王錦梅，程妮，，豐凡，鄧建軍，高慧，曹煒，

1(西北大學分析科學研究所，陜西西安，710069)2(西北大學化工學院食品工程系，陜西西安，710069);3(陜西省蜂產(chǎn)品工程技術研究中心，陜西西安，710056)

蜂蜜是指蜜蜂采集植物的花蜜、分泌物或蜜露，與自身分泌物結合后，經(jīng)充分釀造而成的天然甜物質［1］。蜂蜜中含有200多種化學成分，包括碳水化合物、蛋白質、礦物質、維生素、有機酸、黃酮、酚酸、酶和其它的植物化學物質［2］。其中植物化學物質是蜂蜜發(fā)揮保健功能的主要成分，其種類和含量不僅受氣候(陽光，水分)、土壤及其它未知因素等的影響，而且與其植物源息息相關［3］。

黃酮是一類廣泛存在于植物中的次生代謝產(chǎn)物，包括黃酮、黃銅醇、二氫黃酮、異黃酮、花色素類及黃烷-3，4-二醇類等。蜂蜜中黃酮化合物的種類受植物源的影響。北半球采集的蜂蜜所含的黃酮化合物主要來自蜂膠，赤道地區(qū)和澳大利亞蜂蜜中的黃酮化合物則主要來自蜜源植物的花粉和花蜜［4］。目前，從蜂蜜中已經(jīng)鑒定出30多種黃酮化合物［5］。雖然蜂蜜中黃酮化合物含量較少，但它能反映蜂蜜的植物源種類。本文綜述了近年來國內外關于黃酮化合物作為單花種蜂蜜植物源標記物的研究進展。

1 單花種蜂蜜中的植物源黃酮標記物

1.1 桉樹蜜中的黃酮標記物

桉樹是桃金娘科桉屬植物。在澳大利亞東部沿海廣泛分布。桉樹枝繁葉茂，終年常綠。其花呈纓狀，為粉紅色。桉樹花期長，泌蜜量大，是一種重要的蜜源植物。我國引種50多年，主要分布在廣東、廣西、海南、福建和臺灣，江西、云南、四川、湖南南部也有少量分布。桉樹蜜呈琥珀色，有特殊的桉樹花香味，口感酸中帶甜，酸甜之中略帶咸味和辣味，是澳大利亞的主要商品蜜。

Martos等人研究了澳大利亞的灌木凝膠蜜和桉樹蜜中的黃酮組分［6-7］，發(fā)現(xiàn)二者均含有槲皮素、毛地黃黃酮和山奈酚，而且灌木凝膠蜜中不含五羥基黃酮，因此，利用這一特點很容易將其從澳大利亞桉樹蜜中鑒定出來。Martos等人還發(fā)現(xiàn)，楊梅黃素、木樨草素和毛地黃黃酮可以做歐洲桉樹蜜的植物源標記物。Yao等人研究了澳大利亞和歐洲桉樹蜜中的黃酮化合物［8］，發(fā)現(xiàn)所有澳大利亞桉樹蜜中均含有五羥基黃酮、槲皮素和木樨草素，該研究結果意味著這3種黃酮化合物可以作為澳大利亞桉樹蜜的植物源標記物。Yao等人還發(fā)現(xiàn)，澳大利亞桉樹蜜和歐洲桉樹蜜的不同之處在于短葉松素、松屬素和白楊素的含量不同，它們在歐洲桉樹蜜中的含量較高，而在澳大利亞桉樹蜜中的含量很低。Iurlina等人研究了阿根廷的單花蜜［9］，發(fā)現(xiàn)槲皮素，楊梅酮和木樨草素可以作為這類蜜的植物源標記物。

1.2 麥盧卡蜜中的黃酮標記物

麥盧卡屬于桃金娘科灌木，主要分布在新西蘭和澳大利亞，多生長于偏遠無污染的原始森林。其樹葉曾被當年發(fā)現(xiàn)新西蘭的庫克船長用來當作茶葉，因此被稱為“茶樹”。每逢初夏，麥盧卡植物開花時會吸引成群的蜜蜂來采集花蜜，釀造出獨具特色的麥盧卡蜂蜜。麥盧卡蜜中含有其它蜂蜜所沒有的活性抗菌成分——UMF獨麥素，其藥理活性甚至超過很多傳統(tǒng)的藥品，因而成為世界上最珍貴的蜂蜜之一，也是世界上2種藥品級蜂蜜之一，堪稱蜂蜜中的極品。

