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        乳腺浸潤性導管癌中拓撲異構酶Ⅱ等相關因素表達與腋窩淋巴結轉移的關系研究

        2013-04-19 06:59:27張程達劉秀瑋劉東升張衛(wèi)東
        中國全科醫(yī)學 2013年6期
        關鍵詞:腋窩浸潤性乳腺

        王 蒙,張程達,李 真,劉秀瑋,劉東升,孟 新,張衛(wèi)東

        目前乳腺癌已成為女性最常見的惡性腫瘤之一,且其發(fā)病率逐年升高、發(fā)病年齡也趨于年輕化[1]。我國乳腺癌發(fā)病率也呈迅猛上升的趨勢,預計截至2021年,55~69歲的女性乳腺癌發(fā)病率將會達到100/10萬[2]。有研究表明,遠處轉移是影響乳腺癌患者治療效果及預后情況的重要因素和主要致死原因,而淋巴道播散即為一種乳腺癌最重要的轉移途徑[3-5]。本研究采用免疫組織化學-SP法測定了101例乳腺浸潤性導管癌患者病理組織中雌激素受體(ER)、孕激素受體(PR)、C-erbB-2基因、拓撲異構酶Ⅱ(TopoisomeraseⅡ)及nm23基因等的表達,其中TopoisomeraseⅡ在國內(nèi)外相關研究中多側重于其在化療方案方面的意義,對其與腋窩淋巴結轉移關聯(lián)性的研究相對較少。本研究就以上指標結合相關臨床因素,重點探討其與乳腺浸潤性導管癌淋巴結轉移的相關性,力求為患者的預后及診療方案提供科學的數(shù)據(jù)支持。

        1 資料與方法

        1.1 一般資料 收集2010年6月—2011年6月于河南省人民醫(yī)院就診并接受乳腺癌改良根治術的乳腺癌患者的病歷記錄及病理診斷資料。篩選標準:(1)病理類型為乳腺浸潤性導管癌;(2)病理診斷項目及臨床相關資料完整。共101例患者進入統(tǒng)計分析,均為女性。

        1.2 試驗試劑 即用型鼠抗人ER、PR、Ki-67、nm23基因、TopoisomeraseⅡ單克隆抗體,均購自北京巾杉金橋生物技術有限公司;堿性磷酸酶標記羊抗兔或鼠IgG聚合物(二抗)等,購自福州邁新生物技術開發(fā)有限公司。

        1.3 研究方法 101例患者標本均為手術切除的乳腺癌組織。采用免疫組織化學-SP法對手術標本進行免疫組化染色,嚴格按照試劑盒說明書進行實驗操作:首先用10%的甲醛溶液固定標本,接下來組織脫水、組織透明、組織浸蠟及切片染色。然后經(jīng)一抗、二抗孵育,3,3-二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色后封片。

        1.4 結果判定 病理組織學的分級標準采用改良Bloom-Richardson分級;ER、PR 陽性細胞的判斷標準,TopoisomeraseⅡ、nm23基因及C-erbB-2基因蛋白表達的結果判定遵照相關文獻中Hercep Test等評分標準[6-8]。染色評分標準:如果出現(xiàn)顯色不清或者顯色不均勻則判定為0分;染色為淺黃色則判定為1分;染色為棕黃色則判定為2分;出現(xiàn)深褐色染色則判定為3分。綜合的評分標準為:0~1分評為陰性(-);2~3分評為弱陽性(+);4~5分評為中度陽性(++);>5分評為強陽性(+++)[9]。

        1.5 統(tǒng)計學方法 采用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件對相關數(shù)據(jù)進行分析。對病理檢測采用列聯(lián)表χ2檢驗進行因素分析,檢驗水準為α=0.05。定義乳腺癌腋窩淋巴結轉移與否為因變量,其他單因素篩選有意義的影響因素為自變量,進行多因素非條件Logistic 回歸分析,計算其OR值及95%CI、相應P值等。

        2 結果

        2.1 基本情況 101例女性乳腺浸潤性導管癌患者均經(jīng)術后病理檢查確診,其中淋巴結轉移患者68例,無淋巴結轉移患者33例,轉移發(fā)生率為67%。全組發(fā)病年齡為28~85歲,平均(50.3±8.9)歲。

        2.2 相關激素受體的表達與腋窩淋巴結轉移的關系分析 不同ER、PR的表達梯度患者腋窩淋巴結轉移發(fā)生率比較,差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。不同C-erbB-2基因的表達梯度患者腋窩淋巴結轉移發(fā)生率比較,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);C-erbB-2(+++)組的轉移發(fā)生率最高,為81.5%;C-erbB-2(-)組的轉移發(fā)生率最低,為18.2%(見表1)。

        2.3 TopoisomeraseⅡ、nm23基因的表達與腋窩淋巴結轉移的關系分析 TopoisomeraseⅡ(-)患者腋窩淋巴結轉移發(fā)生率與TopoisomeraseⅡ(+)比較,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。nm23基因(-)患者腋窩淋巴結轉移發(fā)生率與nm23基因(+)比較,差異亦有統(tǒng)計學意義(P<0.05,見表2)。

