摘要 基于核酸分子雜交原理構(gòu)建了一種新型抗體固定方法。先將抗體與寡核苷酸單鏈交聯(lián),再將兩者的復合物與固相載體表面上的互補寡核苷酸鏈結(jié)合,從而將抗體固定到載體的表面。在磁珠表面對該固定方法進行實驗,證明了方法的可行性。以本方法構(gòu)建了針對轉(zhuǎn)基因Bt Cry1Ac蛋白的免疫芯片,用Cy3標記二抗對其探針固定效果進行分析,并且在芯片上對Bt Cry1Ac蛋白進行梯度濃度檢測試驗。結(jié)果表明,以本方法構(gòu)建的抗體芯片,探針分布具有良好的特異性;探針層分布均勻,非特異吸附??;檢測靈敏度達到0.01~0.05
SymbolmA@ g/L;此外,通過雜交核酸雙鏈的解離成功實現(xiàn)了芯片的再生,有助于解決傳統(tǒng)抗體固定方法中芯片不可再生的問題。
關(guān)鍵詞 免疫芯片;抗體固定;抗體寡核苷酸復合物;核酸雜交