劉學(xué)義，張 靖，高山林，郭志軍

維持性血液透析(MHD)患者普遍存在記憶力減退、注意力不集中、反應(yīng)遲鈍、工作效率降低及思維不敏捷等認(rèn)知功能的障礙。認(rèn)知功能嚴(yán)重障礙會(huì)降低血液透析患者執(zhí)行透析及藥物治療的依從性，影響患者日常生活，甚至危及患者的生命[1]。改善認(rèn)知功能可以提高M(jìn)HD患者的生活質(zhì)量及改善預(yù)后。研究報(bào)道飲茶及茶葉提取物可以改善認(rèn)知功能[2]，茶多酚是從天然植物茶葉中分離提純出來的一組成分復(fù)雜、分子量不同、性質(zhì)與結(jié)構(gòu)差異很大的多酚類衍生物的總稱，具有抗炎、抗氧化及神經(jīng)保護(hù)作用[3]。Alvarez等[4]研究顯示白介素6(IL-6)及腫瘤壞死因子α(TNF-α)等炎性因子對(duì)情緒及記憶功能有負(fù)性作用。本次研究以客觀、靈敏、特異性較強(qiáng)的電生理學(xué)指標(biāo)——事件相關(guān)電位P300作為評(píng)價(jià)大腦認(rèn)知功能的指標(biāo)，以核因子κB(NF-κB)、TNF-α、IL-6等作為炎性指標(biāo)，觀察茶多酚對(duì)MHD患者認(rèn)知功能的影響及探討影響機(jī)制。

1　對(duì)象與方法

1.1研究對(duì)象2012年1—9月，選擇唐山市工人醫(yī)院血液透析中心MHD老年患者60例，依照完全隨機(jī)設(shè)計(jì)分成常規(guī)組31例及茶多酚組29例。常規(guī)組男16例，女15例，平均年齡為(67±7)歲；茶多酚組男15例，女14例，平均年齡為(65±6)歲。入選標(biāo)準(zhǔn)：(1)連續(xù)規(guī)律透析大于3個(gè)月；(2)意識(shí)清楚、精神正常、聽力正常、錐體束征陰性。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)患有糖尿病、急慢性肝病、急慢性感染、惡性腫瘤、自身免疫性疾??；(2)近1個(gè)月內(nèi)使用過糖皮質(zhì)激素、降脂藥、維生素C、維生素E等藥物；(3)腦血管病、癲癇、阿爾茨海默病、帕金森病等神經(jīng)系統(tǒng)疾病。所有患者均采用以下透析方案：維持性碳酸氫鹽血液透析治療，鈣離子濃度1.5 mmol/L，每周透析3次，每次4 h，透析液流量500 ml/min，血流量250 ml/min，透析機(jī)為貝朗血液透析機(jī)，每次透析使用一次性Nipro130A透析器，血管通路為動(dòng)靜脈內(nèi)瘺。高血壓者給予口服鈣拮抗劑；常規(guī)靜脈補(bǔ)充鐵劑，皮下注射促紅細(xì)胞生成素。茶多酚組口服茶多酚片(浙江大學(xué)茶業(yè)科技開發(fā)公司)每次2片(含0.9 g茶多酚)，每日3次；常規(guī)組口服安慰劑，每次2片，每日3次。組間性別、年齡具有均衡性，所有患者均知情同意。

1.2研究方法

1.2.1標(biāo)本收集茶多酚組及常規(guī)組患者于上機(jī)前均采集空腹外周靜脈血各5 ml，分離血清，以0.2%乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝，-70 ℃保存?zhèn)錂z。另采集靜脈血5 ml，應(yīng)用淋巴細(xì)胞分離液(Ficoll hypaque，密度為1.077)分離單核細(xì)胞，按照試劑說明書提取核蛋白，并于-70 ℃保存?zhèn)錂z。

1.2.2檢測指標(biāo)3個(gè)月后檢測炎性反應(yīng)指標(biāo)：NF-κB、IL-6和TNF-α；認(rèn)知功能指標(biāo)：事件相關(guān)電位P300潛伏期及波幅。

