王瑩，羅菊花，張海珠，董必美，巫秀美

（大理學(xué)院，云南大理671000）

喙尾琵琶甲流浸膏的鎮(zhèn)痛及抗炎作用研究

王瑩，羅菊花，張海珠，董必美，巫秀美*

（大理學(xué)院，云南大理671000）

目的：觀察喙尾琵琶甲流浸膏對小鼠的鎮(zhèn)痛及抗炎作用。方法：用熱板法和醋酸扭體法測定小鼠的痛閾值，二甲苯耳腫脹法測定抗炎作用。結(jié)果：喙尾琵琶甲流浸膏高、低劑量組均能提高扭體小鼠痛閾值，高劑量組能顯著提高熱板實(shí)驗(yàn)小鼠痛閾值；喙尾琵琶甲抗炎作用不明顯。結(jié)論：喙尾琵琶甲流浸膏具有明顯的鎮(zhèn)痛作用，抗炎作用不明顯。

喙尾琵琶甲流浸膏；熱板實(shí)驗(yàn)；醋酸扭體實(shí)驗(yàn)；二甲苯致耳腫脹實(shí)驗(yàn)

喙尾琵琶甲Blaps rynchopetera Fairmaire屬鞘翅目Coleoptera擬步甲科Tenebrionidae，是云南民間長期使用的一種藥用昆蟲，尤其是生活在云南的彝族人民用它來治療發(fā)燒、咳嗽、牙痛、胃炎、疔瘡、腫瘤等癥〔1〕。雖然使用的歷史悠久，但目前對其藥效學(xué)的基礎(chǔ)性研究較少，臨床應(yīng)用的研究及報(bào)道也并不多見〔2〕。為了更好地開發(fā)利用這一昆蟲藥物，本文對喙尾琵琶甲粗提物的鎮(zhèn)痛及抗炎作用進(jìn)行研究。

1 材料

1.1 藥物喙尾琵琶甲流浸膏制備，取喙尾琵琶甲鮮品，粉碎后用95%乙醇浸泡提取3次，合并提取液，減壓濃縮成浸膏，收率控制在20%~25%，樣品放置4℃下保存，使用時(shí)用生理鹽水配制成高、低濃度，分別為0.2 g（浸膏質(zhì)量）/mL和0.4 g/mL；阿司匹林腸溶片（規(guī)格：0.3 g/片，湖南新匯制藥有限公司，批號：080903，以生理鹽水配制成0.03 g/mL濃度供實(shí)驗(yàn)用）；醋酸（分析純，廣東汕頭新寧化工廠，批號：950517）；二甲苯（天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司，批號：20060828）。

1.2 動物KM種小鼠，體重（20±2）g，雌雄各半（熱板實(shí)驗(yàn)除外），由大理學(xué)院實(shí)驗(yàn)動物中心提供，合格證號：SCXK。

1.3 儀器RB-200智能熱板儀（成都泰盟科技有限公司出品）；TP電子天平（梅特勒-托利多儀器上海有限公司）。

2 方法與結(jié)果

2.1 對二甲苯致小鼠耳腫脹的影響取KM種小鼠按體重隨機(jī)分成喙尾琵琶甲流浸膏高、低劑量組，陽性對照阿司匹林組，空白對照組，每組12只，雌雄各半。各組按0.3 mL/20 g灌胃給予相應(yīng)藥物，空白對照組灌服等體積生理鹽水，1次/d，連續(xù)給藥5 d，于末次給藥后1 h，將0.02 mL二甲苯均勻涂于小鼠右耳廓兩面致炎，左耳不涂作對照，致炎后30 min脫頸椎處死小鼠，以7 mm直徑打孔器取下耳緣左、右耳片，分別用電子天平稱重，以右、左耳片重量差表示腫脹度（腫脹度=右耳片重-左耳片重）〔3-4〕。結(jié)果表明喙尾琵琶甲流浸膏對二甲苯致小鼠耳腫脹的影響不明顯，高、低劑量組與空白對照組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見表1。

表1 喙尾琵琶甲流浸膏對二甲苯致小鼠耳腫脹的影響

2.2 對小鼠熱板致痛作用的影響選擇健康的雌性KM種小鼠為實(shí)驗(yàn)動物。實(shí)驗(yàn)前，在（55±0.5）℃的熱板上測定基礎(chǔ)痛閾值，選痛閾值范圍在5~30 s的小鼠供實(shí)驗(yàn)用〔5-7〕。合格小鼠依體重隨機(jī)分為4組，各組操作同2.1項(xiàng)。于最后一次給藥后30、60、90 min測定小鼠的痛閾值，痛閾值超過60 s者按60 s計(jì)。結(jié)果表明，喙尾琵琶甲流浸膏高劑量組在給藥后各時(shí)間點(diǎn)均明顯提高小鼠的痛域值，低劑量組作用不明顯。見表2。

2.3 對醋酸致小鼠疼痛作用的影響取健康KM種小鼠依體重隨機(jī)分4組，每組雌雄各半，各組操作同2.1項(xiàng)。末次給藥后30 min，各組各鼠腹腔注射0.6%醋酸0.2 mL/鼠，觀察記錄各鼠在腹腔注射醋酸后的15 min內(nèi)扭體次數(shù)，并計(jì)算抑制率〔8〕。反應(yīng)抑制率=（空白對照組平均扭體次數(shù)-實(shí)驗(yàn)組平均扭體次數(shù)）/空白對照組平均扭體次數(shù)的百分率。結(jié)果顯示喙尾琵琶甲流浸膏低、高劑量組對醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)抑制率分別為42%和49%，抑制作用明顯。見表3。

