張立霞 楊 靜 倪艷波 李長(zhǎng)城 邵一葉

(濱州醫(yī)學(xué)院，山東 煙臺(tái) 264003)

治療高血壓藥物的安全性及其副作用已成為重要問(wèn)題。近年來(lái)，人們希望得到有效且安全、副作用小的抗高血壓藥物?；覙?shù)花又名貝葉多孔菌，是一種珍惜的食藥兩用菌。灰樹(shù)花多糖的免疫增強(qiáng)功能已經(jīng)獲得了廣泛的認(rèn)可，據(jù)相關(guān)報(bào)道，灰樹(shù)花多糖還有抗HIV病毒，調(diào)節(jié)血糖、血脂、膽固醇水平〔1～4〕，抗氧化和防衰老的作用〔5，6〕，有的研究已經(jīng)將其作為抗癌藥物應(yīng)用于臨床〔7，8〕。可顯著抑制血壓、血脂和體重的增加，但后對(duì)于灰樹(shù)花對(duì)高血壓的影響的報(bào)道極少。本研究通過(guò)對(duì)高血壓大鼠血壓的檢測(cè)及其心臟、腎臟形態(tài)結(jié)構(gòu)、超微結(jié)構(gòu)的觀察，發(fā)現(xiàn)灰樹(shù)花多糖對(duì)高血壓導(dǎo)致的大鼠心臟、腎臟的損傷有保護(hù)作用。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 體重180～200 g的雌性SD大鼠，由濱州醫(yī)學(xué)院動(dòng)物中心提供。

1.2 主要藥品及儀器 灰樹(shù)花多糖，由浙江方格藥業(yè)有限公司;硝苯地平，10 mg/片，由山西太原藥業(yè)有限公司提供;BP-6無(wú)創(chuàng)血壓測(cè)試儀，成都泰盟科技有限公司;BX51生物顯微鏡，奧林巴斯株式會(huì)社;JEM1400透射電子顯微鏡，日本電子。

1.3 動(dòng)物模型的制備 參照文獻(xiàn)〔9〕方法，加以改進(jìn)。取3周齡的SD大鼠(體重在180～200 g)，適應(yīng)性喂養(yǎng)1 w后，除對(duì)照組外各組給予高鹽顆粒飼料(含8%氯化鈉)，飲用含0.85%氯化鈉的自來(lái)水，BP-6無(wú)創(chuàng)血壓測(cè)試儀2次/w進(jìn)行血壓檢測(cè)飼養(yǎng)4 w后血壓明顯升高并穩(wěn)定，血壓穩(wěn)定1 w(成模后，正常飲食)開(kāi)始實(shí)驗(yàn)，灌胃給藥4 w，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中予以正常飲食。

1.4 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分為對(duì)照組(1 ml/100 g生理鹽水)、硝苯地平組(0.005 g/kg)、模型組、灰樹(shù)花多糖低(0.075 g/kg)、中(0.100 g/kg)、高劑量組(0.150 g/kg)，每組10只。

1.5 動(dòng)物取材、觀察 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物取材后多聚甲醛固定，石蠟包埋，切片，HE染色觀察心臟、腎臟形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)的變化;透射電子顯微鏡標(biāo)本按照其要求取材、固定、包埋、切片、染色，觀察心臟、腎臟超微結(jié)構(gòu)的變化。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS13.0軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 灰樹(shù)花多糖對(duì)大鼠收縮壓的影響 高鹽飲食4 w后，除對(duì)照組外，各組收縮壓都顯著升高(P＜0.01)且穩(wěn)定。灌胃給藥灰樹(shù)花多糖高、中、低劑量4 w后，與模型組相比，三組血壓顯著下降(P＜0.01);且灰樹(shù)花多糖高、中、低劑量組之間收縮壓下降水平無(wú)顯著性差異(P＞0.05);灌胃給藥硝苯地平4 w后與模型組相比，硝苯地平組血壓顯著下降(P＜0.01)，且其血壓下降水平與灰樹(shù)花高、中、低劑量組有差異，但不明顯(P＞0.05)。見(jiàn)表1。

表1 各組大鼠收縮壓變化，mmHg，n=10)

表1 各組大鼠收縮壓變化，mmHg，n=10)

