點(diǎn)，其檢測(cè)主要依賴于核酸探針雜交技術(shù)。目前用于檢測(cè)HPV-DNA主要有3種核酸雜交方法，即直接核酸探針?lè)?、雜交信號(hào)放大法和靶 DNA擴(kuò)增法［18，19］。

3.2.2 HPV-DNA檢測(cè)對(duì)宮頸癌及癌前病變篩查的價(jià)值:常規(guī)細(xì)胞學(xué)診斷HPV感染依賴于鏡下細(xì)胞的形態(tài)學(xué)改變，即出現(xiàn)特征性的挖空細(xì)胞為診斷依據(jù)，易出現(xiàn)假陰性或假陽(yáng)性結(jié)果［20］。雜交捕獲法(HC2)是當(dāng)前較為先進(jìn)的檢測(cè)方法。在本研究中，HPV-DNA檢測(cè)的敏感性高但特異性低，準(zhǔn)確率高于液基細(xì)胞學(xué)檢查而低于ICM-DNA檢測(cè)。國(guó)內(nèi)有研究認(rèn)為，HPVDNA檢測(cè)在對(duì)宮頸病變篩查中的敏感性為60% ～70%，特異性為80% ～90%［21］，本實(shí)驗(yàn)結(jié)果與其存在一定的差異，考慮有以下幾種原因:①高危型HPV的檢出說(shuō)明患者感染了HPV，但是有高危型HPV感染不一定引起細(xì)胞形態(tài)的異常改變，是否發(fā)展為宮頸癌及癌前病變與感染持續(xù)的時(shí)間、患者免疫狀態(tài)等因素有關(guān)，因此患者病理組織學(xué)檢查可能未檢出陽(yáng)性病變。②本實(shí)驗(yàn)中，考慮到CINⅠ級(jí)患者的臨床處理與CINⅡ、CINⅢ患者不同，甚至可以不做臨床處理，將CINⅠ級(jí)病例定為陰性結(jié)果，造成實(shí)驗(yàn)中假陰性比例減少，敏感性增高。若按CINⅠ級(jí)為陽(yáng)性結(jié)果則敏感性為73.16%，則與上述研究結(jié)果相近。

本研究顯示，HPV陽(yáng)性病例192例，病理組織學(xué)結(jié)果只有70例在CINⅡ以上病變，其余125例中53例為BCC，72例為CINⅠ級(jí)，除了與感染持續(xù)的時(shí)間、患者免疫狀態(tài)等因素有關(guān)以外，還應(yīng)考慮到宮頸活檢取材是否準(zhǔn)確及醫(yī)生診斷的主觀性等人為因素。對(duì)于假陰性病例，不排除有其他原因?qū)е聦m頸癌前病變及宮頸癌的因素，有報(bào)導(dǎo)約5%的宮頸癌及癌前病變?yōu)榉歉呶Ｐ虷PV引起。

HPV檢測(cè)具有早期預(yù)警和跟蹤檢測(cè)意義，尤其當(dāng)宮頸細(xì)胞學(xué)檢查(TCT)提示非典型細(xì)胞(ASCUS)時(shí)，不能確定是炎癥還是有癌前病變的情況存在，就要依據(jù)HPV檢測(cè)結(jié)果來(lái)決定行陰道鏡檢查或隨診觀察。

3.3 ICM-DNA檢測(cè)對(duì)宮頸癌及癌前病變篩查的價(jià)值

3.3.1 ICM-DNA檢測(cè)的原理及優(yōu)點(diǎn):ICM是以Lamber-Beer定律為基礎(chǔ)，結(jié)合細(xì)胞、組織和顯微成像儀器的特點(diǎn)，測(cè)定細(xì)胞學(xué)、組織學(xué)樣品的成像細(xì)胞圖像的光度，以評(píng)估其化學(xué)成分的含量［22］。ICM-DNA檢測(cè)能夠客觀、精確的測(cè)定細(xì)胞核的DNA倍體值，獲得了腫瘤生物學(xué)特征信息［23，24］，為細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查提供了有價(jià)值的補(bǔ)充，自動(dòng)化的分析過(guò)程也很大程度上減少了閱片者主觀因素的影響。

