王琦

乙型病毒性肝炎, 簡稱乙肝, 是一種由乙型肝炎病毒(HBV)感染機體后引起的疾病［1］。在臨床實踐中, 往往采用血常規(guī)“兩對半”檢查, 乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎病毒表面抗體(抗-HBs)、乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)、乙型肝炎病毒e抗原抗體(抗-HBeAg)、乙型肝炎病毒核心抗體(抗-HBc)［2］, 但是, 常規(guī)的“兩對半”檢測的并不能特異性的診斷乙肝病毒在患者體內(nèi)的復(fù)制及傳染的狀況。本研究對河南省安陽市中醫(yī)院的肝炎病毒患者進行“兩對半”與HBV-DNA定量檢測對比分析, 探討HBV-DNA定量檢測對乙型肝炎病毒活動度及傳染性的狀況。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取本院2011～2012年收治的乙型肝炎患者, 共125例。其中男75例, 女50例；平均年齡為(47.7±6.3)歲。采取患者的血清學(xué)標(biāo)本。其中由血液傳播的人數(shù)為110例,醫(yī)源性傳播的人數(shù)為1例, 母嬰傳播的人數(shù)為2例, 性傳播的人數(shù)為12例。

1.2 方法 ①乙肝兩對半定量檢測：采用CMIA法, 試劑購自美國Abbott公司。儀器為美國Abbott公司生產(chǎn)的Architect i2000 SR全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀。陽性標(biāo)準(zhǔn)：HBsAg>0.11 IU/ml； 抗 -HBsAg>9.99 mIU/ml；HBeAg>0.99 S/CO；抗-HBe>0.99 S/CO；抗-HBc>0.99 S/CO。②HBV-DNA含量：檢測所用儀器系德國Roche公司生產(chǎn)的LightCycler自動熒光PCR儀；HBV-DNA FQ-PCR試劑盒由深圳匹基生物工程公司提供。嚴(yán)格按試劑說明書操作。HBV-DNA<5.0×102copies/ml者為陰性, HBV-DNA>5.0×102copies/ml者為陽性。

1.3 觀察指標(biāo) 對血清學(xué)模型與HBV-DNA定量結(jié)果兩兩比較及e抗原與HBV-DNA定量結(jié)果的比較數(shù)據(jù)處理。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS18.0統(tǒng)計軟件對本次研究所取得的數(shù)據(jù)進行分析, 計數(shù)資料采用χ2檢驗, 計量資料采取t檢驗, 以均數(shù)± 標(biāo)準(zhǔn)差()的形式對數(shù)據(jù)進行表示, 以P<0.05代表差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 HBV-DNA和乙肝兩對半檢測結(jié)果 經(jīng)熒光聚合鏈定量檢測法檢測有80例患者HBV-DNA定量為陽性, 檢出率為64.0%, 其中HbsAg、HbeAg、抗-HBc標(biāo)志物陽性的HBV-DNA的檢出率最高, HbsAg、抗-HBc次之, 抗-HBc最低。實驗結(jié)果見表1。

2.2 e抗原與HBV-DNA定量檢測結(jié)果 e抗原與HBVDNA定量檢測結(jié)果e抗原大于1000模式與e抗原小于1000模式HBV-DNA定量結(jié)果之間, P<0.05, 差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。實驗結(jié)果見表2。

表1 “兩對半”檢測與HBV-DNA檢測對比分析

表2 e抗原與HBV-DNA定量檢測結(jié)果

3 討論

乙型病毒性肝炎是由于乙型肝炎病毒(HBV)感染所致。乙型肝炎病毒(HBV)屬嗜肝DNA病毒科, 基因組長約3.2 kb,為部分雙鏈環(huán)狀DNA［3］。HBV進入機體后, 侵入人體的肝細(xì)胞, HBV進入肝細(xì)胞后, 就會以HBV- DNA為模板進行復(fù)制,合成新的HBV顆粒并釋放入血液。同時可激起機體的免疫反應(yīng), 從而產(chǎn)生不同的血清免疫學(xué)標(biāo)志物。目前認(rèn)為乙肝的發(fā)病機制與機體的免疫應(yīng)答密切相關(guān)。患者常常表現(xiàn)為體力不支、疲憊、沒精神、食欲不振、厭油、惡心、腹脹、黃疸等。

