曹授俊 喬立東 關文怡 雷莉輝 蔡澤川 （北京農(nóng)業(yè)職業(yè)學院 北京 房山 102442）

中草藥飼料添加劑均為天然物質(zhì)，由于含有多種氨基酸、維生素、微量元素及生物活性物質(zhì)，能夠調(diào)節(jié)機體免疫功能、促進動物生長發(fā)育、提高生產(chǎn)性能及畜產(chǎn)品質(zhì)量，干擾和破壞病原微生物的代謝功能，發(fā)揮非特異性抗菌作用，從而產(chǎn)生較強的抑殺病原體的作用，不易產(chǎn)生耐藥性和殘留，安全性強，已成為當前國內(nèi)外研究的熱點。我國中草藥藥源廣泛，資源豐富，價格較低，加工方便，市場前景廣闊。中藥復方“健脾消食散”添加劑是由黃芪、黨參、白術、茯苓、扁豆、神曲、山楂、麥芽等按一定的組成的復方中藥添加劑，具有“益氣健脾、增強免疫”功效。其本試驗利用雞作為實驗動物，探討中藥復方“健脾消食散”添加劑對雞十二指腸黏膜結構的影響，旨在研制出一種高效低成本的中藥添加劑。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗藥物 試驗藥物復方中藥添加劑由黃芪、黨參、白術、茯苓、扁豆、神曲、山楂、麥芽組成(購自北京同仁堂)，所有中草藥均烘干(60～65℃)，粉碎，過0.42mm (40目)篩，按一定的比例混合。

1.1.2 主要儀器和試劑 YD-2508III病理切片機(金華市 益迪醫(yī)療設備有限公司生產(chǎn))；BA400型生物顯微鏡（麥克奧迪實業(yè)集團有限公司生產(chǎn)）。Moticam Pro 285A病理分析軟件(麥克奧迪實業(yè)集團有限公司生產(chǎn))。

1.1.3 試驗動物和試驗條件 健康1日齡體重接近的蘭灰祖代蛋雛雞200只(購自北京農(nóng)業(yè)職業(yè)學院農(nóng)業(yè)發(fā)展中心)，雌雄各半，常規(guī)飼養(yǎng)至49日齡備用。自動供水，自由采食喂養(yǎng)。

1.2 試驗方法

將健康1日齡體重接近的蘭灰祖代蛋雛雞200只隨機分為空白對照組、藥物對照組、低劑量組、中劑量組、高劑量組5組，每組40只。于21日齡對5組雛雞用新城疫Ⅳ系弱毒疫苗進行滴鼻點眼，同時對低劑量組、中劑量組、高劑量組雛雞分別按照飼喂量的0.5%、1.0%、1.5%添加健脾消食散，連續(xù)7d，試驗周期為49d。各組雛雞按常規(guī)方法在相同的條件下進行飼養(yǎng)管理。分別于49日齡時每組隨機各取10只剖殺，迅速取出十二指腸取6～9cm，浸入新配置的生理鹽水涮洗掉內(nèi)容物后，每段再分為4份，分別浸放Bouins固定、85%酒精固定液、4%多聚甲醛磷酸緩沖液(0.1mol/L，pH7.4)中，固定48h時后經(jīng)制作石臘切片，常規(guī)HE染色待檢。

1.3 檢測指標

每個腸管取5張切片，每張切片選取5個最長腸絨毛的長度、最深隱窩深度和最厚黏膜厚度以及最厚腸壁厚度，經(jīng)Moticam Pro 285A病理分析軟件測定十二指腸黏膜厚度、肌層厚度、絨毛高度、絨毛高度與隱窩深度比(C/V)。

