劉學義，張 靖，高山林，郭志軍

維持性血液透析(MHD)患者普遍存在記憶力減退、注意力不集中、反應遲鈍、工作效率降低及思維不敏捷等認知功能的障礙。認知功能嚴重障礙會降低血液透析患者執(zhí)行透析及藥物治療的依從性，影響患者日常生活，甚至危及患者的生命[1]。改善認知功能可以提高MHD患者的生活質(zhì)量及改善預后。研究報道飲茶及茶葉提取物可以改善認知功能[2]，茶多酚是從天然植物茶葉中分離提純出來的一組成分復雜、分子量不同、性質(zhì)與結(jié)構(gòu)差異很大的多酚類衍生物的總稱，具有抗炎、抗氧化及神經(jīng)保護作用[3]。Alvarez等[4]研究顯示白介素6(IL-6)及腫瘤壞死因子α(TNF-α)等炎性因子對情緒及記憶功能有負性作用。本次研究以客觀、靈敏、特異性較強的電生理學指標——事件相關(guān)電位P300作為評價大腦認知功能的指標，以核因子κB(NF-κB)、TNF-α、IL-6等作為炎性指標，觀察茶多酚對MHD患者認知功能的影響及探討影響機制。

1　對象與方法

1.1研究對象2012年1—9月，選擇唐山市工人醫(yī)院血液透析中心MHD老年患者60例，依照完全隨機設計分成常規(guī)組31例及茶多酚組29例。常規(guī)組男16例，女15例，平均年齡為(67±7)歲；茶多酚組男15例，女14例，平均年齡為(65±6)歲。入選標準：(1)連續(xù)規(guī)律透析大于3個月；(2)意識清楚、精神正常、聽力正常、錐體束征陰性。排除標準：(1)患有糖尿病、急慢性肝病、急慢性感染、惡性腫瘤、自身免疫性疾??；(2)近1個月內(nèi)使用過糖皮質(zhì)激素、降脂藥、維生素C、維生素E等藥物；(3)腦血管病、癲癇、阿爾茨海默病、帕金森病等神經(jīng)系統(tǒng)疾病。所有患者均采用以下透析方案：維持性碳酸氫鹽血液透析治療，鈣離子濃度1.5 mmol/L，每周透析3次，每次4 h，透析液流量500 ml/min，血流量250 ml/min，透析機為貝朗血液透析機，每次透析使用一次性Nipro130A透析器，血管通路為動靜脈內(nèi)瘺。高血壓者給予口服鈣拮抗劑；常規(guī)靜脈補充鐵劑，皮下注射促紅細胞生成素。茶多酚組口服茶多酚片(浙江大學茶業(yè)科技開發(fā)公司)每次2片(含0.9 g茶多酚)，每日3次；常規(guī)組口服安慰劑，每次2片，每日3次。組間性別、年齡具有均衡性，所有患者均知情同意。

1.2研究方法

1.2.1標本收集茶多酚組及常規(guī)組患者于上機前均采集空腹外周靜脈血各5 ml，分離血清，以0.2%乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝，-70 ℃保存?zhèn)錂z。另采集靜脈血5 ml，應用淋巴細胞分離液(Ficoll hypaque，密度為1.077)分離單核細胞，按照試劑說明書提取核蛋白，并于-70 ℃保存?zhèn)錂z。

1.2.2檢測指標3個月后檢測炎性反應指標：NF-κB、IL-6和TNF-α；認知功能指標：事件相關(guān)電位P300潛伏期及波幅。

1.2.3檢測方法IL-6、TNF-α及NF-κB的測定均采用酶聯(lián)免疫法(ELISA)，試劑盒購自美國RD公司。事件相關(guān)電位P300檢測方法：采用德國椰格公司生產(chǎn)的Neauroscrean Plus型肌電誘發(fā)電位儀，在屏蔽隔音室中進行，受試者保持覺醒狀態(tài)及注意力集中。按國際10/20電極安置法，記錄電極置于Fz電，參考電極置于一側(cè)耳垂，前額接地，電極與皮膚間阻抗<5 kΩ，受試者接受雙耳聽覺Oddball程序刺激，分析時間1 000 ms，聲強80 dB，靶刺激為高頻短音(2 kHz)，20%概率出現(xiàn)；非靶刺激為低頻短音(1 kHz)，80%概率出現(xiàn)。兩種刺激隨機出現(xiàn)，要求受試者對靶刺激通過按鍵做出反應。由經(jīng)過培訓的專人進行操作，每例受試者均先行預試，待受試者明確方法后再進行正式檢測。每例重復4次，每輪靶刺激20次，受試者默記靶刺激，結(jié)果誤差>10%作廢。計算機自動分析P300波的潛伏期(PL)及波幅(Amp)，最后取4次P300波的潛伏期(PL)及波幅(Amp)平均值。

2　結(jié)果

2.1常規(guī)組及茶多酚組NF-κB活性、TNF-α及IL-6的比較茶多酚組與常規(guī)組相比，NF-κB、TNF-α及IL-6差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.01，見表1)。

表1常規(guī)組及茶多酚組NF-κB活性、TNF-α及IL-6的比較

Table1Comparison of activity of NF-κB，TNF-α and IL-6 between conventional group and TP group

組別例數(shù)NF-κB(%)TNF-α(mg/L)IL-6(μg/L)常規(guī)組3187.7±23.288±23106±26茶多酚組2972.6±19.969±25 88±22 t值 2.69 2.98 3.05P值<0.01<0.005<0.005

注：NF-κB=核因子κB，IL-6=白介素6，TNF-α=腫瘤壞死因子α

2.2常規(guī)組及茶多酚組認知功能的比較茶多酚組與常規(guī)組相比，P300潛伏期及波幅差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.01)，P300異常率差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05，見表2)。

