1引言

莫達(dá)非尼（Modafinil）是一種用于治療發(fā)作性睡眠和輪班工作睡眠障礙的神經(jīng)興奮劑 [1]。莫達(dá)非尼結(jié)構(gòu)中有一個(gè)手性硫原子（見圖1），存在一對手性對映體，其手性對映體在藥理藥效方面具有一定差異 [2]。目前，已有R異構(gòu)體阿莫達(dá)非尼上市，因此其手性拆分在藥物質(zhì)量控制等方面具有重要意義。莫達(dá)非尼手性拆分已有文獻(xiàn)報(bào)道的多為手性柱拆分 [3，4]，本研究組建立了以磺丁基醚β環(huán)糊精（SBEβCD）為手性拆分試劑的毛細(xì)管電泳分離方法 [5]。但在環(huán)糊精與莫達(dá)非尼對映體的拆分作用機(jī)理方面，未見相關(guān)報(bào)道。手性對映體的拆分機(jī)理研究目前有高效液相色譜 [6]、毛細(xì)管電泳 [7，8]、手性傳感器 [9，10]和分子模擬 [11-13]等方法。本研究以毛細(xì)管電泳法拆分莫達(dá)非尼對映體，探討莫達(dá)非尼手性拆分的熱力學(xué)問題；同時(shí)借助分子模擬方法計(jì)算模擬環(huán)糊精莫達(dá)非尼異構(gòu)體之間相互作用，預(yù)測包合物的三維結(jié)構(gòu)及其穩(wěn)定性，從分子相互作用角度解釋環(huán)糊精手性識別莫達(dá)非尼的機(jī)理。

2實(shí)驗(yàn)部分

2.1毛細(xì)管電泳分離實(shí)驗(yàn)

儀器：HP3DCE毛細(xì)管電泳儀（Agilent公司），DAD檢測器，ChemStation工作站，熔融石英毛細(xì)管柱（河北永年光導(dǎo)纖維廠）。試劑： R莫達(dá)非尼對照品和莫達(dá)非尼消旋體對照品（中國藥科大學(xué)醫(yī)藥化工研究所）；S莫達(dá)非尼（凱試（上海）科技有限公司）。SBEβCD（江蘇巨環(huán)醫(yī)藥有限公司）。

分離條件： 毛細(xì)管（50 cm × 50 μm， 有效長度41.5 cm），操作電壓20 kV，柱溫15-35 ℃，檢測波長225 nm，壓力進(jìn)樣5 kPa × 5 s。緩沖液：20 mmol/L Na2HPO4（pH 7.0），SBEβCD 濃度為5-50 mmol/L。兩次進(jìn)樣之間分別用0.1 mol/L NaOH和水各沖洗2 min，再用緩沖液沖洗3 min。

2.2分子模擬對接

莫達(dá)非尼分子對映體的構(gòu)建及優(yōu)化采用Chem3D Ultra1程序進(jìn)行。建好分子模型后以MM2進(jìn)行構(gòu)象優(yōu)化。βCD分子結(jié)構(gòu)由βCD與酶復(fù)合物的晶體結(jié)構(gòu)（從蛋白質(zhì)晶體結(jié)構(gòu)數(shù)據(jù)庫獲得）去除水分子和配體分子而獲得，在此基礎(chǔ)上構(gòu)建SBEβCD的結(jié)構(gòu)，而后進(jìn)行能量優(yōu)化，所得結(jié)果供分子對接使用。

莫達(dá)非尼對映體和SBEβCD的對接使用Gold V3.0.1程序進(jìn)行柔性對接，使用GoldScore打分函數(shù)得到分子相互作用的擬合度（Fitness）數(shù)值。用Fitness函數(shù)值判斷分子對接結(jié)果。

3結(jié)果與討論

3.1手性對映體拆分實(shí)驗(yàn)

過程，且在低溫條件下能獲得較好的分離。

3.3結(jié)合常數(shù)計(jì)算

結(jié)合常數(shù)是表征分子間相互作用強(qiáng)弱的重要理化參數(shù)，在以環(huán)糊精為手性拆分劑的毛細(xì)管電泳手性分離中，結(jié)合常數(shù)反映環(huán)糊精分子包合對映體分子能力，也反映其對對映體的區(qū)分能力。雙倒數(shù)法是進(jìn)行結(jié)合常數(shù)計(jì)算

4結(jié)論

以SBEβCD為手性拆分試劑，采用毛細(xì)管電泳法對莫達(dá)非尼對映體進(jìn)行拆分，并利用分子模擬對其立體選擇性差異進(jìn)行了研究。熱力學(xué)數(shù)據(jù)顯示， 手性分離過程主要是焓驅(qū)動(dòng)過程，在低溫條件下能獲得較好的分離。采用雙倒數(shù)法求取了莫達(dá)非尼對映體與SBEβCD的結(jié)合常數(shù)， R對映體的結(jié)合常數(shù)大于S對映體。利用Gold軟件對莫達(dá)非尼對映體和SBEβCD進(jìn)行了對接，F(xiàn)itness打分函數(shù)結(jié)果表明， R對映體比S對映體與SBEβCD結(jié)合更穩(wěn)定，氫鍵作用的差異可能是能達(dá)到手性拆分的原因。

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