施貴榮，李冬梅，楊 靜，劉 熙，李兆云，劉光明

（1.大理學(xué)院藥學(xué)與化學(xué)學(xué)院，云南大理 671000；2.大理州食品藥品檢驗(yàn)所，云南大理 671000）

思茅松（Pinus kesiya R.）系松科（Pinaceae）松屬（Pinus）植物，其松塔為該植物的球果，可入藥。現(xiàn)有研究表明，松屬許多植物的松塔提取物有抗腫瘤、抗HIV、抗炎、抗氧化、抗菌、增強(qiáng)免疫力等作用〔1-6〕。在云南省思茅松資源非常豐富，但對(duì)思茅松的利用僅限于采集樹(shù)脂，其松塔常被當(dāng)作燃料燒掉，造成了資源的嚴(yán)重浪費(fèi)。迄今為止，未發(fā)現(xiàn)關(guān)于思茅松藥理活性方面的研究報(bào)道；化學(xué)成分研究報(bào)道較少，主要集中在思茅松樹(shù)脂、松香、松節(jié)油等的化學(xué)成分分析。至今未見(jiàn)關(guān)于松塔部位化學(xué)成分的相關(guān)研究，因此為了更好的開(kāi)發(fā)利用這一資源，本研究以思茅松松塔為研究對(duì)象，系統(tǒng)分離分析其化學(xué)組成，為充分開(kāi)發(fā)利用思茅松松塔奠定理論基礎(chǔ)。

1 儀器與材料

1.1 儀器與試劑 瑞士Büchi R-210型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀；Bruker AM-400型核磁共振儀；瑞士BüchiB686A型中壓液相色譜儀；柱色譜硅膠（80-100目，100-200目，200-300目）及薄層色譜硅膠GF254為青島海洋化工廠產(chǎn)品，RP-18（50 μm）為日本YMC公司產(chǎn)品，Sephadex LH-20為Pharmacia公司產(chǎn)品；其他化學(xué)試劑均為工業(yè)純。

1.2 試驗(yàn)材料 樣品采自云南省思茅市，由大理學(xué)院藥學(xué)與化學(xué)學(xué)院周濃副教授鑒定為思茅松，樣品標(biāo)本保存在大理學(xué)院藥學(xué)與化學(xué)學(xué)院生藥學(xué)教研室。

2 提取與分離

思茅松松塔干燥，粉碎，取樣8 kg用95%乙醇在室溫條件下冷浸提取3次，每次48 h；合并3次提取液濃縮回收乙醇，加蒸餾水分散，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，得石油醚組分（40 g）、乙酸乙酯組分（100 g）、正丁醇組分（77 g）。取乙酸乙酯萃取組分經(jīng)硅膠柱層析，用石油醚：丙酮梯度洗脫（v/v=20∶1，10∶1，8∶2，7∶3，5∶5），得到5個(gè)流分FrA-E。流分FrC共5 g，經(jīng)硅膠柱層析，用石油醚：乙酸乙酯梯度洗脫（v/v=10∶1，9∶1，8∶2，7∶3，6∶4，5∶5），經(jīng)Sephadex LH-20（氯仿：甲醇=1∶1）層析，RP-18柱層析（甲醇：水=4∶6，6∶4，8∶2，10∶0），反復(fù)硅膠柱層析（流動(dòng)相：環(huán)己烷/乙酸乙酯、環(huán)己烷/異丙醇、氯仿/丙酮等）得化合物1（11 mg）、2（35 mg）。流分FrD共30 g，樣品經(jīng)中壓液相色譜（MPLC）處理，填充材料RP-18，用甲醇：水梯度洗脫（v/v=3∶7，4∶6，5∶5，6∶4，7∶3，10∶0），經(jīng)SephadexLH-20（甲醇）層析，反復(fù)硅膠柱層析（流動(dòng)相：環(huán)己烷/乙酸乙酯、環(huán)己烷/異丙醇、氯仿/丙酮等）得化合物3（100 mg）、4（100 mg）、5（15 mg）、6（50 mg）。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1：白色粉末，易溶于氯仿；C20H22O6；1H NMR （400 MHz，CDCl3）δ：6.89 （4H，overlap，H-2，2′，5，5′），6.82（2H，dd，J=1.6，8.2 Hz，H-6，6′），5.66（2H，s，-OH），4.74（2H，d，J=4.3 Hz，H-7，7′），4.24 （2H，dd，J=6.9，8.9 Hz，H-9a，9′a），3.88（2H，dd，J=3.8，9.3 Hz，H-9b，9′b），3.10 （2H，m，H-8，8′），3.90（6H，s，2 × -OCH3）.13C NMR（100 MHz，CDCl3）δ：132.9（s，C-1，1′），108.6（d，C-2，2′），146.7（s，C-3，3′），145.2（s，C-4，4′），114.3（d，C-5，5′），119.0（d，C-6，6′），85.9（d，C-7，7′），54.2（s，C-8，8′），71.7（t，C-9，9′），56.0（q，2 × -OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)〔7〕對(duì)照基本一致，化合物1鑒定為：pinoresinol，（即松脂醇）。