3.3.2 ICM-DNA檢測(cè)對(duì)宮頸癌及癌前病變篩查的價(jià)值:染色體重組、片段的丟失或增多及染色體數(shù)目的改變，可引起基因的非整倍體擴(kuò)增，導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。DNA非整倍體的出現(xiàn)是染色體異常的標(biāo)志。本研究采用全自動(dòng)細(xì)胞圖像分析儀對(duì)液基細(xì)胞學(xué)檢查篩查出的ASCUS及以上的病變共計(jì)377例患者行宮頸細(xì)胞DNA倍體測(cè)定，檢測(cè)出大于5c細(xì)胞標(biāo)本90例，其特異性為87.95%，準(zhǔn)確率為85.68%，高于液基細(xì)胞學(xué)和HPVDNA檢測(cè)，敏感性卻低于HPV檢測(cè)。ICM-DNA檢測(cè)假陰性病例和假陽(yáng)性病例分別為17例和37例，分析有以下因素造成:①良性非整倍體細(xì)胞:研究發(fā)現(xiàn)HPV病毒、HIV病毒感染可引起＞5c的非整倍體細(xì)胞。另外，放射治療、激素治療和維生素B12缺乏及激素水平紊亂均可導(dǎo)致細(xì)胞非整倍體擴(kuò)增，但與腫瘤性非整倍體細(xì)胞不同的是當(dāng)這些影響因素去除后，細(xì)胞可恢復(fù)正常整倍體。這些因素往往只引起散在的＞5c細(xì)胞，而不會(huì)形成非整倍體細(xì)胞峰。因此，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有非整倍體細(xì)胞，排除這些因素后，就能做出正確的診斷。②DNA-ICM硬件和軟件系統(tǒng)問(wèn)題:細(xì)胞圖像分析DNA倍體測(cè)定是一種較新的DNA定量細(xì)胞研究，重疊細(xì)胞或成團(tuán)細(xì)胞的分割在該系統(tǒng)中尚存在缺陷，儀器往往將這類細(xì)胞歸為垃圾而不予掃描，從而引起誤診。不過(guò)宮頸鱗狀細(xì)胞成團(tuán)的機(jī)會(huì)少，液基薄層制片中細(xì)胞分布均勻而分散，此情況較少見(jiàn)。③檢測(cè)人員水平:檢測(cè)出有DNA倍體＞5c及以上倍體值細(xì)胞的玻片均要求專門(mén)細(xì)胞技術(shù)人員在顯微鏡下對(duì)這些細(xì)胞進(jìn)行核實(shí)，以排除系統(tǒng)問(wèn)題導(dǎo)致假陰性和假陽(yáng)性情況。染色過(guò)程中操作不當(dāng)，細(xì)胞退變嚴(yán)重，DNA分子結(jié)合了較多染色劑，出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。酸化不全，化學(xué)鍵沒(méi)有全部打開(kāi)，DNA分子染色差，出現(xiàn)假陰性結(jié)果。

3.4 三種篩查方法的評(píng)價(jià) 有效的篩查手段可以降低宮頸癌的發(fā)病率，研究表明，每年或每?jī)赡?次宮頸癌篩查可以使宮頸癌的發(fā)病率和病死率明顯下降［25－27］。在本實(shí)驗(yàn)中三種方法相比，宮頸液基細(xì)胞學(xué)檢查簡(jiǎn)單易行，無(wú)創(chuàng)傷且價(jià)格較低，易于被患者接受，但敏感性和準(zhǔn)確率均較低，受閱片者主觀影響大;宮頸細(xì)胞DNA定量分析能提供形態(tài)學(xué)之外的腫瘤生物學(xué)信息，特異性和準(zhǔn)確率均高于其他兩項(xiàng)檢測(cè)，并且全自動(dòng)圖像分析系統(tǒng)分析過(guò)程有效降低了人為因素的影響，其結(jié)果客觀準(zhǔn)確，彌補(bǔ)了細(xì)胞病理學(xué)診斷的不足，適用于大規(guī)模的宮頸癌及癌前病變篩查工作。HPV-DNA檢測(cè)是直接針對(duì)病因的檢測(cè)，敏感性高，能夠?qū)⒋嬖跐撛诎l(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的婦女篩選出來(lái)，進(jìn)行針對(duì)性的治療

1 Parkin DM，Bray F，F(xiàn)erlay J，et al.Global cancers statistics.CA Cancer J Clin，2005，55:74-108.

2 殷霞，狄文.宮頸癌篩查的新進(jìn)展.國(guó)外醫(yī)學(xué)婦幼保健分冊(cè)，2005，16:103-105.

3 Pankin DM，Pisani P，F(xiàn)erlay J.Esimates of the world wide incidence of 25 major cancers in 1990.Int J Cancer，1999，80:827-841.

4 Walboomers JMM，Meijer CHLM.Do HPV-negative cervical carcinomas exist?J Pahol，1997，181:253-254.

5 高娜.傳統(tǒng)巴氏涂片法、液基制片法及HPV-DNA檢測(cè)法篩查宮頸癌及癌前病變的比較研究.中國(guó)醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文，2004，4:2.

