李 旺，劉永磊，孫二剛，程傳紅

（1.河南科技大學(xué)宏翔發(fā)酵飼料實(shí)驗(yàn)室，河南 洛陽 471003；2.河南宏翔生物科技有限公司，河南 汝州 467500）

乳酸菌是一類可以分解糖類產(chǎn)生乳酸的菌類總稱，是應(yīng)用最早、最廣泛的添加劑之一。乳酸菌包括乳酸桿菌屬、雙歧桿菌屬、腸球菌屬和片球菌屬等，以乳酸桿菌屬最為常見。作為一種微生物制劑主要依靠數(shù)量優(yōu)勢抑制病原菌，維持體內(nèi)微生態(tài)平衡[1-2]。乳酸桿菌以某種免疫調(diào)節(jié)因子的形式起作用，刺激腸道某種局部型免疫反應(yīng)，提高機(jī)體抗體水平或巨噬細(xì)胞的活性，增強(qiáng)機(jī)體免疫功能；芽孢桿菌能促進(jìn)腸道相關(guān)淋巴組織，使之處于高度反應(yīng)的“準(zhǔn)備狀態(tài)”，同時(shí)使免疫器官的發(fā)育增快，免疫系統(tǒng)的成熟快而早，T、B淋巴細(xì)胞的數(shù)量增多，動(dòng)物的體液和細(xì)胞免疫水平提高，增強(qiáng)機(jī)體抗病能力。同時(shí)能夠刺激動(dòng)物產(chǎn)生干擾素，提高免疫球蛋白濃度和巨噬細(xì)胞活性，增強(qiáng)機(jī)體體液和細(xì)胞免疫功能，防止疾病的發(fā)生[3-4]。本試驗(yàn)研究了肉雞日糧添加乳酸桿菌對(duì)其免疫器官的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

乳酸菌從成年雞小腸篩選并鑒定，實(shí)驗(yàn)室保存，灌服之前活化至1×1010cfu·mL-1。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)選用1日齡AA肉仔雞96只，隨機(jī)分為4組，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)8只雞。對(duì)照組每10日灌服無菌培養(yǎng)液（MRS）400μL，試驗(yàn)1組每10日口腔灌乳酸菌菌液200μL+無菌培養(yǎng)基200μL，試驗(yàn)2組口腔灌服菌液300μL+無菌培養(yǎng)基100μL，試驗(yàn)3組口腔灌服菌液400μL。整個(gè)飼養(yǎng)過程無免疫，飼料為普通肉仔雞全價(jià)料，自由采食，自由飲水。

1.3 試驗(yàn)日糧

試驗(yàn)日糧組成及營養(yǎng)水平見表1，前期為顆粒料，后期為粉料。

表1 日糧組成及營養(yǎng)水平

1.4 檢測指標(biāo)

20和40 d，每處理隨機(jī)選取3只雛雞進(jìn)行宰殺，分離胸腺、法氏囊和脾臟，觀察各器官的健康情況（大小、顏色），并測定其重量、尺寸及血液免疫球蛋白的含量等。

1.5 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件Oneway ANOVA方法進(jìn)行方差分析，結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示。

2 試驗(yàn)結(jié)果

2.1 不同濃度乳酸菌對(duì)20日齡肉雞免疫器官的影響

不同濃度乳酸菌對(duì)20日齡肉雞免疫器官的影響見表2。

表2 不同濃度乳酸菌對(duì)20日齡肉雞免疫器官的影響

由表2可知，各組肉雞飼養(yǎng)至20日齡，每重復(fù)取3只肉雞屠宰，分離免疫器官，進(jìn)行重量和尺寸測定。測定結(jié)果顯示，各組內(nèi)免疫器官指標(biāo)差異不顯著，且標(biāo)準(zhǔn)差較小，反應(yīng)了組內(nèi)肉雞的免疫器官發(fā)育整齊度較好，各組間免疫器官差異均不顯著（P＞0.05）。結(jié)果表明，添加不同濃度的乳酸菌對(duì)20日齡肉雞的免疫器官影響不顯著。