Kato等人分析了新西蘭和澳大利亞的麥盧卡蜜［10］，發(fā)現(xiàn)二者均含有金雞菊苷，而且在澳大利亞的麥盧卡蜂蜜(包括麥盧卡樹上的灌木凝膠蜜)中含量最豐富。因此，金雞菊苷可能是麥盧卡蜂蜜的一個很好的黃酮標記物。Oelschlaegel等人［11］研究了新西蘭的40種麥盧卡蜜，第一次在麥盧卡蜜中鑒定出曲酸，光色素等物質，同時也發(fā)現(xiàn)光色素是麥盧卡蜂蜜植物源標記物的相關物質。Yao等人研究了澳大利亞灌木凝膠蜜和新西蘭的麥盧卡蜜［12］，發(fā)現(xiàn)二者均含有槲皮素、毛地黃黃酮、3-甲氧基槲皮素和山奈酚，這兩類蜂蜜的主要差異是黃酮的含量不同，后者的含量相對較高，因此槲皮素、毛地黃黃酮、3-甲氧基槲皮素和山奈酚可以作為沿海地區(qū)麥盧卡蜂蜜的植物源標記物。Stephens等人研究了新西蘭不同地區(qū)的麥盧卡蜜［13］，發(fā)現(xiàn)有較高含量的三甲氧基苯甲酸和丙酮醛，而且兩者的含量與其地理位置有一定的關系。

1.3 石楠蜜中的黃酮標記物

歐石楠是指杜鵑花科歐石楠屬的植物。全球大約有700多種的歐石楠，其中大部分都產(chǎn)自南非，被稱為“南非特有的皇后”;另外尚有70多個物種大致分布于非洲其他地域、地中海地區(qū)及歐洲地區(qū)。在結晶前，石楠蜜的顏色由茶琥珀色變?yōu)殓晟蚣t琥珀色，隨后變?yōu)槌赛S色(有時甚至變?yōu)樽厣?，這有別于其他蜂蜜。

Ferreres等人分析了葡萄牙的石楠蜜［14］，發(fā)現(xiàn)石楠蜜中黃酮物質的含量在60～500 μg/100 g(蜂蜜)，主要是楊梅黃酮、3-甲基楊梅黃銅、3'-甲氧基楊梅黃酮和五羥基黃酮。而且在當?shù)氐钠渌涿蹣悠分袥]有檢測到這4種物質，因此，它們有可能作為石楠蜜植物源的標記物。Jasicka-Misiak等人研究了波蘭的14種石楠蜜［15］，發(fā)現(xiàn)這14種石楠蜜中楊梅素的含量占總酚含量的0.5% ～8.5%，與其他黃酮類物質相比它的含量較高，因此認為楊梅素可能成為鑒別石楠蜜真假的化學標記物。

1.4 洋槐蜜的黃酮標記物

洋槐屬落葉喬木，本屬植物分布于歐洲的不同國家，如意大利、德國和克羅地亞等。我國主要分布在長江以北，其中黃河中下游各省最多。樹皮呈褐色，有縱裂紋。花白色，花萼筒上有紅色斑紋?；ㄆ陂L江以南為4月下旬，長江以北為五月上旬到中旬，開花期短而集中，花期10 d左右。洋槐蜜呈水白色，透明狀，色澤清亮，口感清甜，有槐花特有的清香味，不易結晶。我國的洋槐蜜主要產(chǎn)自陜西、山東、河南及河北等地。