表2常規(guī)組及茶多酚組P300潛伏期及波幅比較

Table2Comparison of P300 latency and amplitude between conventional group and TP group

組別例數(shù)P300潛伏期(ms)P300波幅(μV)P300異常率(%)常規(guī)組31387±28 9.7±2.0 75.9茶多酚組29365±3311.2±2.374.2檢驗統(tǒng)計量值 2.76 2.72 0.01*P值<0.01<0.01>0.05

注：*為χ2值，余檢驗統(tǒng)計量值為t值

3　討論

在現(xiàn)代醫(yī)學的生物-心理-社會模型中，患者生活質(zhì)量成為評價臨床治療效果的重要指標。認知功能是影響老年人生活質(zhì)量的重要因素。MHD患者普遍存在記憶力減退、注意力不集中、反應遲鈍、工作效率降低及思維不敏捷等認知功能的障礙[1]。Park等[2]研究結(jié)果顯示綠茶提取物可以改善輕微認知功能損害患者的記憶力及注意力。目前關(guān)于茶多酚對MHD患者認知功能的影響報道較少。本研究以事件相關(guān)電位P300作為認知功能的指標，就茶多酚對MHD患者認知功能的影響及可能的機制進行了初步探討。

茶多酚是多酚類化合物的總稱，是一種天然的活性物質(zhì)，具有抗炎、抗氧化及神經(jīng)保護作用[4]。本研究結(jié)果顯示MHD患者應用茶多酚后認知功能與常規(guī)透析組相比P300潛伏期延長及波幅縮短，與其他報道結(jié)果相符。Lee等[5]發(fā)現(xiàn)茶多酚能夠抑制NF-κB活性，進而保護神經(jīng)細胞免受損傷。NF-κB是一種廣泛存在于多種類型細胞中的一種轉(zhuǎn)錄因子，能調(diào)控細胞因子、酶及其他促炎性反應因子的基因表達。在任何類型的炎性反應中，均能觀察到NF-κB活性的增強，抑制NF-κB的活性可以抑制炎性的發(fā)展。TNF-α可以激活NF-κB，NF-κB激活后可以促進IL-6及TNF-α的表達[6]。維持性血液透析患者普遍存在微炎性狀態(tài)，主要表現(xiàn)為C反應蛋白(CRP)、IL-6和TNF-α等水平增高[7]。Mattson等[8]研究藥物阻斷NF-κB或敲除IL-6可以抵抗小鼠的類抑郁行為。Alvarez等[4]研究顯示抗癡呆藥物腦活素可以減少血漿TNF-α的表達。上述研究顯示炎性細胞因子參與了認知功能的損害，并且與NF-κB的調(diào)控相關(guān)。本研究中MHD患者應用茶多酚后微炎性狀態(tài)得到改善，IL-6、TNF-α及NF-κB水平下調(diào)，與常規(guī)組相比有差異。由于茶多酚可以抑制NF-κB活性，并且口服經(jīng)腸吸收后分布廣泛，可透過血腦屏障進入腦細胞[9]，推測茶多酚一方面經(jīng)腸道吸收后通過血腦屏障進入腦細胞通過抑制NF-κB，進而下調(diào)IL-6、TNF-α的表達，改善了患者的認知功能；另一方面茶多酚通過減少血漿TNF-α水平，進而抑制了NF-κB活性，從而改善了認知功能。

茶多酚天然的具有抗氧化、抗炎、降脂、免疫調(diào)節(jié)、抑菌作用、防治動脈硬化、抗腫瘤等多方面作用，而這些作用與維

持性血液透析患者的預后密切相關(guān)。由于茶多酚在改善微炎性狀態(tài)及改善認知功能的同時還可以獲得保護心血管及降脂等諸多收益，在維持性血液透析老年患者的治療中值得推廣應用。

1崔立文，徐金升，白亞玲，等.維持性血液透析患者流行病學特征分析[J].河北醫(yī)藥，2010，32(17)：2429.

2Park SK，Jung IC，Lee WK，et al.A combination of green tea extract and l-theanine improves memory and attention in subjects with mild cognitive impairment：A double-blind placebo-controlled study[J].J Med Food，2011，14(4)：334-343.

3李瓊，李勇.綠茶多酚防治老年神經(jīng)退行性疾病研究進展[J].衛(wèi)生研究，2010，39(1)：123-126.

4Alvarez XA，Sampedro C，Cacabelos R，et al.Reduced TNF-α and increased IGF-I levels in the serum of Alzheimer′s disease patients treated with the neurotrophic agent cerebrolysin[J].Int J Neuropsychopharmacol，2009，12(7)：867-872.

5Lee SY，Lee JW，Lee H，et al.Inhibitory effect of green tea extract on beta-amyloid-induced PC12 cell death by inhibition of the activation of NF-kappaB and ERK/p38 MAP kinase pathway through antioxidant mechanisms[J].Brain Res Mol Brain Res，2005，140(1)：45-54.

6Pahl HL.Activators and target genes of Rel/NF-kappaB transcription factors[J].Oncogene，1999，18(49)：6853-6866.

7Sch?mig M，Eisenhardt A，Ritz E.The microinfammatory state of uremia[J].Blood Purif，2000，18(4)：327-332.

8Mattson MP，Camandola S.NF-kappaB in neuronal plasticity and neurodegenerative disorders[J].J Clin Invest，2001，107(3)：247-254.

9Suganuma M，Okabe S，Oniyama M，et al.Wide distribution of [3H](-)-epigallocatechin gallate，a cancer preventive tea polyphenol，in mouse tissue[J].Carcinogenesis，1998，19(10)：1771-1776.