化合物2：白色粉末，易溶于氯仿；C20H23O6；1H NMR（400 MHz，CDCl3）δ：6.80（2H，t，J=8.0 Hz，H-5，5′），6.50 （1H，dd，J=1.8，8 Hz，H-6），6.59～6.60（2H，overlap，H-2′，6′），6.40（1H，d，J=1.8Hz，H-2），4.15（1H，dd，J=7.2，9.2 Hz，H-9a），3.89（1H，dd，J=7.2，9.2 Hz，H-9b），3.81（3H，s，-OCH3），3.80（3H，s，-OCH3），2.95（1H，dd，J=5.2，14.2 Hz，H-7′a），2.86（1H，dd，J=7.0，14.2 Hz，H-7′b），2.43～2.63（4H，m，H-7，8，8′）.13C NMR （100 MHz，CDCl3）δ：129.5（s，C-1），111.5（d，C-2），146.6（s，C-3），144.4（s，C-4），114.1（d，C-5），122.1（d，C-6），34.6（t，C-7），46.6（d，C-8），178.9（s，C-9），129.8（s，C-1′），110.9 （d，C-2′），146.7（s，C-3′），144.5（s，C-4′），114.4（d，C-5′），121.3（d，C-6′），38.3（t，C-7′），41.0（d，C-8′），71.4（t，C-9′），55.8（q，-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)〔8〕對(duì)照基本一致，化合物2鑒定為：matairesinol，（即羅漢松樹(shù)脂酚）。

化合物3：黃色油狀物，易溶于甲醇；C19H21O6；1H NMR（400 MHz，CD3OD）δ：6.99（1H，s，H-2），6.85（1H，d，J=8.0 Hz，H-5），6.78 （1H，d，J=2.7，8.0 Hz，H-6），6.61 （1H，s，H-6′），6.59 （1H，d，J=2.0 Hz，H-2′），5.51（1H，d，J=5.4 Hz，H-7），3.85（1H，m，H-9a），3.80（3H，s，-OCH3），3.77（1H，m，H-9b），3.57（2H，m，H-9′），3.47（1H，m，H-8），2.56（2H，t，J=6.0 Hz，H-7′），1.80 （2H，t，J=6.0 Hz，H-8′）.13C NMR（100 MHz，CD3OD）δ：135.1（s，C-1），110.6（d，C-2），149.1（s，C-3），147.3（s，C-4），116.2（d，C-5），119.8（d，C-6），88.8（d，C-7），55.7（d，C-8），65.1（t，C-9），129.9（s，C-1′），116.8（d，C-2′），141.8（s，C-3′），146.5（s，C-4′），136.8（s，C-5′），117.1（d，C-6′），32.8（t，C-7′），35.8（t，C-8′），62.4（t，C-9′），56.4（q，-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)〔9〕對(duì)照基本一致，化合物3鑒定為：cedrusin。

