李吉華

山東中醫(yī)藥大學(xué)實驗中心，山東 濟南 250355

鵝不食草醇提取物抑菌作用研究

李吉華

山東中醫(yī)藥大學(xué)實驗中心，山東 濟南 250355

目的：通過抑菌試驗了解中藥鵝不食草乙醇提取物的抗菌活性。方法：試驗采用紙片擴散法測定乙醇提取物對福氏志賀菌、金黃色葡萄球菌、變形桿菌、枯草芽胞桿菌、銅綠假單胞菌、大腸埃希菌、藤黃微球菌、釀酒酵母的抗菌活性。采用試管比濁法測定其最小抑菌濃度。結(jié)果：鵝不食草提取物除福氏志賀菌、銅綠假單胞菌、釀酒酵母無抑菌活性外，對其余菌株均有抑菌作用，尤其對金黃色葡萄球菌的抑菌活性顯著。結(jié)論：鵝不食草有較好的抑菌效果，在臨床抗菌消炎方面有極大地優(yōu)勢。

鵝不食草；醇提物；抑菌

1 概述

鵝不食草為菊科植物鵝不食草Epaltes aistralis Less.的干燥全草，收載于 《中國藥典》2005版Ⅰ部。又名石胡荽、食胡荽、雞腸草［1］。系一年生小草本，生于水邊濕地荒，野蔭濕地，公園溫室，花盆潮濕處等，分布于全國各省區(qū)，為常用藥材。在 《品匯精要》中就對鵝不食草有所描繪 “此草鵝皆不食，故名鵝不食草?！北酒肺犊?，微辛，屬傳統(tǒng)解表類中藥，具有祛風(fēng)散寒、通鼻利竅、明目去翳止咳化痰等功效，臨床主要用于治療風(fēng)寒頭痛、咳嗽、跌打扭傷、百日咳、瘧疾、急慢性鼻炎、過敏性鼻炎等癥［2］。鵝不食草化學(xué)成分復(fù)雜，主要為揮發(fā)油、甾醇類、黃酮類、三萜類化合物等［3］。鵝不食草具有廣泛的藥理作用，包括抗過敏、抗炎、抗誘變、抗癌等［4］。資源豐富，應(yīng)用廣泛，具有較高的藥用和研究價值。為了更深入的研究鵝不食草的抑菌活性，本文對鵝不食草的乙醇提取物的抗菌性進行試驗，旨在了解其抗菌活性，為其臨床使用和質(zhì)量控制提供理論依據(jù)。

2 材料與方法

2.1 提取物的制備［5－7］稱取鵝不食草全草干粉300g，于燒杯中加60%乙醇4200m l，在超聲波中50℃處理30 m in，重復(fù)操作2次，抽濾后合并濾液，將濾液用RE－ 540旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀在40℃下恒溫下蒸發(fā)至無乙醇，于真空冷凍干燥機內(nèi)處理后置冰箱保存，待用。使用時取鵝不食草提取物，用60%乙醇溶解，配置不同濃度溶液即可。

實驗中所用福氏志賀菌、金黃色葡萄球菌、變形桿菌、枯草芽胞桿菌、銅綠假單胞菌、大腸埃希菌、藤黃微球菌、釀酒酵母等由山東中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院微生物學(xué)實驗室提供。

2.2 鵝不食草乙醇提取物的抗菌活性測定 用紙片擴散法進行試驗，藥敏紙片和培養(yǎng)基的制備按照參考文獻［8］的方法進行。把鵝不食草的乙醇提取物配成500 mg/ml的供試液，將提前制備好的紙片放入供試液中浸泡2h，取出紙片放入40℃的烘箱中烘干。將濃度為106ml－1的福氏志賀菌、金黃色葡萄球菌、變形桿菌、枯草芽胞桿菌、銅綠假單胞菌、大腸埃希菌、藤黃微球菌、釀酒酵母分別均勻的涂抹在瓊脂培養(yǎng)基上。然后，將制備好的藥敏片均勻貼于培養(yǎng)基的3個位點，把培養(yǎng)基置于37℃恒溫箱中培養(yǎng)18小時。分別測定抑菌圈的直徑，最后取3個重復(fù)的平均值為最終結(jié)果。

