柳斌，郭美仙，劉勇，陸翠芬，劉光明，陳光勇

（大理學(xué)院藥學(xué)與化學(xué)學(xué)院，云南大理671000）

毛大丁草葉醇提物對(duì)大鼠離體子宮的作用

柳斌，郭美仙，劉勇，陸翠芬，劉光明，陳光勇*

（大理學(xué)院藥學(xué)與化學(xué)學(xué)院，云南大理671000）

目的：研究毛大丁草葉醇提物對(duì)大鼠離體子宮的作用。方法：取成熟雌性未孕大鼠，用擊打法處死，取子宮角制備大鼠離體子宮段，采用BL-420E+生物機(jī)能系統(tǒng)記錄子宮張力信號(hào)，觀察毛大丁草葉醇提物對(duì)大鼠離體子宮自發(fā)收縮和催產(chǎn)素誘發(fā)收縮的影響。結(jié)果：毛大丁草葉醇提物可以使大鼠離體子宮收縮頻率減慢、強(qiáng)度減小和活動(dòng)力減弱。結(jié)論：毛大丁草葉醇提物對(duì)大鼠離體子宮自發(fā)收縮和催產(chǎn)素誘發(fā)收縮均具有明顯的抑制作用。

毛大丁草葉；醇提物；大鼠；離體子宮

毛大丁草Gerbera piloselloides（L.）為菊科帚菊木族大丁草屬植物，是多年生被毛草本植物。在我國(guó)分布于西藏、云南、四川、貴州、廣西、廣東、湖南、湖北、江西等地〔1〕，又名兔耳風(fēng)和毛耳風(fēng)〔2〕。毛大丁草全草入藥，全草包括葉、花、根、根莖，主治傷風(fēng)感冒、咳嗽痰多、扁桃腺炎、水腫、胃及十二指腸潰瘍、胃腸炎、毒蛇咬傷等〔3〕。具有清熱解毒、理氣和血的功效，治癰腫、乳蛾、痄腮、瘰疬結(jié)核、胸肋痞氣、疝氣、下血〔4-5〕。相關(guān)研究表明毛大丁草具有鎮(zhèn)咳、祛痰、平喘等作用〔4，6-7〕。還有研究表明，毛大丁草有良好的抗菌作用〔8〕。目前，國(guó)內(nèi)尚未見(jiàn)毛大丁草葉對(duì)動(dòng)物離體子宮作用的研究報(bào)道，為此我們對(duì)毛大丁草葉醇提物對(duì)大鼠離體子宮的作用進(jìn)行了研究，為更好地開(kāi)發(fā)利用毛大丁草提供一定的科學(xué)依據(jù)。

1 材料

1.1 動(dòng)物清潔級(jí)SD大鼠，成熟雌性未孕，體重（240±10）g，由昆明醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證號(hào)：SCXK（滇）2011-0004。

1.2 試劑己烯雌酚（批號(hào)：950710111，廠家：上海第九制藥廠）；催產(chǎn)素注射液（批號(hào)：060405，廠家：上海第一生化藥業(yè)有限公司）；營(yíng)養(yǎng)液（g/L）：NaCl 9.0，KCl 0.42，CaCl20.06，NaHCO30.5，葡萄糖0.5，通氧30 min。

1.3 樣品毛大丁草采自云南省大理市下關(guān)鎮(zhèn)，經(jīng)大理學(xué)院生藥學(xué)周濃副教授鑒定為菊科大丁草屬植物毛大丁草。將葉粉碎后，取葉粉600 g，無(wú)水乙醇回流提取3次，每次2 h。合并提取液，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮成浸膏240 g。臨用時(shí)用蒸餾水配制成560 mg/mL的毛大丁草葉醇提物混懸液（GPC）。

1.4 儀器FW135中藥粉碎機(jī)（天津市泰斯特儀器有限公司），SHZ-D循環(huán)水式真空泵（鞏義市予華儀器有限責(zé)任公司），RE-200旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（上海亞榮生化儀器廠），YP3001N電子天平（上海精密科學(xué)儀器有限公司），HW-400S恒溫平滑肌槽（成都泰盟科技有限公司），BL-420E+生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)（成都泰盟科技有限公司）。

