郭艷茹

(唐山市工人醫(yī)院，河北 唐山 063000)

肺鱗癌多見于男性，其病變進展快，預后不良。手術治療是重要方法，術后化療有重要價值。腫瘤進展過程中，多種蛋白發(fā)生明顯的改變，對腫瘤起重要促進作用〔1〕。體內外研究表明由藥物轉運蛋白介導的藥物外排增加是肺鱗癌耐藥的主要機制，目前發(fā)現(xiàn)的藥物轉運蛋白主要是ABC轉運蛋白家族的MRP1和BCRP，二者表達與腫瘤進展有明顯的作用〔2，3〕。本實驗應用免疫組織化學技術檢測肺鱗癌中MRP1和BCRP的表達，探討MRP1和BCRP表達及預后價值。

1 材料與方法

1.1 臨床材料 我院在2005年1月至2005年12月行肺鱗癌手術切除術后的患者89例，其中男60例，女29例，年齡56～79〔平均(65.4±6.5)〕歲。留取術后的蠟塊組織及完整臨床資料作為觀察組。納入標準:①符合2008年WHO中關于肺鱗癌的診斷標準;②病理學醫(yī)師再次行HE切片并閱片確認。排除標準:①術前行化療或放療的患者;②伴有肺癌其他類型的患者;③其他器官的鱗癌轉移到肺的患者。選擇上述患者手術切端并經(jīng)病理醫(yī)師證實為正常的肺組織作為對照組。

1.2 免疫組織化學方法 所有標本均經(jīng)10%中性甲醛固定，切片后進行MRP1和BCRP的檢測，均應用免疫組化SP法，DAB染色。MRP1和BCRP抗體的濃縮液均購自北京中杉金橋公司，由病理技師進行稀釋，選擇最佳配比濃度。對實驗過程全程監(jiān)控，避免不必要的誤差出現(xiàn)。

1.3 免疫組化結果的判讀 MRP1和BCRP蛋白的表達結果均由病理主治醫(yī)師進行判讀。MRP1和BCRP蛋白均定位于細胞膜和(或)細胞質中，棕黃色為陽性結果，計數(shù)10個染色密集的腫瘤區(qū)域，計算陽性率，取平均值定為陽性率。以陽性率＜25%為陰性，以陽性率≥25%為陽性。

1.4 統(tǒng)計處理 應用SAS6.12軟件進行χ2檢驗、相關性分析和生存分析。

2 結果

2.1 兩組MRP1和BCRP表達的比較 與對照組比較，觀察組中MRP1和BCRP高表達(P＜0.001)。見表1。

2.2 觀察組中MRP1和BCRP的表達與臨床病理特征的關系觀察組中MRP1和BCRP的表達均與腫瘤分化程度、胸膜侵犯、淋巴結轉移、Ki67的表達及臨床分期密切相關(P＜0.05)。見表2。

2.3 MRP1和BCRP在觀察組的表達關系 經(jīng)線性相關分析顯示，肺鱗癌中MRP1和BCRP的表達未見明顯相關性(P=0.311 3)。

2.4 觀察組中MRP1和BCRP的表達與預后的關系 隨訪時間4～60個月，經(jīng)生存分析顯示，觀察組中MRP1的表達與預后相關，而BCRP的表達與預后無明顯的相關性。即肺鱗癌中MRP1高表達患者的預后差。