1.2.3檢測方法IL-6、TNF-α及NF-κB的測定均采用酶聯(lián)免疫法(ELISA)，試劑盒購自美國RD公司。事件相關(guān)電位P300檢測方法：采用德國椰格公司生產(chǎn)的Neauroscrean Plus型肌電誘發(fā)電位儀，在屏蔽隔音室中進(jìn)行，受試者保持覺醒狀態(tài)及注意力集中。按國際10/20電極安置法，記錄電極置于Fz電，參考電極置于一側(cè)耳垂，前額接地，電極與皮膚間阻抗<5 kΩ，受試者接受雙耳聽覺Oddball程序刺激，分析時(shí)間1 000 ms，聲強(qiáng)80 dB，靶刺激為高頻短音(2 kHz)，20%概率出現(xiàn)；非靶刺激為低頻短音(1 kHz)，80%概率出現(xiàn)。兩種刺激隨機(jī)出現(xiàn)，要求受試者對(duì)靶刺激通過按鍵做出反應(yīng)。由經(jīng)過培訓(xùn)的專人進(jìn)行操作，每例受試者均先行預(yù)試，待受試者明確方法后再進(jìn)行正式檢測。每例重復(fù)4次，每輪靶刺激20次，受試者默記靶刺激，結(jié)果誤差>10%作廢。計(jì)算機(jī)自動(dòng)分析P300波的潛伏期(PL)及波幅(Amp)，最后取4次P300波的潛伏期(PL)及波幅(Amp)平均值。

2　結(jié)果

2.1常規(guī)組及茶多酚組NF-κB活性、TNF-α及IL-6的比較茶多酚組與常規(guī)組相比，NF-κB、TNF-α及IL-6差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01，見表1)。

表1常規(guī)組及茶多酚組NF-κB活性、TNF-α及IL-6的比較

Table1Comparison of activity of NF-κB，TNF-α and IL-6 between conventional group and TP group

組別例數(shù)NF-κB(%)TNF-α(mg/L)IL-6(μg/L)常規(guī)組3187.7±23.288±23106±26茶多酚組2972.6±19.969±25 88±22 t值 2.69 2.98 3.05P值<0.01<0.005<0.005

注：NF-κB=核因子κB，IL-6=白介素6，TNF-α=腫瘤壞死因子α

2.2常規(guī)組及茶多酚組認(rèn)知功能的比較茶多酚組與常規(guī)組相比，P300潛伏期及波幅差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，P300異常率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05，見表2)。

表2常規(guī)組及茶多酚組P300潛伏期及波幅比較

Table2Comparison of P300 latency and amplitude between conventional group and TP group

組別例數(shù)P300潛伏期(ms)P300波幅(μV)P300異常率(%)常規(guī)組31387±28 9.7±2.0 75.9茶多酚組29365±3311.2±2.374.2檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)量值 2.76 2.72 0.01*P值<0.01<0.01>0.05

注：*為χ2值，余檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)量值為t值

3　討論

在現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的生物-心理-社會(huì)模型中，患者生活質(zhì)量成為評(píng)價(jià)臨床治療效果的重要指標(biāo)。認(rèn)知功能是影響老年人生活質(zhì)量的重要因素。MHD患者普遍存在記憶力減退、注意力不集中、反應(yīng)遲鈍、工作效率降低及思維不敏捷等認(rèn)知功能的障礙[1]。Park等[2]研究結(jié)果顯示綠茶提取物可以改善輕微認(rèn)知功能損害患者的記憶力及注意力。目前關(guān)于茶多酚對(duì)MHD患者認(rèn)知功能的影響報(bào)道較少。本研究以事件相關(guān)電位P300作為認(rèn)知功能的指標(biāo)，就茶多酚對(duì)MHD患者認(rèn)知功能的影響及可能的機(jī)制進(jìn)行了初步探討。