6 李青，錢寧.HC2-HPV-DNA檢測(cè)與薄層液基細(xì)胞學(xué)檢查在篩查宮頸癌中應(yīng)用價(jià)值的對(duì)比.南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2009，29:1172-1174.

7 田秀娟.TCT聯(lián)合HPV-DNA檢測(cè)在宮頸癌病變中的臨床意義.中國(guó)婦幼保健，2010，25:3974-3975.

8 郎景和.迎接子宮頸癌預(yù)防的全球挑戰(zhàn)與機(jī)遇.中華婦產(chǎn)科雜志，2002，37:129-131.

9 劉軍，羅淑貞，盧義生，等.液基細(xì)胞學(xué)應(yīng)用于宮頸癌篩查的研究.中國(guó)實(shí)用婦科與產(chǎn)科雜志，2004，20:44-45.

10 陸敏華，印永祥，黃望珍，等.465例宮頸液基細(xì)胞學(xué)與病理組，織學(xué)檢查結(jié)果對(duì)照分析.齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2010，30:1715-1716.

11 潘秦鏡，李凌，喬友林，等.液基細(xì)胞學(xué)篩查宮頸癌的研究.中華腫瘤雜志，2001，23:309-312.

12 Lee KP，Ashfaq R，Birdsong GG，et al.Comparison of conventional Papanicolou smears and a fluid-based thin-layer system for cervical cancer screening.Obstet Gynecol，1997，90:278-284.

13 范玲玲，韓輝.宮頸液基細(xì)胞學(xué)和DNA倍體檢查用于宮頸癌篩查309例報(bào)告.福建醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2006，3:187-188.

14 Peter M，Svetlana V，Nicolas W，et al.DNA Aneuploidy and Integration of Human Papillomavirus Type 16 E6/E7 Oncogenes in Intraepithelial Neoplasia and Invasive Squamous Cell Carcioma of the Cervix Uteri，2004，10:3059-3063.

15 Denise ZG.High risk HPV testing in women with borderline and mild dyskaryosis:long-termfollow up data and clinical relevance.J Pathol，2001，195:300-306.

16 錢德英.重視宮頸癌前病變篩查的質(zhì)量管理控制.中國(guó)實(shí)用婦科與產(chǎn)科雜志，2007，23:497-498.

17 卞美璐.WHO(2006)宮頸癌綜合防治實(shí)踐指南簡(jiǎn)介.中國(guó)實(shí)用婦科與產(chǎn)科雜志，2007，23:557-560.

18 Sandri MT，Lentati P，Benini E，et al.Comparison of the Digene HC2 Assay and the Roche AMPLICOR.J Clin Microbiol，2006，44:2141-2146.

19 Schiffman M，Wheelercm，Dasgupta A，et al.A comparison of a prototype PCR assay and hybrid capture2 for detection of carcinogenic human papillomavirus DNA in women with equivocal or mildly abnormal Papanicolau smears.Am Clin Pathol，2005，124:722-732.

20 鄭洪，李德祥，胡瓊.HPV免疫組化和原位核雜交技術(shù)在女陰尖銳濕疣和假性濕疣診斷中的價(jià)值.貴州醫(yī)藥，2002，2:99-100.

21 唐禮榕，張志毅.HPV-DNA檢測(cè)在宮頸病變?cè)\斷中的價(jià)值.中國(guó)癌癥雜志，2006，16:217-219.

22 李朋軍，夏潮涌.腫瘤細(xì)胞DNA干系倍體分析及其臨床應(yīng)用.中國(guó)體視學(xué)與圖像分析，2005，10:73-75.

23 孫小蓉，車東媛，涂洪章，等.細(xì)胞DNA倍體分析評(píng)估宮頸上皮內(nèi)瘤變.中華病理學(xué)雜志，2006，11:831-835.

24 Grote HJ，F(xiàn)riedrichs N，Pomjanski N，et al Prognostic significance ofDNA cytometry in carcinoma of the uterine cervix FIGO Stage B and II.Analv Cell Pathol，2001，23:97-105.

25 Liu S，Semenciw R，Probert A，et al.Cervical cancer in Canada:changing patterns in incidence and mortality.Int J Gynecol Caner，2001，11:24-31.

26 Anderson GH，Boyes DA，Benedet JL，et al.Organization and results of the cervical cytology screening programme in British Columbia.Br Med J，1988，296:975-978.

27 Guidozzi F.Screening for ovarian cancer.Obstet Gynecol Surv，1996，51:696-701.