現(xiàn)今我國臨床上常采用“兩對半”檢測方法進行對乙型病毒性肝炎的檢測, 其中HBeAg是臨床判定乙型肝炎病毒的復(fù)制情況, 是判斷患者乙型肝炎的病情狀況及其患者的傳染狀況的重要指標(biāo)之一。但在臨床實踐過程中, 往往會出現(xiàn)HBeAg陰性患者乙肝病毒的復(fù)制仍存在且復(fù)制程度并未減弱。經(jīng)過研究發(fā)現(xiàn), 出現(xiàn)此種現(xiàn)象, 是由于在HBeAg陰性的慢性乙型肝炎患者中, HBV基因前C區(qū)或是CP區(qū)變異, 導(dǎo)致HBeAg合成障礙。因此, HBeAg陰性并不能作為HBV復(fù)制終止或是減弱的判斷依據(jù)。此時, 對乙肝病毒的DNA定量檢測可確切地反映乙型肝炎病毒活動度及傳染性狀況。

用于乙肝病毒基因檢查的方法主要有：熒光PCR法、競爭PCR法、PCR酶聯(lián)免疫吸附法、熒光標(biāo)記法和PCR酶聯(lián)化學(xué)發(fā)光等方法。這些方法可以對HBV-DNA進行定量,對診斷病毒復(fù)制與否及判斷抗病毒治療的療效均有價值。但這些方法各有優(yōu)缺點, 所使用的儀器設(shè)備、試劑品質(zhì)源于不同的國家和地區(qū), 設(shè)立的標(biāo)準(zhǔn)曲線以及標(biāo)準(zhǔn)熒光等各不相同,得出的數(shù)值左右漂浮, 偏差很大, 得出的檢測范圍也不相同。本次實驗檢測所用儀器系德國Roche公司生產(chǎn)的LightCycler自動熒光PCR儀；HBV-DNA FQ-PCR試劑盒由深圳匹基生物工程公司提供。檢測標(biāo)準(zhǔn)為HBV-DNA<5.0×102copies/ml者為陰性, HBV-DNA>5.0×102copies/ml者為陽性。

本組實驗結(jié)果為：經(jīng)熒光聚合鏈定量檢測法檢測有80例患者HBV-DNA定量為陽性, 檢出率為64.0%, 經(jīng)過數(shù)據(jù)處理, 將實驗“兩對半”與HBV-DNA定量檢測結(jié)果相比較。其中HbsAg、HbeAg、抗-HBc標(biāo)志物陽性的HBV-DNA的檢出率最高, HbsAg、抗-HBc次之, 抗-HBc最低。由此可推斷, HBV-DNA與“兩對半”檢測相關(guān)聯(lián), 能有效的反映HBV在人體的復(fù)制狀況, 能給HBV防治工作提供確鑿的數(shù)據(jù), 給臨床診治帶來了巨大的幫助。

綜上所述, HBV-DNA與病毒感染和活動性復(fù)制有密切關(guān)系, 對進一步全面了解乙型肝炎病毒的復(fù)制和傳染性及不同臨床類型肝炎患者的輔助診斷具有一定的臨床意義, 可作為判斷HBV感染者病毒是否有活動和較大傳染性的新標(biāo)志,是乙型肝炎早期診斷、療效評估的可靠指標(biāo)。

［1］翁彬,王雷萍,方紅輝.乙型肝炎病毒前S1蛋白與HBV-DNA及HBeAg相關(guān)性分析.廣東醫(yī)學(xué), 2006,27(6):884.

［2］唐永明,許為民.慢性乙型病毒性肝炎中HBV-DNA含量與IL-17/IL-18及前s2抗體水平的關(guān)系.現(xiàn)代檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2006,21(6):13.

［3］王中興,朱小瓊,李敬元.乙型肝炎病毒前s1蛋白、前s2蛋白、乙型肝炎病毒DNA和乙型肝炎病毒標(biāo)志物的檢測及其意義.臨床薈萃, 2006,21(16):1203.