與模型組比較:1)P＜0.01

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2.2 組織形態(tài)觀察 HE染色后觀察發(fā)現(xiàn)，模型組心臟、腎臟損傷嚴(yán)重。心臟中、小血管壁增厚，心肌細(xì)胞腫脹，部分區(qū)域可見(jiàn)炎性細(xì)胞浸潤(rùn);腎臟皮質(zhì)部分腎小球腫脹，囊腔消失，腎小體失去正常結(jié)構(gòu)，可見(jiàn)大片腎小體形態(tài)改變的區(qū)域性。灰樹(shù)花多糖各組及硝苯地平組心臟、腎臟在形態(tài)學(xué)損傷較模型組為輕，心臟亦可見(jiàn)心內(nèi)中、小血管壁增厚，但增厚程度較模型組有所減輕，未見(jiàn)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)及心肌細(xì)胞腫脹區(qū)域;腎臟皮質(zhì)部分損傷減輕，特別是灰樹(shù)花多糖高劑量組，腎皮質(zhì)中未見(jiàn)成片損傷的腎小體。見(jiàn)圖1，圖2。

圖1 各組大鼠心臟組織形態(tài)觀察(HE，×400)

圖2 各組大鼠腎臟組織形態(tài)觀察(HE，×400)

2.3 電子顯微鏡觀察 電子顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)，模型組心臟、腎臟超微結(jié)構(gòu)損害較重。心臟超微結(jié)構(gòu)可見(jiàn)，模型組線粒體排列不規(guī)則，部分區(qū)域線粒體增多，聚集?；覙?shù)花多糖各組及硝苯地平對(duì)照組線粒體增生情況較模型組輕，線粒體與肌纖維的排列也較規(guī)則。模型組的腎臟超微觀察可見(jiàn)，腎小球部分區(qū)域可見(jiàn)基底膜增厚，厚薄不均勻，足突融合，系膜插入-系膜細(xì)胞增生，插入至血管內(nèi)皮細(xì)胞與基底膜之間?；覙?shù)花多糖各組及硝苯地平對(duì)照組亦可見(jiàn)少量的基底膜厚薄不均勻，及足突融合，但其程度及范圍均較模型組有所減輕。見(jiàn)圖3，圖4。

圖3 各組大鼠心臟超微結(jié)構(gòu)

圖4 各組大鼠腎臟超微結(jié)構(gòu)

3 討論

高血壓是一種以動(dòng)脈血壓持續(xù)升高為主要表現(xiàn)的慢性疾病，常引起心臟、腦、腎臟等重要器官的病變并出現(xiàn)相應(yīng)的后果。本研究發(fā)現(xiàn)經(jīng)過(guò)長(zhǎng)達(dá)4 w的高鹽飲食可以導(dǎo)致大鼠血壓升高并穩(wěn)定，引起心臟、腎臟的器質(zhì)性病變?；覙?shù)花多糖可以對(duì)高血壓心臟、腎臟的病理學(xué)變化起到一定的保護(hù)作用，其效果與陽(yáng)性對(duì)照組藥物相似，甚至在對(duì)腎臟的保護(hù)作用上，大劑量的灰樹(shù)花多糖組優(yōu)于硝苯地平對(duì)照藥物組。

心臟在高血壓的早期變化主要為心內(nèi)中、小血管的管壁增厚。研究發(fā)現(xiàn)灰樹(shù)花多糖可以使心臟損傷情況得到改善。

腎臟對(duì)高血壓極為敏感，其損傷較重，部分腎小體失去其正常的生理結(jié)構(gòu)，這些損傷的腎小體呈局域性出現(xiàn)，部分區(qū)域的腎小體結(jié)構(gòu)仍為正常的。本研究結(jié)果提示灰樹(shù)花多糖在超微結(jié)構(gòu)上看其對(duì)高血壓大鼠腎臟損傷的保護(hù)作用優(yōu)于硝苯地平。較大劑量的灰樹(shù)花多糖對(duì)高血壓心臟、腎臟的保護(hù)作用有可能因?yàn)槠淇梢暂^好的降低血壓，以致因高血壓引起的心臟腎臟損傷不再加重;亦有可能因?yàn)槠淠芨纳菩呐K、腎臟因高血壓引起的損害，以達(dá)到保護(hù)心臟、腎臟的作用，具體機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

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