        2.4 多因素Logistic回歸分析 對上述單因素篩選出的具有統(tǒng)計學意義的相關因素進行多因素非條件Logistic 回歸分析,采用篩選變量方法(即Forward Wald法),進入變量α=0.05。分析結果顯示,TopoisomeraseⅡ是淋巴結轉移的危險因素,而且是乳腺浸潤性導管癌腋窩淋巴結轉移的強危險因素(OR>3);C-erbB-2(OR=1.848,P=0.041)高表達與腋窩淋巴結轉移有關;而nm23基因(OR=0.151,P=0.008)的回歸系數(shù)β為負值,且OR<1,即為保護因素(見表3)。

        表1 相關激素受體的表達與腋窩淋巴結轉移的關系
        Table1 The relationship between relevant hormone receptor expressions and axillary lymph node metastasis

        轉移情況(例)有轉移 無轉移轉移發(fā)生率(%)χ2值P值ER1 6580 646 -171160 7 +261072 2 ++13861 9 +++12475 0PR4 5270 210 -261563 4 +341372 3 ++7277 8 +++1325 0C-erbB-214 7180 002 -2918 2 +231069 7 ++21970 0 +++22581 5

        注:ER=雌激素受體,PR=孕激素受體

        表2 TopoisomeraseⅡ、nm23基因的表達與腋窩淋巴結轉移的關系
        Table2 The relationship between TopoisomeraseⅡ,nm23 gene expression and axillary lymph node metastasis

        轉移情況(例)有轉移 無轉移轉移發(fā)生率(%)χ2值P值TopoisomeraseⅡ9 9900 002 -141745 2 +541677 1nm23基因9 4040 002 -34685 0 +342755 7

        注:Topoisomerase Ⅱ=拓撲異構酶Ⅱ

        表3 乳腺癌淋巴結轉移的危險因素多因素Logistic 回歸分析
        Table3 Logistic regression analysis of the risk factors of lymph node metastasis of breast cancer

        因素βSEWaldχ2P值OR值95%CInm23基因-1 8920 709 7 132 0 0080 151(0 038,0 604)TopoisomeraseⅡ 2 1830 66010 9510 0018 870(2 435,32 310)C-erbB-2 0 6140 301 4 164 0 0411 848(1 025,3 335)

        3 討論

        本研究結果支持C-erbB-2基因的陽性表達與腋窩淋巴結轉移之間有關。原癌基因C-erbB-2,又名HER-2或者HER-2/neu,屬于人類表皮生長因子受體 (EGFR)家族的第二個成員,位于染色體17q21上,在細胞的信號傳導中發(fā)揮著重要的作用,也是細胞增殖、分化、轉移、存活和死亡的重要調(diào)節(jié)因子[10]。曾有相關研究提出:C-erbB-2基因的表達情況不僅與淋巴結的轉移顯著相關,而且與淋巴結轉移的數(shù)目有相關關系[11-12]。這均提示C-erbB-2基因的準確檢測可以更好地預測患者是否會出現(xiàn)腋窩淋巴結轉移、指導評估乳腺癌患者的預后,有助于患者及時、準確地選擇針對性治療方案。

        本研究中多因素Logistic分析結果亦納入了TopoisomeraseⅡ和nm23基因,且統(tǒng)計分析顯示Topoisomerase Ⅱ是淋巴結轉移的危險因素,而且是乳腺浸潤性導管癌腋窩淋巴結轉移的強危險因素。而nm23基因低表達是腋窩淋巴結轉移的危險因素。這兩項指標在國內(nèi)外關于乳腺浸潤性導管癌腋窩淋巴結轉移方面的研究尚且較少,但有國外相關文獻支持上述結果[13-14]。

        乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展是一個極為復雜且多因素、多步驟、多進程和多基因改變的過程,同許多生物學的指標均有密切的相關性[15-16]。這就要求在不斷的探索研究中,綜合考慮多種因素,應用多因素分析的方法,結合各個研究方法之長,才有可能探知這一復雜的機制及控制方法。患者腋窩淋巴結的轉移狀態(tài)也可作為指導乳腺癌患者治療方法、手術術式、生存預后的重要指標之一,但是nm23基因及C-erb-2基因等生物學指標也可是其獨立的影響因素。正確的檢測分析及應用這些指標對乳腺癌患者的早診斷、早治療有很大的指導意義[17]。

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        3 冉社偉,王小毅,譚金祥.乳腺癌組織學分級與雌激素受體、孕激素受體、人表皮生長因子受體-2和p53表達及淋巴結轉移的相關性[J].中國全科醫(yī)學,2008,11(1):117-119.

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        17 夏立平,劉曉力,陳國平,等.TGF-β1、TGF-βR1、Smad4在乳腺癌發(fā)生、發(fā)展中的作用及其相互關系[J].海南醫(yī)學院學報,2010,16(6):693-698.

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