張瑩，李春曉，段雪艷，劉穎，寧美英（.國家人口計生委科學(xué)技術(shù)研究所，藥物和醫(yī)用材料研究中心，北京 0008；.北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院研究生院，北京 00730）

屈螺酮（drospirenone）是藥理學(xué)特性最接近天然孕酮的新型孕激素，由于其兼具獨特的抗鹽皮質(zhì)激素和抗雄激素活性，口服避孕不但避孕效果可靠，還有其他口服避孕藥不具備的健康益處，包括控制體質(zhì)量、治療經(jīng)前期緊張綜合征、改善女性痤瘡和皮膚等，并且對血脂和血壓具有積極影響，具有很好的臨床應(yīng)用價值和市場前景，其與炔雌醇組成的復(fù)方口服避孕藥Yasmin已成為全球口服避孕藥的新寵［1］。由于短效口服避孕藥需每天不間斷服藥，否則會明顯影響其避孕效果。因此，我們將其制備成緩控釋給藥系統(tǒng)，旨在提高服藥順應(yīng)性。

緩控釋給藥系統(tǒng)中陰道藥環(huán)（intravaginal ring）近年來受到極大關(guān)注，除了能使藥物緩慢、恒定釋放，減少給藥次數(shù)，血藥濃度平穩(wěn)，減少不良反應(yīng)的發(fā)生等優(yōu)點外，陰道藥環(huán)可取放自給，不需要專業(yè)醫(yī)護人員的參與，使用依從性高［2－3］。

本課題組前期已制備了屈螺酮控釋硅橡膠陰道環(huán)，該陰道環(huán)能夠持續(xù)21d控釋藥物，每日釋放劑量約為0.5mg。為滿足后期隨藥效結(jié)果進行處方調(diào)整的需求，需要把握影響藥物釋放的關(guān)鍵因素，研究中發(fā)現(xiàn)，將屈螺酮與聚維酮制備成固體分散體后再壓制成硅橡膠陰道環(huán)，可以有效提高藥物的日釋放劑量（約1.0mg）。本文介紹固體分散體陰道環(huán)制備及釋放結(jié)果的同時，采用HPLC法測定有關(guān)物質(zhì)來重點考察原輔料相容性，從而為屈螺酮控釋陰道環(huán)的進一步研發(fā)提供重要信息和科學(xué)依據(jù)。

1 材料

Waters2695型高效液相色譜儀（Waters公司）；YG120藥物光照試驗箱（上海實驗儀器廠有限公司）；X（S）K－160煉膠機（上海雙翼橡塑機械有限公司）；QLB－25D／Q平板硫化機（上海雙翼橡塑機械有限公司）。

屈螺酮原料藥（批號20101203，北京紫竹天工科技有限公司）；硅橡膠（批號0005308947，醫(yī)用級，美國道康寧公司）；聚維酮（PVPK30，批號G81907PTO，北京鳳禮精求貿(mào)易有限公司）；十二烷基磺酸鈉（SDS，批號L5750，分析純，美國Sigma公司）；乙腈（批號20100728，色譜純，天津市西華特種試劑廠）；無水乙醇（批號20070807，分析純，北京化學(xué)試劑公司）；實驗用水為自制超純水。

2 方法與結(jié)果

2.1 原輔料相容性試驗 參照藥品技術(shù)指導(dǎo)原則［4］有關(guān)規(guī)定進行原輔料相容性試驗。將屈螺酮與PVPK30、硅橡膠分別以1∶2和1∶10質(zhì)量比進行混合，取一定量，照藥物穩(wěn)定性指導(dǎo)原則中影響因素的實驗方法，分別在強光（4 500±500）Lx、高溫（60℃）、高濕（相對濕度90%±5%）的條件下放置10d，HPLC方法檢查放置前后有關(guān)物質(zhì)有無變化，同時觀察外觀、色澤等藥物性狀的變化，結(jié)果見表1～3，色譜圖見圖1～3。

表1 強光照條件下的原輔料相容性試驗結(jié)果（%）Tab 1 The results of API－excipients compatibility testing under strong light（%）

