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        紫丁香苷的提取工藝研究及其含量測定

        2013-06-07 10:04:49金川粲
        中國民族民間醫(yī)藥 2013年18期
        關(guān)鍵詞:工藝標(biāo)準(zhǔn)

        劉 聰 金川粲 劉 甜

        一汽總醫(yī)院,吉林 長春 130011

        紫丁香苷的提取工藝研究及其含量測定

        劉 聰 金川粲 劉 甜

        一汽總醫(yī)院,吉林 長春 130011

        目的:對紫丁香葉中紫丁香苷提取工藝及其含量進(jìn)行研究,為紫丁香葉的開發(fā)奠定基礎(chǔ)。方法:采用高效液相色譜法對紫丁香葉中紫丁香苷的提取工藝進(jìn)行了比較研究。結(jié)果:紫丁香苷的最佳提取工藝為水煎法。

        紫丁香葉;紫丁香苷;提取工藝

        紫丁香葉為木樨科丁香屬紫丁香的干燥葉[1],具有抗菌、消炎、抗病毒和保肝利膽等藥理活性。紫丁香葉含有多種化學(xué)成分,大多以苷的形式存在,其苷元大致可分為羥基苯類、黃酮類、苯丙素類和環(huán)烯醚萜類等。據(jù)調(diào)查顯示,紫丁香葉有很好的應(yīng)用前景和經(jīng)濟(jì)效益,對其有效部位的確定以及深入的研究具有重要的價(jià)值,也為進(jìn)一步的藥效等方面研究奠定基礎(chǔ)。

        1 儀器與材料

        日本島津高效液相色譜儀(SPD-10Avp紫外檢測器;AT-330柱溫箱;浙大N2000工作站);MellterCE240電子天平(上海);UV-2401PC日本島津紫外分光光度計(jì)(北京);HH SY21-Ni4-C水浴鍋(北京中興偉業(yè)儀器有限公司);PTHW型電熱套 (鞏義市英峪予華儀器廠)。紫丁香苷標(biāo)準(zhǔn)品購于中國藥品生物制品檢定所;所用試劑均為分析純;紫丁香葉為2006年9月份采摘的新鮮葉,由長春食品藥品檢驗(yàn)所鑒定。

        2 方法與結(jié)果

        2.1 紫丁香苷的提取方法

        2.1.1 水煎法 取干燥的紫丁香葉100g,加水文火煎煮三次。第1次12倍量水煎2h,后2次加10倍量水,煎1.5h,合并提取液,過濾,濃縮,減壓干燥,得到水煎液的干燥粉末,稱重。同法做三次平行實(shí)驗(yàn),計(jì)算平均得膏率,結(jié)果見表1。

        2.1.2 超聲波法 取干燥的紫丁香葉100g,加10倍量溶劑(水或70%乙醇)超聲提取3次,每次30~40min,合并提取液,過濾,濃縮,減壓干燥,得到超聲水提取物的干燥粉末和超聲乙醇提取物的干燥粉末,稱重。同法做三次平行實(shí)驗(yàn),計(jì)算平均得膏率,結(jié)果見表1。

        2.1.3 不同濃度乙醇回流提取法 分別稱取干燥的紫丁香葉100g,用30%乙醇、50%乙醇、70%乙醇回流提取3次,每次1.5h,溶劑量分別為12倍、10倍、8倍量。合并提取液,過濾,濃縮,減壓干燥,得到乙醇回流提取的干燥粉末,稱重。同法做三次平行實(shí)驗(yàn),計(jì)算平均得膏率,結(jié)果見表1。

        2.2 紫丁香苷的含量測定

        2.2.1 色譜條件 Chmmasil Cl8柱(4.6mm×150mm,5μm);測定波長:265nm;流動相:甲醇-水(20:80);流速:1.0 ml/min,進(jìn)樣量:5μl。

        2.2.2 標(biāo)準(zhǔn)品的制備 精密稱取紫丁香苷標(biāo)準(zhǔn)品1.0mg,置5ml容量瓶中,加甲醇溶解并稀釋至刻度,得到濃度為0.2mg/ml的標(biāo)準(zhǔn)溶液。

        2.2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 分別精密吸取上述標(biāo)準(zhǔn)品溶液2、4、6、8、10、12μl注入液相色譜儀,測定紫丁香苷色譜峰的積分面積。以峰面積為 (Y)為縱坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)品質(zhì)量(mg)為橫坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸,得回歸方程:Y=1090076.1897X+5831.4416(r=0.9997)表明在0.4~2.45μg之間線性關(guān)系良好。

        2.2.4 供試品溶液的制備 分別取上述提取方法得到的干燥粉末1g,25ml甲醇溶解,稱重,超聲30min,補(bǔ)足損失的重量,搖勻過濾,取續(xù)濾液1m l,過0.45μm的微孔濾膜,即得。

        2.2.5 樣品的測定吸取標(biāo)準(zhǔn)品溶液5μl及供試品溶液10μl,分別注入液相色譜儀,測定,計(jì)算紫丁香苷含量,結(jié)果見表1。

        表1 紫丁香苷不同提取方法含量比較

        結(jié)果表明50%乙醇回流提取紫丁香苷含量最高,但是水煎法的含量也很高,與50%乙醇回流提取相差很少,考慮到經(jīng)濟(jì)合理,所以采用水煎法提取紫丁香苷。

        3 討論

        3.1 紫丁香苷流動相的選擇,實(shí)驗(yàn)中嘗試過甲醇-水(20:80),乙腈-水(45:55)[2]為流動相,經(jīng)過比較,以甲醇-水 (20:80)作為選流動相重復(fù)性最佳,出峰時(shí)間較快,峰形尖銳、對稱性好,且對紫丁香苷主峰與雜質(zhì)峰明顯分離。

        3.2 紫丁香葉中的紫丁香苷可能是抗肝炎病毒的主要有效成分,實(shí)驗(yàn)只確定了紫丁香苷的粗提工藝。為了紫丁香葉新藥的進(jìn)一步研究與開發(fā),還應(yīng)對其有效部位繼續(xù)做分離純化及其藥理活性研究。

        [1]孫傳奇.遼寧省中藥資源名錄 [M].遼寧省中藥資源普查辦公室,1987:46.

        [2]Munro Ic.Biological availability of arsenic in fish[A].In Proceedings at the 13th Annual Meeting of Society of toxicology[C].Wahsington,1974:9.

        The Research of Syringoside Content Determ ination Method and Extraction Process from Syringa Leaves

        LIU Cong,JIN Chuan-can,LIU Tian
        Faw General Hospital,Jilin changchun 130011,China

        Objective:Study on the effective component of Syringa leaves to have a better use of the Syringa leaves ofmedicinal resources for the development of Chinesemedicine lay the foundation for new durgs.Methods:Usingmacroporous resin,HPLC and othermethods to stydy its effective components,such as Syringoside.Resu lts:The water reflux is better than othermethods in the extraction of syringoside and flavones.

        Syringa leaves;Syringoside;Extraction methods

        R284.2

        A

        1007-8517(2013)18-0024-02

        2013.06.25)

        劉聰 (1978~),女,吉林松原人,碩士,主治醫(yī)師。

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