茶多酚是多酚類化合物的總稱，是一種天然的活性物質(zhì)，具有抗炎、抗氧化及神經(jīng)保護(hù)作用[4]。本研究結(jié)果顯示MHD患者應(yīng)用茶多酚后認(rèn)知功能與常規(guī)透析組相比P300潛伏期延長及波幅縮短，與其他報(bào)道結(jié)果相符。Lee等[5]發(fā)現(xiàn)茶多酚能夠抑制NF-κB活性，進(jìn)而保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞免受損傷。NF-κB是一種廣泛存在于多種類型細(xì)胞中的一種轉(zhuǎn)錄因子，能調(diào)控細(xì)胞因子、酶及其他促炎性反應(yīng)因子的基因表達(dá)。在任何類型的炎性反應(yīng)中，均能觀察到NF-κB活性的增強(qiáng)，抑制NF-κB的活性可以抑制炎性的發(fā)展。TNF-α可以激活NF-κB，NF-κB激活后可以促進(jìn)IL-6及TNF-α的表達(dá)[6]。維持性血液透析患者普遍存在微炎性狀態(tài)，主要表現(xiàn)為C反應(yīng)蛋白(CRP)、IL-6和TNF-α等水平增高[7]。Mattson等[8]研究藥物阻斷NF-κB或敲除IL-6可以抵抗小鼠的類抑郁行為。Alvarez等[4]研究顯示抗癡呆藥物腦活素可以減少血漿TNF-α的表達(dá)。上述研究顯示炎性細(xì)胞因子參與了認(rèn)知功能的損害，并且與NF-κB的調(diào)控相關(guān)。本研究中MHD患者應(yīng)用茶多酚后微炎性狀態(tài)得到改善，IL-6、TNF-α及NF-κB水平下調(diào)，與常規(guī)組相比有差異。由于茶多酚可以抑制NF-κB活性，并且口服經(jīng)腸吸收后分布廣泛，可透過血腦屏障進(jìn)入腦細(xì)胞[9]，推測茶多酚一方面經(jīng)腸道吸收后通過血腦屏障進(jìn)入腦細(xì)胞通過抑制NF-κB，進(jìn)而下調(diào)IL-6、TNF-α的表達(dá)，改善了患者的認(rèn)知功能；另一方面茶多酚通過減少血漿TNF-α水平，進(jìn)而抑制了NF-κB活性，從而改善了認(rèn)知功能。

茶多酚天然的具有抗氧化、抗炎、降脂、免疫調(diào)節(jié)、抑菌作用、防治動(dòng)脈硬化、抗腫瘤等多方面作用，而這些作用與維

持性血液透析患者的預(yù)后密切相關(guān)。由于茶多酚在改善微炎性狀態(tài)及改善認(rèn)知功能的同時(shí)還可以獲得保護(hù)心血管及降脂等諸多收益，在維持性血液透析老年患者的治療中值得推廣應(yīng)用。

1崔立文，徐金升，白亞玲，等.維持性血液透析患者流行病學(xué)特征分析[J].河北醫(yī)藥，2010，32(17)：2429.

2Park SK，Jung IC，Lee WK，et al.A combination of green tea extract and l-theanine improves memory and attention in subjects with mild cognitive impairment：A double-blind placebo-controlled study[J].J Med Food，2011，14(4)：334-343.

3李瓊，李勇.綠茶多酚防治老年神經(jīng)退行性疾病研究進(jìn)展[J].衛(wèi)生研究，2010，39(1)：123-126.

4Alvarez XA，Sampedro C，Cacabelos R，et al.Reduced TNF-α and increased IGF-I levels in the serum of Alzheimer′s disease patients treated with the neurotrophic agent cerebrolysin[J].Int J Neuropsychopharmacol，2009，12(7)：867-872.

5Lee SY，Lee JW，Lee H，et al.Inhibitory effect of green tea extract on beta-amyloid-induced PC12 cell death by inhibition of the activation of NF-kappaB and ERK/p38 MAP kinase pathway through antioxidant mechanisms[J].Brain Res Mol Brain Res，2005，140(1)：45-54.

6Pahl HL.Activators and target genes of Rel/NF-kappaB transcription factors[J].Oncogene，1999，18(49)：6853-6866.

7Sch?mig M，Eisenhardt A，Ritz E.The microinfammatory state of uremia[J].Blood Purif，2000，18(4)：327-332.

8Mattson MP，Camandola S.NF-kappaB in neuronal plasticity and neurodegenerative disorders[J].J Clin Invest，2001，107(3)：247-254.

9Suganuma M，Okabe S，Oniyama M，et al.Wide distribution of [3H](-)-epigallocatechin gallate，a cancer preventive tea polyphenol，in mouse tissue[J].Carcinogenesis，1998，19(10)：1771-1776.