2 方法

2.1 分組及標(biāo)本制備取大鼠，于實(shí)驗(yàn)前48 h，肌肉注射1次0.1%己烯雌酚0.1 mL/100 g，人工促使大鼠處于動(dòng)情期或動(dòng)情前期，以提高子宮平滑肌對(duì)藥物的敏感性。實(shí)驗(yàn)時(shí)將大鼠隨機(jī)分為2組。用擊打法處死大鼠，剖腹取出子宮，立即置于盛有冷營(yíng)養(yǎng)液的培養(yǎng)皿中，剝離附著于子宮角的結(jié)締組織和脂肪組織。將子宮角剪成長(zhǎng)約1.5~2 cm子宮段，一端穿線固定于通氣鉤，另一端通過(guò)蛙心夾與張力換能器相連，將標(biāo)本轉(zhuǎn)入盛有營(yíng)養(yǎng)液的肌槽中。每個(gè)肌槽中分別盛有19.5 mL營(yíng)養(yǎng)液，恒溫（32±0.5）℃，通予95% O2+5%CO2的混合氣體，每個(gè)子宮段負(fù)荷1 g，每10 min更換一次新鮮的營(yíng)養(yǎng)液（32℃），穩(wěn)定20 min，待收縮頻率和張力規(guī)則后開(kāi)始試驗(yàn)〔9-12〕。

2.2 給藥及記錄每加入一種試劑并描記10 min，換液5次，穩(wěn)定20 min。描記10 min離體子宮段的自發(fā)收縮活動(dòng)，依次分別加入生理鹽水、0.01 U/mL催產(chǎn)素、560 mg/mL毛大丁草葉醇提物各0.5 mL，為自發(fā)收縮實(shí)驗(yàn)組；描記10 min離體子宮段的自發(fā)收縮活動(dòng)，依次分別加入生理鹽水、0.01 U/mL催產(chǎn)素、560 mg/mL毛大丁草葉醇提物+0.01 U/mL催產(chǎn)素，為誘發(fā)收縮實(shí)驗(yàn)組。

2.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)用區(qū)間測(cè)量方法測(cè)量：給藥后10 min的平均收縮頻率；平均收縮強(qiáng)度（最大收縮張力）；計(jì)算子宮活動(dòng)力（強(qiáng)度*頻率）。數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行組間t檢驗(yàn)。

3 結(jié)果

3.1 毛大丁草葉醇提物對(duì)大鼠離體子宮自發(fā)收縮的影響表1顯示：與正常比較，催產(chǎn)素使大鼠離體子宮平滑肌自發(fā)收縮的頻率加快（P<0.01）；強(qiáng)度增大（P<0.01）；子宮活動(dòng)力增強(qiáng)（P<0.01），表明離體子宮標(biāo)本具有活性。與正常比較，毛大丁草葉醇提物使大鼠離體子宮平滑肌自發(fā)收縮的頻率減慢，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；收縮強(qiáng)度減小（P<0.01）；子宮活動(dòng)力減弱（P<0.05），表明毛大丁草葉醇提物對(duì)大鼠離體子宮平滑肌的自發(fā)收縮有抑制作用。

表1 毛大丁草葉醇提物對(duì)大鼠離體子宮自發(fā)收縮的影響（，n=10）

表1 毛大丁草葉醇提物對(duì)大鼠離體子宮自發(fā)收縮的影響（，n=10）

注：與正常比較：*P<0.05，**P<0.01。

3.2 毛大丁草葉醇提物對(duì)大鼠離體子宮催產(chǎn)素誘發(fā)收縮的影響表2顯示：與正常比較，催產(chǎn)素使大鼠正常離體子宮平滑肌收縮的頻率加快（P<0.01）；強(qiáng)度增大（P<0.01）；子宮活動(dòng)力增強(qiáng)（P<0.01），表明離體子宮標(biāo)本具有活性。與催產(chǎn)素比較，毛大丁草葉醇提物使大鼠離體子宮平滑肌催產(chǎn)素誘發(fā)收縮的頻率減慢（P<0.01）；強(qiáng)度減?。≒<0.01）；子宮活動(dòng)力減弱（P<0.01），表明毛大丁草葉醇提物對(duì)大鼠離體子宮平滑肌的催產(chǎn)素誘發(fā)收縮有抑制作用。

表2 毛大丁草葉醇提物對(duì)大鼠離體子宮催產(chǎn)素誘發(fā)收縮的影響（x±s，n=10）

4 討論

非孕期和非病理情況下女性是感覺(jué)不到子宮收縮的，只有當(dāng)懷孕或是子宮異常時(shí)才能感覺(jué)到。孕期的病理性子宮收縮見(jiàn)于流產(chǎn)或早產(chǎn)，故均為有痛性收縮；非孕期有強(qiáng)度較大的子宮收縮，屬于異常收縮。由子宮收縮引起的疼痛是一種特殊的疼痛，臨床上的鎮(zhèn)痛藥種類(lèi)很多，但不是對(duì)其療效不明顯，就是毒副作用較多，而中藥則有很好的鎮(zhèn)痛作用，同時(shí)毒副作用較少。