化合物4：白色粉末，易溶于甲醇，C20H23O6；1H NMR（400 MHz，CD3OD）δ：6.99（1H，s，H-2），6.84（1H，d，J=8.0 Hz，H-5），6.77 （1H，d，J=2.7，8.0 Hz，H-6），6.72（2H，s，H-2′，6′），5.50（1H，d，J=6.4 Hz，H-7），3.84（2H，m，H-9），3.82（3H，s，-OCH3），3.78（3H，s，-OCH3），3.59（2H，t，J=6.4 Hz，H-9′），3.51（1H，dd，J=6.4，12.0 Hz，H-8），2.61（2H，t，J=7.4 Hz，H-7′），1.82 （2H，m，H-8′）.13C NMR（100 MHz，CD3OD）δ：134.8（s，C-1），110.7（d，C-2），149.1（s，C-3），147.5（s，C-4），116.3（d，C-5），119.9（d，C-6），89.1（d，C-7），55.4（d，C-8），65.0（t，C-9），137.0（s，C-1′），114.1（d，C-2′），145.2（s，C-3′），147.5（s，C-4′），130.0（s，C-5′），118.0（d，C-6′），33.0（t，C-7′），35.8（t，C-8′），62.4（t，C-9′），56.8（q，3-OCH3），56.5（q，3′-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)〔10〕對(duì)照基本一致，化合物4鑒定為：dihydrodehydrodiconiferyl alcohol。

化合物5：白色粉末，易溶于甲醇；C21H22O12；1H NMR （400 MHz，CD3OD）δ：7.29 （1H，d，J=2.0 Hz，H-2′），6.99（1H，dd，J=2.0，8.2 Hz，H-6′），6.79（1H，d，J=8.2 Hz，H-5′），5.82 （1H，d，J=2.0 Hz，H-8），5.78（1H，d，J=2.0 Hz，H-6），4.87（1H，d，J=11.6 Hz，H-2），4.73（1H，d，J=7.4 Hz，H-1′′），4.46（1H，d，J=11.6 Hz，H-3），3.78（1H，dd，J=2.1，12.0 Hz，H-6′′a），3.56（1H，dd，J=5.8，12.0 Hz，H-6′b），3.22～3.44（4H，m，H-2′′，3′′，4′′，5′′）.13C NMR（100 MHz，CD3OD）δ：84.9（d，C-2），73.5（d，C-3），198.5（s，C-4），168.7（s，C-5），97.4（d，C-6），165.3（s，C-7），96.4（d，C-8），164.5（s，C-9），101.9（s，C-10），130.0（s，C-1′），118.2（d，C-2′），146.6（s，C-3′），149.0（s，C-4′），116.9（d，C-5′），124.7（d，C-6′），104.1（d，C-1′′），74.9（d，C-2′′），77.6（d，C-3′′），71.5（d，C-4′′），78.4（d，C-5′′），62.6（t，C-6′′）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)〔11〕對(duì)照基本一致，化合物5鑒定為：4′，5，7-trihydroxyflavanon ol-3′-O-β-D-glucopyranos-ide，（即二氫槲皮素-3′-O-β-D-吡喃葡萄糖苷）。

化合物6：黃色粒狀結(jié)晶，易溶于甲醇；C7H6O4；1H NMR（400 MHz，CD3OD）δ：7.46（1H，s，H-2），7.43（1H，d，J=4.4 Hz，H-6），6.82（1H，d，J=8.4 Hz，H-5），13C NMR （100 MHz，CD3OD）δ：121.7 （s，C-1），116.3（d，C-2），144.7（s，C-3），150.2（s，C-4），114.4（d，C-5），122.5（d，C-6），168.9（s，COOH）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)〔12〕對(duì)照基本一致，化合物6鑒定為：3，4-dihydroxybenzoic acid，（即3，4-二羥基苯甲酸）。

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