用無菌水做對照，其中陽性對照為各菌株對應(yīng)的抗生素 （表1）。

表1 不同菌株所用的抗生素

2.3 最低抑菌（MIC）濃度測定 采取試管比濁法［9，10］。簡言之，配制系列肉湯培養(yǎng)基，分別加入50μL細菌的懸濁液，最后一管補加50μL肉湯。對各管進行比濁后，將未見細菌生長的試管內(nèi)肉湯轉(zhuǎn)移到干凈的培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)（37℃條件下培養(yǎng)18～24h）。培養(yǎng)基上未見細菌生長的最低藥物濃度為最低抑菌濃度。

3 結(jié)果與討論

鵝不食草乙醇提取物的抗菌活性進行試驗 （表2）。

表2 鵝不食草乙醇提取物對8種菌的抑菌環(huán)活性（mm）

鵝不食草醇提取物對福氏志賀菌、銅綠假單胞菌、釀酒酵母無抑菌活性，對另外5種菌均有抑菌活性，抑菌圈直徑：金黃色葡萄球菌＞藤黃微球菌＞大腸埃希菌＞枯草芽胞桿菌＞變形桿菌。最小抑菌濃度由小到大為：金黃色葡萄球菌＝藤黃微球菌＝枯草芽胞桿菌＜變形桿菌＝大腸埃希菌。有表可知鵝不食草提取物對福氏志賀菌、銅綠假單胞菌、釀酒酵母無抑菌活性。此外，鵝不食草醇提物的最低抑菌濃度為0.125mg/ml（表2）。綜合鵝不食草的抑菌直徑和最低抑菌濃度，我們認為鵝不食草對金黃色葡萄球菌抑菌活性顯著。

3.2 討論 鵝不食草廣泛用于治療治療過敏性鼻炎，有明顯的減輕鼻塞的功效［11］，臨床上把鵝不食草做成噴霧劑來治療鼻炎，使藥直接作用在病變部位［12］。試驗顯示，鵝不食草醇提物的MIC為0.125mg/ml，說明了鵝不食草有較好的抑菌效果，由于鵝不食草含有多種化學(xué)成分如三萜類成分、揮發(fā)油、黃酮類、氨基酸、豆甾醇、有機酸等［13］，據(jù)此推測鵝不食草在臨床抗菌消炎方面有極大地優(yōu)勢。紙片擴散法測定醇提物抗菌活性試驗中，醇提物對福氏志賀菌、銅綠假單胞菌、釀酒酵母無抑菌活性，但對金黃色葡萄球菌、藤黃微球菌、大腸埃希菌、枯草芽胞桿菌、變形桿菌有明顯的抑菌圈，抑菌活性明顯，尤其是對臨床常見菌株金黃色葡萄球菌的活性表明，鵝不食草具有良好的抑菌效果，臨床藥用價值可待。

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Antibacterial activities of ethanol extract from Centipeda minima

Li Jihua
Experimental center of Shandong University of Traditional Chinese Medicine，Jinan，250355

Objective：To explore the antimicrobial activity of traditional Chinese medicine（TCM）Centipeda using bacteriostatic test.Methods：The antimicrobial activity of Centipeda ethanol extraction to to Shigella bacteria，Staphylococcus aureus，Proteusbacillus vulgaris，Bacillus subtilis，Pseudomonas aeruginosa，Escherichia coli，Micrococcus luteus and Saccharomyces cerevisiae were studied by means of the disc diffusion.The minimum inhibitory concentration（MIC）was analyzed by tube nephelometry.Results：Centipeda ethanol extractions have bacteriostasis except to Shigella bacteria，Pseudomonas aeruginosa，Saccharomyces cerevisiae and have significant antibacterial activity to staphylococcus aureus.ConclusionCentipeda：minima has better bacteriostasis effect，and has great advantages in the clinical antibacterial anti－inflammatory.

Centipeda minima；Alcohol extract；antibacterial activity

R284.1

A

1007－8517（2013）14－0028－02

2013.05.23）

李吉華 （1965－），男，現(xiàn)任山東中醫(yī)藥大學(xué)實驗室管理處處長、實驗中心主任，副主任藥師。主要研究方向為中藥制劑和藥物成分分析。Email：ljh＿sdutcm＠126.com