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        鮮姜汁對大腸桿菌及巨大芽孢桿菌的抑制作用研究

        2013-04-29 15:43:59翟興禮
        湖北農(nóng)業(yè)科學(xué) 2013年6期
        關(guān)鍵詞:抑制作用大腸桿菌姜汁

        摘要:將新鮮生姜研磨過濾獲得100%鮮姜汁,稀釋成75%、50%、25% 3個梯度濃度,以無菌水作為對照,以大腸桿菌(Escherichia coli)、巨大芽孢桿菌(Bacillus magaterium)為試驗菌,采用濾紙貼片法測定抑菌作用,比較不同濃度姜汁的抑菌活性。結(jié)果表明,隨著姜汁濃度的增大,抑菌作用增強(qiáng)。

        關(guān)鍵詞:姜汁;抑制作用;大腸桿菌;巨大芽孢桿菌

        中圖分類號:R285,TS264 文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A 文章編號:0439-8114(2013)06-1315-02

        生姜是姜屬植物姜(Zinggiber ofcinale Rosc)的根莖。姜是熱帶、亞熱帶地區(qū)的一種重要栽培植物,在中國的中部、東南部、西南部廣為栽培。生姜作為藥食兩用的植物在中國具有悠久的種植和食用的歷史。在中醫(yī)藥用性能上,生姜味辛、性溫,有開胃止嘔、化痰止咳、發(fā)熱解汗等作用,適用于外感風(fēng)寒、咳嗽、胃寒嘔吐或吐清水,也可用于增進(jìn)血行、驅(qū)散寒氣、益胃氣、助發(fā)汗。生姜中含有揮發(fā)性油,主要成分有姜醇、姜烯、甲基庚烯酮、姜辣素等[1]。醫(yī)學(xué)研究表明生姜對細(xì)菌有抑制作用,對陰道滴蟲有殺滅作用;有明顯的抗?jié)?、抗菌、治療心臟血管疾病等藥用保健功能[2,3]。其所含成分被證明有降血脂等功能[8,9]。生姜是一種天然的抗氧化劑,具有較好的保鮮作用,對食品工業(yè)和人體健康具有重要意義[4]。生姜在食品工業(yè)中作為抗氧化劑及防腐劑添加[5-7]。

        現(xiàn)代科學(xué)研究證實,生姜有消炎抗菌的作用。生姜的水浸劑對傷寒桿菌、鏈球菌、沙門氏菌、肺炎球菌有明顯的抑制作用,可用于治療痢疾和腹瀉。鮮姜汁對大腸桿菌、啤酒酵母、青霉菌有較明顯的抑菌作用。付愛華等[10]報道,生姜提取物用液態(tài)沙堡瓊脂培養(yǎng)基稀釋為0.062 5%~0.250 0%對培養(yǎng)基中的皮膚癬菌、紅色毛癬菌、犬小孢子菌、須癬毛癬菌、絮狀表皮癬菌有極為顯著的抑菌、殺菌作用。陳碰玉等[11]研究發(fā)現(xiàn),新鮮生姜對幽門螺桿菌具有較好的抑菌作用。

        試驗以人體腸道常見微生物大腸桿菌(Escherichia coli)和巨大芽孢桿菌(Bacillus magaterium)為材料,利用濾紙片法測定抑菌圈,明確姜汁的抑菌作用,為生姜的開發(fā)利用奠定基礎(chǔ)。

        1 材料與方法

        1.1 材料與儀器

        1.1.1 生物材料 生姜:鮮品,購買于超市;供試菌種:大腸桿菌、巨大芽孢桿菌菌種均為商丘師范學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院微生物學(xué)實驗室提供。

        1.1.2 儀器 電磁爐、電子天平、高壓蒸汽滅菌鍋、電熱恒溫培養(yǎng)箱、超凈工作臺等。

        1.2 試驗方法

        1.2.1 姜汁的制備 將姜洗凈,晾干,放在紫外燈下照射20 min消毒[12]后放入無菌的研缽,在無菌操作臺上加入少許石英砂研磨,用4層紗布過濾得到鮮姜汁,定這時濃度為100%,用無菌水稀釋(V/V)到75%、50%、25%,即得到4個濃度的姜汁。

        1.2.2 培養(yǎng)基的制備 稱取牛肉膏5 g、蛋白胨10 g、氯化鈉5 g、瓊脂20 g,量取1 000 mL蒸餾水,混合加熱至完全溶解,調(diào)節(jié)pH至7.0~7.4后分裝于250 mL三角瓶中,同時制試管斜面,滅菌[13]。

        1.2.3 菌種的活化 將大腸桿菌和巨大芽孢桿菌按照無菌操作規(guī)程分別接入試管斜面, 37 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h。

        1.2.4 菌懸液的制備 用接種環(huán)挑取一定量的活化后的大腸桿菌和巨大芽孢桿菌菌苔,放入裝有10 mL無菌水的試管中,振蕩5 min,使菌體充分散開,制成2種菌的菌懸液。