表2 高溫條件下的原輔料相容性試驗結(jié)果（%）Tab 2 The results of API－excipients compatibility testing under high temperature（%）

表3 高濕條件下的原輔料相容性試驗結(jié)果（%）Tab 3 The results of API－excipients compatibility testing under high humidity（%）

圖1 屈螺酮原料藥高效液相掃描圖譜Fig 1 HPLC scanning pattern of drospirenone

圖2 屈螺酮原料藥與PVP混合物高效液相掃描圖譜Fig 2 HPLC scanning pattern of drospirenone and PVPK30

圖3 屈螺酮原料藥與硅橡膠混合物高效液相掃描圖譜Fig 3 HPLC scanning pattern of drospirenone and silicone rubber

有關(guān)物質(zhì)檢測色譜條件：以十八烷基鍵合硅膠為填充劑，以水、乙腈分別為流動相的A組分和B組分進行80min的梯度洗脫，流程見表4，流速為1.5mL·min－1，進樣體積10μL，檢測波長245nm。

表4 屈螺酮的HPLC梯度洗脫流程Tab 4 The gradient elution process for HPLC of drospirenone

取屈螺酮原料藥組及屈螺酮與PVPK30混合物組各樣品適量，以乙腈－水（1∶1）的混合溶液為溶劑稀釋到2mg·mL－1作為供試品；采用百分比對照法計算雜質(zhì)比例。

屈螺酮與硅橡膠的混合物需在25℃下提取24 h，經(jīng)試驗測定提取效率為82%，取適量混合物進行提取后作為供試品，采用百分比對照法計算雜質(zhì)比例。

圖1為屈螺酮原料藥、高溫處理原料藥和強光處理原料藥的HPLC圖譜。由圖譜可見，屈螺酮原料藥經(jīng)高溫和強光照射處理后未有明顯的新雜質(zhì)峰（＞0.1%）產(chǎn)生，總雜質(zhì)峰面積沒有明顯變化，表明高溫和強光照射對屈螺酮原料藥無明顯影響。

圖2和圖3為屈螺酮原料藥與擬選輔料PVPK30及硅橡膠混合后經(jīng)光照、高溫及高濕處理后的HPLC圖譜，由圖譜可見，屈螺酮原料藥與輔料PVPK30和硅橡膠混合物在經(jīng)光照、高溫及高濕條件處理后變化趨勢與原料藥一致，無明顯新雜質(zhì)峰產(chǎn)生，總雜質(zhì)峰面積無明顯變化，表明PVPK30和硅橡膠對屈螺酮原料藥的穩(wěn)定性和質(zhì)量無明顯影響。

2.2 屈螺酮陰道環(huán)的制備及體外釋放度評價

2.2.1 陰道環(huán)的制備 稱取屈螺酮原料藥200mg，與適量硅橡膠混煉10min，熱壓硫化，硫化溫度130℃，硫化時間10min，制備成骨架型屈螺酮陰道環(huán)。在骨架型屈螺酮陰道環(huán)外包裹一層厚度為1 mm的硅橡膠膜于模具中進行二次硫化成型，制備得到包膜型屈螺酮陰道環(huán)。

稱取屈螺酮原料藥200mg，以PVP為載體材料，按照質(zhì)量比1∶1，采用溶劑法制備屈螺酮－PVP固體分散體，按照上述步驟與適量硅橡膠混煉，硫化制備包膜型PVP固體分散體屈螺酮陰道環(huán)。

2.2.2 陰道環(huán)體外釋放試驗 量取200mL 0.3%SDS溶液于250mL溶出杯中，用細尼龍絲將自制的屈螺酮陰道環(huán)固定在溶出儀的攪拌槳上，水浴溫度（37.0±0.5）℃，以50r·min－1的轉(zhuǎn)速旋轉(zhuǎn)，每24小時取樣并更換介質(zhì)溶液，樣品用0.45μm的微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液于269nm波長處進行紫外檢測。結(jié)果如圖4所示，考察時間為21d。