表2 喙尾琵琶甲流浸膏對小鼠熱痛閾值的影響

表3 喙尾琵琶甲流浸膏對冰醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)的影響

3 討論

小鼠的爪趾對熱刺激非常敏感，其表現(xiàn)為跳躍、縮足和舔后足。熱板法適合于評價(jià)中樞鎮(zhèn)痛研究藥物。扭體實(shí)驗(yàn)是通過注射冰醋酸刺激腹膜產(chǎn)生疼痛表現(xiàn)，適合于對外周鎮(zhèn)痛藥物的研究〔9〕。本實(shí)驗(yàn)通過熱板法和冰醋酸扭體法分別從中樞鎮(zhèn)痛和外周鎮(zhèn)痛兩方面進(jìn)行藥效學(xué)的評價(jià)，由熱板實(shí)驗(yàn)可見，高劑組用藥后可顯著延長熱刺激致小鼠舔后足的潛伏期，說明高劑量喙尾琵琶甲流浸膏能增加熱板小鼠的痛閾值。扭體實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明喙尾琵琶甲流浸膏高、低劑量組對醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)抑制率分別為49%和42%，抑制作用明顯。綜合以上研究結(jié)果表明，喙尾琵琶甲流浸膏具有較好的鎮(zhèn)痛作用，尤其是對醋酸所致外周性疼痛效果更佳，在較低劑量就能顯示明顯鎮(zhèn)痛作用?？寡讓?shí)驗(yàn)結(jié)果證明，喙尾琵琶甲流浸膏對二甲苯致小鼠耳廓腫脹抑制作用不明顯，與空白對照組相比，高、低劑組對耳腫脹度均有一定的影響，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。說明喙尾琵琶甲流浸膏在以上兩個(gè)劑量下抗炎作用弱。

目前對于喙尾琵琶甲的藥效學(xué)和毒理學(xué)相關(guān)研究很少，尤其是毒理學(xué)相關(guān)的文獻(xiàn)資料幾乎為零，這給劑量的設(shè)置帶來了困難，本實(shí)驗(yàn)中劑量的設(shè)置主要是參照民間驗(yàn)方中所使用的劑量折算而來，在此劑量范圍下不能全面的反映喙尾琵琶甲的藥理作用，今后還應(yīng)從毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)，制定藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)等方面對其進(jìn)行深入研究。

〔1〕羅建蓉，何江波，張楨，等.藥用昆蟲喙尾琵琶甲化學(xué)成分研究〔J〕.中成藥，2010，32（11）：2013-2014.

〔2〕張?zhí)m勝，夏從龍，楊永壽，等.彝藥喙尾琵琶甲的研究進(jìn)展〔J〕.時(shí)珍國醫(yī)國藥，2009，20（12）：3113-3114.

〔3〕陳睿，姚素波，汪茜，等.風(fēng)寒感冒分散片流浸膏解熱、鎮(zhèn)痛及抗炎作用的觀察〔J〕.中成藥，2010，32（5）：856-858.

〔4〕張琪，汪仙陽，馬博，等.復(fù)方續(xù)斷總皂苷鎮(zhèn)痛抗炎及預(yù)防骨質(zhì)疏松癥的實(shí)驗(yàn)研究〔J〕.時(shí)珍國醫(yī)國藥，2010，21（7）：1683-1684.

〔5〕努爾買買提，斯拉甫，希爾艾力.維藥祖卡木顆粒的解熱鎮(zhèn)痛作用研究〔J〕.中國民族醫(yī)藥雜志，2000，6（4）：33-34.

〔6〕張堅(jiān)，程體娟，裴古軍.金七葉合劑解熱鎮(zhèn)痛作用研究〔J〕.中藥藥理與臨床，2002，18（3）：29-30.

〔7〕劉映紅，林斌，何貴鋒，等.正骨方抗炎鎮(zhèn)痛活血作用的實(shí)驗(yàn)研究〔J〕.中藥材，2010，33（8）：1315-1316.

〔8〕馮麗娟，周本杰.退熱止痛散活性部位解熱鎮(zhèn)痛藥效評價(jià)〔J〕.中藥材，2009，32（4）：589-591.

〔9〕沃格爾H.G，沃格爾W.H.藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)指南-新藥發(fā)現(xiàn)和藥理學(xué)評價(jià)〔M〕.北京：科學(xué)出版社，2001：491-492.

（責(zé)任編輯 毛本勇）

Study of the Analgesic and Anti-inflammatory Effects of Fluid Extract from Blaps rynchopetera Fairmaire

WANG Ying,LUO Juhua,ZHANG Haizhu,DONG Bimei,WU Xiumei*
（Dali University,Dali,Yunnan 671000,China）

Objective:To investigate the analgesic and anti-inflammatory effect of the fluid extracts of Blaps rynchopetera Fairmaire（EBRF）.Methods:Hot-plate test and acetic acid twisting method were applied to determine the pain threshold of the mice,and mouse ear swelling test induced by dimethylbenzene was applied to evaluate the anti-inflammatory effect.Results:Both at high and low dose,fluid extracts of B.rynchopetera could prolong the mice pain threshold time in acetic acid twisting method,while only at the high dose could prolong the time in hot-plate test.There was no anti-inflammatory effect of B.rynchopetera.Conclusion:There is notable analgesic effect and no anti-inflammatory effect of B.rynchopetera.

fluid extracts of B.rynchopetera;hot-plate test;acetic acid twisting method;mouse ear swelling test induced by dimethylbenzene

R285.5

A

1672-2345（2013）06-0005-03

10.3969/j.issn.1672-2345.2013.06.002

大理學(xué)院青年教師科研基金資助項(xiàng)目（KYQN2009-41）

2013-01-31

2013-03-11

王瑩，講師，主要從事抗老年癡呆藥物研究. *通信作者：巫秀美，博士.