Truchado等人分析了意大利洋槐蜜［16］，發(fā)現(xiàn)含有8種黃酮苷，它們的共同特點是以山奈酚與鼠李糖和己糖結合，而意大利其他植物源的蜂蜜中都不含這類物質，因此把這8種黃酮苷作為意大利洋槐蜜的植物源標記物。Schievano等人［17］研究了意大利威尼托地區(qū)的洋槐蜜、椴樹蜜和栗子蜜。發(fā)現(xiàn)均含有白楊素，但洋槐蜜中白楊素的含量最高。因此，白楊素可能是洋槐蜜的植物源黃酮標記物。

1.5 栗子蜜中的黃酮標記物

板栗是歐洲居民栽培最早的果樹之一，約已有3 000多年的栽培歷史。屬落葉喬木，本屬植物分布于北半球的亞洲、歐洲 、美洲和非洲 。主要栽培種還有歐洲栗和日本栗。我國主要分布在遼寧、陜西、北京、河北、山東和河南等地。栗子花是由樹梢伸出的如白胡須一樣，似花非花，似葉非葉，雌雄同株，雄花為直立柔荑花序，雌花單獨或數(shù)朵生于總苞內，花期為5～6月。栗子花蜜顏色較深，香味濃郁，是歐洲國家的主要商品蜜。

Truchado等人研究了7種意大利栗子蜜［18］，這些樣品分別采自艾米利亞-羅馬涅、錫耶納和阿雷佐。只有來自艾米利亞-羅馬涅的樣品中含有一種槲皮素衍生物，含量雖少，但可以作為這個地區(qū)蜂蜜的植物源標記物。Daher等人研究了不同地區(qū)的單花蜜［19］，包括來自法國的栗子蜜、法國和匈牙利的洋槐蜜、西班牙和意大利的柑橘蜜、法國的薰衣草蜜、意大利和西班牙的桉樹蜜等，發(fā)現(xiàn)這些樣品都含有白楊素，松屬素、短葉松素等黃酮化合物，而且栗子蜜中松屬素的含量最低，但是Daher等人認為這些黃酮化合物與蜂蜜的植物源沒有相關性。

1.6 椴樹蜜中的黃酮標記物

椴樹是一種高大的喬木，屬于椴樹科。主產(chǎn)于熱帶和亞熱帶，中國有9屬，80余種。在我國南北均有分布，生長在長白山脈的主要是糠椴和紫椴，是我國極富經(jīng)濟價值的優(yōu)良樹種。其實最值得稱贊的還是椴樹花蜜，每年6～7月中旬是它的花期。椴樹蜜色澤晶瑩，醇厚甘甜，具有濃郁的薄荷香味，且較易結晶，結晶后呈細膩潔白的油脂狀。椴樹蜜是我國東北的主要商品蜜。

Truchado等人分析了意大利不同地區(qū)的椴樹蜜、桉樹蜜和蒲公英蜜等27種樣品［20］，發(fā)現(xiàn)意大利的所有椴樹蜜樣品中都含有異鼠李糖-3-O-新橙皮苷，且含量較高。因此，可以將這種黃酮苷作為意大利椴樹蜜的植物源標記物。此外，蒲公英蜜中含有異鼠李糖-3-O-(戊糖基-己糖基)-7-O-己糖基，因此這種黃酮苷可以作為意大利蒲公英蜜的植物源標記物。

1.7 荊芥蜜中的黃酮標記物

荊芥是唇形科植物中的一個種，多年生草本，主要生長于亞熱帶如臺灣地區(qū)之海拔800 m以下的開闊地及荒廢地。我國主要分布在新疆、甘肅、陜西、云南等地。荊芥蜜是蜜蜂在荊芥植物花上采集花蜜并釀制而成，荊芥蜜一般在秋天才有，花期2～3個月，產(chǎn)量較高，顏色呈淡綠色，口感細膩，氣味芳香，是阿根廷的主要產(chǎn)品蜜。

Truchado等人研究了阿根廷的荊芥蜂蜜［21］，在所分析的樣品中都檢測到了槲皮素、山奈酚、異鼠李糖和配糖體，因此，這4種黃酮化合物結合起來可以做阿根廷的荊芥蜂蜜的植物源標記物。