2.2 不同濃度乳酸菌對(duì)40日齡肉雞免疫器官的影響

不同濃度乳酸菌對(duì)40日齡肉雞免疫器官的影響見表3。

表3 不同濃度乳酸菌對(duì)40日齡肉雞免疫器官的影響

由表3可知，第2組法氏囊重與第1、3、4組相比差異顯著（P＜0.05）；第3、4組法氏囊指數(shù)與第2組相比差異顯著（P＜0.05）；第3、4組脾臟直徑與對(duì)照組相比差異顯著（P＜0.05）。其他各指標(biāo)在各組之間無顯著性差異（P＞0.05）。結(jié)果表明，飼養(yǎng)至40 d時(shí)，灌服乳酸菌對(duì)免疫器官發(fā)育有一定影響。

3 討論

國內(nèi)外大多數(shù)關(guān)于乳酸菌與免疫器官的研究結(jié)果都為促進(jìn)作用，且存在顯著差異。曾炯等證明，乳酸桿菌可使15日齡AA肉雞脾臟、法氏囊、胸腺指數(shù)分別提高52%、88%和44%[5]。張春揚(yáng)等報(bào)道，益生菌劑能顯著提高AA肉雞免疫器官的生長發(fā)育，28 d時(shí)提高脾臟、法氏囊、胸腺指數(shù)分別可達(dá)47%、42%、63%[6]。張磊等研究微生態(tài)制劑對(duì)肉仔雞生產(chǎn)性能和免疫功能的影響，高劑量添加微生態(tài)制劑對(duì)免疫器官的發(fā)育作用顯著（P＜0.05），法氏囊指數(shù)、胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)與對(duì)照組相比差異均顯著（P＜0.05）；低劑量添加微生態(tài)制劑對(duì)免疫器官的發(fā)育刺激作用不顯著（P＞0.05），僅胸腺指數(shù)差異顯著（P＜0.05）[7]。

本試驗(yàn)的添加量沒有按照常規(guī)添加劑的添加辦法，而是采用灌服的方式進(jìn)行，可能會(huì)導(dǎo)致濃度不足，使各組之間表現(xiàn)的差異不顯著。另一種可能性是性別的影響。公雞生長較快，而免疫器官也比同日齡母雞的大且重。如脾臟是機(jī)體最大的免疫器官，但其受畜禽性別的影響就很大，母禽體重約3 g，公禽體重約4.5 g。乳酸菌可以刺激免疫器官的發(fā)育，增強(qiáng)機(jī)體的免疫能力，但其作用的表達(dá)受各種因素的影響很大，且對(duì)不同的免疫器官有不同程度的影響。法氏囊和胸腺是雛雞主要的免疫器官，其都隨著時(shí)間而增大在性成熟時(shí)達(dá)到最大，而后逐漸縮小直至僅留下痕跡[8]。

[1] 付果花,閆素梅.飼用乳酸菌制劑在雞生產(chǎn)中的應(yīng)用效果和作用機(jī)理研究進(jìn)展[J].飼料與畜牧,2010（5）:22-25.

[2] 王國霞,黃燕華,周曄,等.微生態(tài)制劑對(duì)肉雞生長和免疫器官的影響[J].飼料廣角,2009（10）:39-40.

[3] 汪海峰,章文明,汪以真,等.乳酸桿菌與腸道黏附相關(guān)表面因子及其機(jī)制的研究進(jìn)展[J].動(dòng)物營養(yǎng)學(xué)報(bào),2011,23（2）:179-186.

[4] 杭柏林,胡建和,劉麗艷,等.乳酸菌株植物乳桿菌和糞鏈球菌對(duì)肉雞免疫性能的影響[J].廣東農(nóng)業(yè)科學(xué),2008（11）:80-83.

[5] 曾炯,黃興國,鄔理洋.微生態(tài)制劑與腸粘膜免疫關(guān)系的研究進(jìn)展[J].江西飼料,2009（6）:17-19.

[6] 張春揚(yáng),牛鐘相,常維山,等.益生菌劑對(duì)肉用仔雞的營養(yǎng)、免疫促進(jìn)作用[J].中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào),2002,24（1）:53-56.

[7] 張磊,李佳,張濤,等.微生態(tài)制劑對(duì)肉仔雞生產(chǎn)性能和免疫功能的影響[J].北京農(nóng)學(xué)院學(xué)報(bào),2008（4）:41-45.

[8] 張勇,曙光,王純潔.AA肉雞脾臟生長指標(biāo)的動(dòng)態(tài)觀察及組織學(xué)觀察[J].畜牧與飼料科學(xué),2009（1）:21-23.