2 統(tǒng)計學處理

3 結果

由附表結果表明：藥物對照組、中藥低、中、高劑量組的十二指腸黏膜厚度、肌層厚度、絨毛高度和C/V值都有顯著高于空白對照組(P<0.05)。1.0%劑量組黏膜厚度顯著高于0.5%劑量組，但與藥物對照組和1.5%劑量組差異不顯著；1.5%劑量組十二指腸肌層厚度顯著高于藥物對照組、0.5%劑量組、1.0%劑量組，但1.0%劑量組十二指腸肌層厚度與藥物對照組差異不顯著；空白對照組、藥物對照組、0.5%劑量組、1.0%劑量組、1.5%劑量組各組之間十二指腸絨毛高度差異顯著，1.5%劑量組最大；藥物對照組、0.5%劑量組、1.0%劑`量組各組之間十二指腸C/V值差異不顯著，1.5%劑量組十二指腸C/V值顯著高于、0.5%劑量組、1.0%劑量組，但與藥物對照組差異不顯著。

附表 健脾消食散對雞十二指腸黏膜結構的影響(SD) (mm)

附表 健脾消食散對雞十二指腸黏膜結構的影響(SD) (mm)

注：表中同一列凡有一個標記相同字母的即為差異不顯著(P> 0.05)，凡具不同標記字母的即為差異顯著P<0.05。

組別 黏膜厚度 肌層厚度 絨毛高度 C/V(%)空白對照組1425.71±15.15a604.82±5.22a 1182.39±14.65a6.34±0.48a藥物對照組1524.28±15.08b865.19±19.43b 1216.86±7.52b6.79±0.07bc 0.5%劑量組1485.69±14.43c829.26±11.39c 1196.33±7.28c6.89±0.12b 1.0%劑量組1533.66±13.62bd861.74±19.08b 1233.14±15.89d6.77±0.09b 1.5%劑量組 1545.92±9.61d883.68±12.73d 1236.75±17.31d7.06±0.11c

4 討論

小腸絨毛是吸收養(yǎng)分的重要部位，機體抵御感染的重要環(huán)節(jié)[1-2]，是動物有機體抵抗病原微生物入侵的第一道免疫屏障。小腸絨毛高度、隱窩深度及V/C值是衡量小腸消化吸收功能的重要指標[3]，腸絨毛高度與細胞數(shù)量顯著相關，當絨毛變高時，腸上皮細胞數(shù)量增多，對養(yǎng)分的吸收能力高。隱窩深度反映了細胞生成率，細胞不斷從隱窩基都向絨毛端部遷移、分化，以補充絨毛上皮的正常脫落。隱窩細胞生長速率減慢會造成腸絨毛萎縮。隱窩變淺，表明細胞成熟率上升，吸收分泌功能增強。V/C值反映了小腸的功能狀態(tài)，比值上升，黏膜膜改善，消化吸收功能[4]。本研究結果表明：中藥復方“健脾消食散”添加劑0.5%劑量、1.0%劑量、1.5%劑量都能夠顯著提高雞小腸的十二指腸黏膜厚度、肌層厚度、絨毛高度、絨毛高度與隱窩深度比(C/V)。其中1.0%劑量與藥物對照組對雞十二指腸小腸黏膜厚度、肌層厚度、絨毛高度與隱窩深度比(C/V)差異不顯著，綜合評價以添加1.0%中藥復方“健脾消食散”添加劑能達到與藥物對相似的效果。

[1]Mick B, Karin H.The postnal development of the mucosal immunesystem and mucosal tolerancein domestic aminals[J].EDP Siences, 2006, 37: 443-453.

[2]Martin F.Mucosal immunology:New frontiers[J].Immunol Today, 1996, 17(2): 57-59.

[3]蔣桂韜, 胡艷, 王向榮等.不同來源木聚糖酶對黃羽肉雞小面絨毛形態(tài)結構和黏膜生長抑素mRNA表達的影響[J].動物營養(yǎng)學報, 2011, 23(2): 266-273.

[4]王子旭, 余銳萍, 陳越等.日糧鋅硒永乎對肉雞小腸動膜結構的影響[J].中國獸醫(yī)科技, 2003, 33(7): 18-21.