本試驗(yàn)采用BL-420E+生物機(jī)能系統(tǒng)記錄子宮張力信號(hào)，觀察大鼠離體子宮在加入受試物后的張力變化。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，毛大丁草葉醇提物可抑制大鼠離體子宮的自發(fā)收縮和催產(chǎn)素誘發(fā)收縮，表現(xiàn)為收縮頻率減慢、強(qiáng)度減小和活動(dòng)力減弱，從而證實(shí)毛大丁草葉醇提物能抑制大鼠離體子宮平滑肌的收縮功能。但其作用機(jī)制，尚需進(jìn)行進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)研究。

〔1〕程用謙.中國(guó)植物志〔M〕.北京：科學(xué)出版社，1996：94-96.

〔2〕劉善述，李文虎，孫西.草木便方〔M〕.重慶：重慶出版社，1989：97.

〔3〕魏珠生，吳天開(kāi)，鄭中楷，等.福建藥物志〔M〕.福州：福建科學(xué)技術(shù)出版社，1994：351-352.

〔4〕江蘇新醫(yī)學(xué)院.中藥大辭典：上冊(cè)〔M〕.上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1977：446-448.

〔5〕藥理學(xué)組.毛大丁草鎮(zhèn)咳、祛痰作用的實(shí)驗(yàn)研究〔J〕.醫(yī)藥科技資料，1977（1）：31.

〔6〕唐小江，黃華容，方鐵錚，等.毛大丁草根止咳化痰活性成分的研究〔J〕.中國(guó)中藥雜志，2003，28（5）：426-428.

〔7〕張世武，劉國(guó)雄.毛大丁草“平喘”作用的實(shí)驗(yàn)觀察〔J〕.遵義醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，1980，4（1）：7.

〔8〕唐小江，張?jiān)?，黃華容，等.毛大丁草不同部位揮發(fā)油成分的比較〔J〕.中山大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科版，2003，42（2）：124-125.

〔9〕陳奇.中藥藥理研究方法學(xué)〔M〕.北京：人民衛(wèi)生出版社，2006：463-464.

〔10〕Karsli B，Kayacan N，Kucukyavuz Z，et al.Efects of local an esthetics on pregnant uterine muscles〔J〕.Pol J Pharmacol，2003，55（1）：51-56.

〔11〕劉麗芬，柴天川，崔文華.引產(chǎn)餐醇提取物對(duì)大鼠子宮的影響〔J〕.時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2008，19（4）：820-821.

〔12〕謝燕，玄振玉，于莉，等.舒經(jīng)克痛軟膠囊對(duì)大鼠子宮活動(dòng)的影響〔J〕.中國(guó)中藥雜志，2008，33（12）：1466-1469.

（責(zé)任編輯 李楊）

In Vitro Study of the Effect of Gerbera piloselloides Ethanol Extract on the Uterus of Rat

LIU Bin,GUO Meixian,LIU Yong,LU Cuifen,LIU Guangming，CHEN Guangyong*
（College of Pharmacy and Chemistry,Dali University,Dali,Yunnan 671000,China）

Objective:To investigate the effect of ethanol extract from leaves of Gerbera piloselloides on the uterus of rat in vitro. Methods:Ten mature female but not pregnant SD rats were executed by strike,and uterine horns were used for the rat uterus segment in vitro.BL-420E+Biological Functional System was used to record uterine tension,the effect of Gerbera piloselloides Ethanol Extract on spontaneous contraction and oxytocin-induced contraction of uterus were recorded.Results:The extract could slow down the uterine contraction frequency and decrease the contraction intensity,and weaken the uterine motility as well. Conclusion:The ethanol extract of Gerbera piloselloides has significant inhibitive effect on the spontaneous contraction and oxytocininduced contraction of rat uterus in vitro.

Gerbera piloselloides;ethanol extract;rat;uterus in vitro

R285.5

A

1672-2345（2013）06-0090-03

10.3969/j.issn.1672-2345.2013.06.026

大理州科技局科研基金資助項(xiàng)目（2060402）；大理學(xué)院大學(xué)生科研基金資助項(xiàng)目（DXSKYY201123）

2012-08-30

2013-04-29

柳斌，藥學(xué)專(zhuān)業(yè)2009級(jí)本科生. *通信作者：陳光勇，副教授.