表1 觀察組和對照組中MRP1和BCRP陽性表達的比較〔n=89，n(%)〕

表2 觀察組中MRP1和BCRP的陽性表達與臨床病理特征的關系〔n(%)〕

3 討論

肺鱗癌在病變進展過程中，生物學行為的評估至關重要。引起生物學行為改變的是多種基因和蛋白，其不僅與預后相關，也與腫瘤治療中出現(xiàn)的耐藥有密切關系。多藥耐藥蛋白在腫瘤進展中可有明顯的促進作用〔4，5〕。BCRP途徑為一種新的ABC轉運蛋白，含有633個氨基酸殘基，也具有將化療藥物如米托蒽醌、多柔比星等從腫瘤細胞泵出的功能。也有研究認為BCRP表達的腫瘤細胞對米托蒽醌、阿霉素、柔紅霉素等均產(chǎn)生交叉耐藥，但是對長春堿、紫杉醇和順鉑敏感，因此可以作為臨床用藥的依據(jù)〔6，7〕。MRP1也是 ABC 家族的成員，劉欣燕等〔8〕認為MRP1有兩種主要功能:①位于細胞膜發(fā)揮化療藥物外排的作用;②位于細胞質內產(chǎn)生囊泡包裹藥物，起隔離作用，避免藥物損傷細胞核。MRP1還可以對一些具有生物活性的重要有機陰離子共扼結合物的分泌起關鍵作用，主要是以GSH、葡萄糖醛酸和硫酸鹽有機陰離子共扼結合物的形式產(chǎn)生〔9〕。在肺組織中，合成MRP1后經(jīng)高爾基體加工，再運輸?shù)郊毎|和細胞膜表面產(chǎn)生排泌功能。

本實驗顯示MRP1和BCRP高表達對腫瘤進展有一定影響。MRP1和BCRP雖然均為耐藥相關的蛋白，但是其作用的通路并不一致。MRP1在肺鱗癌中是多元性作用的蛋白，對腫瘤的進展及預后均有意義，而BCRP對腫瘤進展有促進作用，與預后無關，因此其在腫瘤中的功能可能更少。MRP1和BCRP均具有將識別的化療藥泵出細胞的作用，因此對藥物選擇性的應用可以提供理論支持。但是由于腫瘤耐藥形成過程中常是多因素的綜合作用，而且可以在不同機制的通路中出現(xiàn)協(xié)同作用，使腫瘤的生物學行為和治療變得更復雜。

1 張桂香，劉新蘭，李金平.MDR1、BCRP和LRP基因在乳腺癌組織中的表達及其意義〔J〕.西安交通大學學報(醫(yī)學版)，2012;33(1):79-83.

2 叢芳圓，崔 潔，劉新蘭，等.P-gp、BCRP、LRP在乳腺 癌組織中的表達及其意義〔J〕.寧夏醫(yī)科大學學報，2010;32(5):589-92.

3 杜方兵，梅小冬.多藥耐藥相關蛋白2及其在腫瘤耐藥中的研究進展〔J〕.現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學，2008;16(3):478-80.

4 郝 軍，王 妍，李慶昌，等.MRP在非小細胞肺癌和正常肺組織中的表達及其預后意義的研究〔J〕.中國肺癌雜志，2005;8(1):32-5.

5 李小琴，李 堅，陳 萍，等.膜轉運蛋白基因在非小細胞肺癌中的表達及預后意義〔J〕.南京醫(yī)科大學學報(自然科學版)，2008;28(9):1150-3.

6 王 蓓，徐熙善，駱健生，等.乳腺癌耐藥蛋白在癌組織中的表達及臨床意義〔J〕.中國癌癥雜志，2006;16(1):58-62.

7 劉新蘭，黃 英，李云霞，等.耐藥蛋白P-gp、BCRP及LRP在乳腺癌原發(fā)灶和腋窩淋巴結轉移灶中表達的比較〔J〕.第二軍醫(yī)大學學報，2011;32(11):1171-3.

8 劉欣燕，張書敏，邢秋月，等.非小細胞肺癌P-gp、LRP、MRP和GST-Ⅱ表達及其臨床意義〔J〕.現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學，2009;17(8):1444-6.

9 羅文軍，易永芬，于冬青，等.大腸癌組織中肺耐藥蛋白和多藥耐藥相關蛋白的表達及臨床病理意義〔J〕.重慶醫(yī)科大學學報，2004;29(6):769-73.