圖4 屈螺酮陰道環(huán)體外釋放曲線—●—屈螺酮；—○—屈螺酮陰道環(huán)Fig 4 Release profile of vaginal ring containing drospirenone in vitro in 21d—●—capsulated drospirenone IVR；—○—capsulated drospirenone－PVP IVR

由圖4可見，制備的包膜型PVP固體分散體屈螺酮陰道環(huán)相較包膜型屈螺酮陰道環(huán)體外釋放量明顯增大，從第5～21天釋放基本平穩(wěn)，每日釋放量達到1.0mg左右。

3 討論

固體分散體（solid dispersion，SD）是指將藥物高度分散于固體載體中形成的一種以固體形式存在的分散系統(tǒng)，由于其能夠顯著地增加難溶性藥物的溶出，并可根據(jù)需要制備具有緩釋控釋功能的制劑，因而，一直受到藥學(xué)界的廣泛重視。聚乙烯基吡咯烷酮是固體分散體常用的載體，本實驗應(yīng)用溶劑法將屈螺酮與聚維酮制備成固體分散體后壓制成陰道環(huán)制劑，參照本實驗室前期溶出度測定方法進行釋藥檢測，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與包膜型屈螺酮陰道環(huán)相比，其每日釋放量從0.5mg提高至1.0mg，提示增加原料藥的水溶性能夠明顯提高陰道環(huán)制劑的體外釋放度。

設(shè)計制備一個有效、安全和穩(wěn)定的藥物制劑，必須首先進行處方前研究。藥物制劑處方前研究（pharmaceutical preformulation studies）是指在設(shè)計制劑處方前對藥物的一系列的物理性質(zhì)、化學(xué)性質(zhì)和制劑性質(zhì)的了解、分析、利用或改進。所獲資料和數(shù)據(jù)可作為處方設(shè)計和產(chǎn)品開發(fā)中選擇最佳劑型、工藝和質(zhì)量控制的依據(jù)。藥物與輔料的相互作用結(jié)果對處方的擬定非常重要，它可為處方中的輔料的選擇提供依據(jù)，常用的研究方法有［5－7］：外觀觀察法、TLC法、HPLC法、DSC法、漫反射法、水中懸浮法等。本研究參照美國藥典［8］采用HPLC梯度洗脫法觀察雜質(zhì)變化來考察藥物和輔料的相互作用，輔以外觀觀察法檢查樣品的外觀、色澤和性狀，結(jié)果表明經(jīng)高溫、高濕、強光照射處理后，輔料PVPK30和硅橡膠對屈螺酮原料藥的穩(wěn)定性和質(zhì)量無明顯影響，表明原輔料相容性良好，為屈螺酮控釋陰道環(huán)的進一步研究提供重要信息和科學(xué)依據(jù)。

［1］周靜，雷貞武.新型短效復(fù)方口服避孕藥—屈螺酮炔雌醇片［J］.中國計劃生育學(xué)雜志，2009，164（6）：371－373.

［2］周菊賢，劉曉璦.新型非口服激素避孕方式的研究進展［J］.國際生殖健康與計劃生育雜志，2009，28（4）：245－248.

［3］Fine PM，Tryqqestad J，Meyers NJ，et al.Safety and acceptability with the use of a contraceptive vaginal ring after surgical or medical abortion［J］.Contraception，2007，5（75）：367－371.

［4］國家食品藥品監(jiān)督管理局.中藥、天然藥物制劑研究技術(shù)指導(dǎo)原則［M］.2003.

［5］魏樹禮，李凡.漫反射光譜法和線性變溫法和線性變溫法在研究抗壞血酸穩(wěn)定性中的應(yīng)用［J］.醫(yī)藥工業(yè)，1983，7：13－16.

［6］Signore EC，Dellutri A，Salvo AD，et al.Compatibility study between cherbulerol and tablet excipients using defferent scanning calorimetry［J］.Drug Dev Ind Pharm，1986，12（4）：603－620.

［7］Botha SA，Loffer AP.Compatibility study between ketoprofen and tablet excipients using different scanning calorimetry［J］.Drug Dev Ind Pharm，1989，15（3）：415－426.

［8］United States Pharmacopoeia［S］.32－NF27.2011.2220.