        1.2.5 抑菌試驗 采用濾紙片法[14],取直徑6 mm的滅菌濾紙片放入各濃度的姜汁中浸泡30 min,對照濾紙片用無菌水浸泡。將待試菌懸液各1 mL加于平板培養(yǎng)基后用無菌涂布棒涂布均勻制成含菌平板,平板靜置30 min后用無菌鑷子把濾紙片貼在含菌平板上,每個平板放4片同種濾紙片,每個濃度4個重復(fù),每組1個對照。平板于37 ℃恒溫培養(yǎng)箱中倒置培養(yǎng)48 h,取出測定并記錄抑菌圈直徑,比較不同濃度姜汁的抑菌效果。

        2 結(jié)果與分析

        抑菌圈測量結(jié)果見表1、表2。由表1、表2可見,姜汁濃度越大,抑菌效果越強(qiáng),抑菌圈直徑越大??瞻讓φ站闯霈F(xiàn)抑菌圈,說明濾紙片對兩種受試菌均無抑菌活性。

        3 小結(jié)與討論

        實驗以大腸桿菌和巨大芽孢桿菌作為受試菌種,研究鮮姜汁的抑菌活性,證明姜汁對2種細(xì)菌具有明顯的抑菌作用,與鄭俏然等[15]用乙醇提取法進(jìn)行的試驗結(jié)果相比較,抑菌圈直徑明顯較小,可能是由于多種因素影響導(dǎo)致結(jié)果的不同。生姜中揮發(fā)油的化學(xué)提取工藝有索氏法、超臨界CO2流體萃取法、水蒸氣蒸餾法、共水回流冷凝法等[16]。本試驗采用的是鮮姜直接研磨提取,并且未進(jìn)行濃縮處理,結(jié)果的差異可能是由于提取工藝的差別造成的。鮮姜汁對巨大芽孢桿菌的抑菌研究尚未有相關(guān)的報道,本試驗證明鮮姜汁對巨大芽孢桿菌有抑菌作用。

        參考文獻(xiàn):

        [1] 林啟壽.中藥成分化學(xué)[M].北京:科學(xué)出版社,1977.

        [2] 徐國民.薏米姜茶的加工技術(shù)[J].食品工業(yè),1994(5):41-42.

        [3] 李兆龍.國外對生姜的藥用研究[J].中國藥學(xué)雜志,1990,25(4):15-17.

        [4] 林 茂,闞建全.生姜中天然抗氧化劑的應(yīng)用[J].中國食品添加劑開發(fā)應(yīng)用,2007(1):151-154.

        [5] 劉萼華.生姜對幾種食用植物油抗氧化效果實驗研究[J].糧食儲藏,2005,34(5):41-43.

        [6] 關(guān)洪全,栗田啟幸,大荒田素子,等.生姜食鹽醋酸對食品污染菌的協(xié)同抗菌作用的研究[J].中醫(yī)藥學(xué)刊,2003,21(1):119-120.

        [7] 關(guān)洪全,李海波.生姜對常見污染食品真菌抗菌活性的探討[J].遼寧中醫(yī)學(xué)院學(xué)報,2000,2(3):116-117.

        [8] 游 劍,范玫玫,王躍生.生姜降血脂作用研究進(jìn)展[J].江西中醫(yī)藥,2007,38(2):57-59.

        [9] 倪淑華,李秀花,劉雪楓,等.生姜對大鼠血脂代謝影響的研究[J]. 中國老年學(xué)雜志,2006,26(1):89-99.

        [10] 付愛華,尹建元,孫 瑩,等.黃精和生姜抗皮膚癬菌活性研究[J]. 白求恩醫(yī)科大學(xué)學(xué)報,2001,27(4):384-385.

        [11] 陳碰玉,林 蒙,陳 艷,等.新鮮生姜對幽門螺桿菌抑菌殺菌作用的實驗研究[J].中醫(yī)藥通報,2002,1(1):49-50.

        [12] 翟興禮.大蒜水提物對蘇云金芽孢桿菌的抑制作用[J]. 長江蔬菜,2009(6):70-72.

        [13] 沈 萍,范秀榮,李廣武.微生物學(xué)實驗[M].第三版. 北京:高等教育出版社,2006.

        [14] 錢存柔,黃儀秀.微生物學(xué)實驗教程[M].北京:北京大學(xué)出版社,1999.

        [15] 鄭俏然,姚成強(qiáng),鄭麗霞,等.大蒜及生姜提取液抑菌性能的對照研究[J]. 農(nóng)產(chǎn)品加工,2011(2):23-25,35.

        [16] 邱 琴,張國英,劉辛欣,等.超臨界CO2流體萃取法和水蒸氣蒸餾法提取干姜片中揮發(fā)油化學(xué)成分的比較[J]. 上海中醫(yī)藥雜志,2005,39(3):55-57.

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