1.8 柑橘蜜中的黃酮標記物

柑橘屬蕓香科柑橘亞科，是熱帶、亞熱帶常綠果樹(除枳以外)，用作經(jīng)濟栽培的有3個屬:枳屬、柑橘屬和金柑屬。我國和世界其他國家栽培的柑橘主要是柑橘屬。柑橘在春季開花，花為黃白色。柑橘蜜是蜜蜂采集柑橘花釀制而成，色澤多種多樣，白色至淺琥珀色，味甜潤而微酸，有柑橘香味，易結晶。柑橘蜜是巴西的主要產(chǎn)品蜜。

Tomás-Barberán等人用高效液相色譜法研究了52種歐洲單花蜜［22］，發(fā)現(xiàn)橙皮素可以作為柑橘的植物源標記物。Escriche等人研究了西班牙的6種柑橘蜜［23］，這6種柑橘蜜是蜜蜂分別采集檸檬樹和橘子樹而得到的，研究結果表明有8種黃酮，2種酚酸和37種揮發(fā)性物質的含量在檸檬蜜中相對要高，Escriche等人建議用這些物質作為西班牙不同柑橘蜜的植物源標記物。

此外，Tomás-Barberán等人還發(fā)現(xiàn)山奈酚可以作為迷迭香蜜的植物源標記物;槲皮素可以作為向日葵蜜的植物源標記物［21］。Tuberoso等人研究了來自意大利不同地區(qū)的23種薊蜂蜜［24］，發(fā)現(xiàn)光色素可以作為這種蜂蜜的植物源標記物。

2 結語

從單花種蜂蜜中尋找植物源黃酮標記物的研究越來越受到人們的關注。雖然蜂蜜中黃酮化合物含量較低，且受環(huán)境、土壤等條件的影響，目前的數(shù)據(jù)還不足以判斷蜂蜜的植物源，但隨著蜂蜜植物化學研究的不斷深入，有可能從蜂蜜中篩選出植物源標示物。

我國擁有豐富的單花種蜂蜜，很多單花種蜂蜜具有極高的商品價值和保健功能，由于產(chǎn)量小，供求關系存在矛盾，因而一些商品價格較高的單花種蜂蜜成為造假的對象。然而，我國在蜂蜜的植化方面的研究非常薄弱，很多單花種蜂蜜中植物次生代謝物說不清楚，因此，深入研究我國主產(chǎn)的特色單花種蜂蜜的植物源分類的研究迫在眉睫。研究結果將為蜂蜜的質量控制、真?zhèn)舞b別及保健功能的開發(fā)提供參考。

［1］ 曹煒，尉亞輝.蜂產(chǎn)品保健原理與加工技術［M］.北京:化學工業(yè)出版社，2002:198-204.

［2］ Ramanauskiene K，Stelmakiene A，Briedis V，et al.The quantitative analysis of biologically active compounds in Lithuanian honey［J］.Journal of Agricultural and Food Chemistry，2012，132:1 544-1 548.

［3］ Cherchi A，Spanedda L，Tuberoso C，et al.Solid-phase extraction and high-performance liquid chromatographic determination of organic acids in honey［J］.Journal of Chromatography A，1994，669:59-64.

［4］ Tomás-Barberán F A，Martos I，F(xiàn)erreres F，et al.HPLC flavonoid profiles as markers for the botanical origin of European unifloral honeys［J］.Journal of the Science of Food and Agriculture.2001，81(5):485-496.

［5］ 盧珂.中國蜂蜜抗氧化活性的研究［D］.西安:西北大學，2006:1-53.

［6］ Martos I，F(xiàn)erreres F，Tomás-Barberán F A.Identification of flavonoid markers for the botanical origin of Eucalyptus honey ［J］.Journal of Agricultural and Food Chemistry，2000，48(5):1 498-1 502.

［7］ Martos I，F(xiàn)erreres F，Yao L H，et al.Flavonoids in monospecific Eucalyptus honeys from Australia［J］.Journal of Agricultural and Food Chemistry，2000，48(10):4 744-4 748.

［8］ Yao L H，Jiang Y M，D'Arcy B，et al.Quantitative highperformance liquid chromatography analyses of flavonoids in Australian Eucalyptus honeys［J］.Journal of Agricultural and Food Chemistry，2004，52(2):210-214.

［9］ Iurlina M O，Saiz A I，F(xiàn)ritz R，et al.Major flavonoids of Argentinean honeys.Optimisation of the extraction method and analysis of their content in relationship to the geographical source of honeys［J］.Journal of Agricultural and Food Chemistry，2009，115:1 141-1 149.

［10］ Kato Y，Umeda N，Maeda A，et al.Identification of a novel glycoside，leptosin，as a chemical marker of Manuka honey［J］.Journal of Agricultural and Food Chemistry，2012，60:3 418-3 423.

［11］ Oelschlaegel S，Gruner M，Pang-Ning W，et al.Classification and characterization of Manuka honeys based on phenolic compounds and methylglyoxal［J］.Journal of Agricultural and Food Chemistry，2012，60:7 229-7 237.

［12］ Yao L，Datta N，Tomas-Barberan F A，et al.Flavonoids，phenolic acids and abscisic acid in Australian and New Zealand Leptospermum honeys［J］.Journal of Agricultural and Food Chemistry，2003，81:159-168.

［13］ Stephens J M，Schlothauer R C，Morris B D，et al.Phenol compounds and methylglyoxal in some New Zealand manuka and kanuka honeys［J］.Journal of Agricultural and Food Chemistry，2010，120:78-86.

［14］ Ferreres F，García-Viguera C，Tomás-Lorente F，et al.Hesperetin:a marker of the floral origin of citrus honey［J］.The Journal of the Science of Food and Agriculture，1993，61:121-123.

［15］ Jasicka-Misiak I，Poliwoda A，Dereń M，et al.Phenolic compounds and abscisic acid as potential markers for the floral origin of two Polish unifloral honeys［J］.Food Chemistry，2012，131(4):1 149-1 156.

［16］ Truchado P，F(xiàn)erreres F，Bortolotti L，et al.Nectar Flavonol Rhamnosides Are Floral Markers of Acacia(Robinia pseudacacia)Honey［J］.Journal of the Science of Food and Agriculture，2008，56(19):8 815-8 824.

［17］ Schievano E，Peggion E，Mammi S.1H Nuclear magnetic resonance spectra of chloroform extracts of honey for chemometric determination of its botanical origin［J］.Journal of the Science of Food and Agriculture，2010，58(1):57-65.

［18］ Truchado P，Martos I，Bortolotti L，et al A.Use of quinoline alkaloids as markers of the floral origin of chestnut honey［J］.Journal of Agricultural and Food Chemistry，2009，57(13):5 680-5 686.

［19］ Daher S，Gülacar F O.Analysis of phenolic and other aromatic compounds in honeys by solid-phase microextraction followed by gas chromatography mass spectrometry［J］.Journal of Agricultural and Food Chemistry，2008，56(14):5 775-5 780.

［20］ Truchado P，F(xiàn)erreres F，Tomas-Barberan F A.Liquid chromatography-tandem mass spectrometry reveals the widespread occurrence of flavonoid glycosides in honey，and their potential as floral origin markers［J］.Journal of Chromatography A，2009.1216:7 241-7 248.

［21］ Truchado P，Gallez L M，Moreno D A，et al.Identification of botanical biomarkers in argentinean diplotaxis honeys:flavonoids and glucosinolates［J］.Journal of the Science of Food and Agriculture，2010，58:12 678-12 685.

［22］ Tomas-Barberan F A.，Martos I，F(xiàn)erreres F，et al.HPLC flavonoid profiles as markers for the botanical origin of European unifloral honeys［J］.Journal of the Science of Food and Agriculture，2001，81(5):485-496.

［23］ Escriche I，Kadar M，Juan-Borras M，et al.Using flavonoids，phenolic compounds and headspace volatile profile for botanical authentication of lemon and orange honeys［J］.Food Research International，2011，44，1 504-1 513.

［24］ Tuberoso C I G，Bifulco E，Caboni P，et al.Lumichrome and phenyllactic acid as chemical markers of thistle(Galactites tomentosa Moench)honey［J］.Journal of Agricultural and Food Chemistry，2011，59:364-369.