葉保國，聞春艷，王 薇，朱慶三，宋雪松＊

（1.吉林大學(xué)第一醫(yī)院 麻醉科，吉林 長春 130021；2.吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院 病理科，吉林 長春 130033；3.吉林大學(xué)第一醫(yī)院 脊柱外科，吉林 長春 130021）

我國有悠久的大豆栽培歷史，大豆產(chǎn)品是我國人民日常生活不可缺少的食品。大豆不僅富含優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)和油脂，且還含有大量具有生理活性的物質(zhì)，包括大豆皂甙、大豆磷脂、低聚糖類等［1］；其中對大豆皂甙的研究，近年來有資料表明大豆皂甙能降低血糖、保護(hù)心血管系統(tǒng)、抗癌癥以及抗衰老作用［2］，但大豆皂甙對糖尿病大鼠作用的研究在國內(nèi)外尚未見相關(guān)報道，本實驗旨在觀察大豆皂甙對糖尿病大鼠腎臟自由基防御機(jī)能的作用，為大豆皂甙廣泛應(yīng)用于臨床以及預(yù)防保健提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實驗動物和主要試劑 190－210 g健康雄性Wistar大鼠45只，由吉林省藥品檢驗所提供（合格證號960101032）；大豆皂甙（SS）由吉林省中醫(yī)中藥研究所提供；實驗用大豆皂甙用生理鹽水稀釋；鏈脲佐菌素（STZ）購于Sigma公司、SOD、CAT、LPO、GSH－Px試劑盒購于南京建成生物有限公司。

1.2 糖尿病模型制備 在實驗分組前，首先制備糖尿病模型，隨機(jī)取實驗動物35只，腹腔注射STZ（用新配制的枸櫞酸緩沖液溶解）50 mg／Kg；48小時后采尾血測空腹血糖，濃度大于16.7 mmol／L為模型復(fù)制成功［3］，該模型成功30只。

1.3 實驗分組及給藥 取未造模的10只動物做正常對照組，造模成功的30只動物隨機(jī)分為糖尿病對照組（15只）、大豆皂甙給藥組（15只），大豆皂甙給藥組每日灌胃大豆皂甙10 mg／Kg，正常對照組及糖尿病對照組均每日給與等劑量生理鹽水，連續(xù)給藥3個月。在實驗過程中糖尿病對照組動物死亡4只、大豆皂甙給藥組動物死亡1只。

1.4 實驗后的處理 各組均取10只動物取材，實驗結(jié)束次日清晨處死，稱量體重。取腎組織手動勻漿，2 000 g離心，留上清待測；采用 NBT［4］法檢測腎組織中超氧化物歧化酶（SOD）含量、滴定法［5］測定CAT含量、TBA［6］法檢測腎組織中脂質(zhì)過氧化物（LPO）含量、DTNB法［7］測定 GSH－Px的含量；測試儀器為南京儀器設(shè)備廠722型分光光度計。

1.5 統(tǒng)計學(xué)分析 大鼠體重及腎組織的各指標(biāo)（SOD、CAT、LPO、GSH－Px）均以±s表示，應(yīng)用SPSS19.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理，多個樣本均數(shù)間比較采用方差分析。

2 結(jié)果

2.1 大鼠的體重 對照組：大鼠精神狀態(tài)好、皮毛光滑、體重明顯增加、反應(yīng)靈敏；糖尿病組：大鼠明顯消瘦，精神萎靡，毛皮無光澤，反應(yīng)遲鈍。大豆皂甙給藥組：大鼠體重、精神狀態(tài)、毛皮光澤和反應(yīng)度較對照組差，但明顯好于糖尿病組。

2.2 大鼠腎臟超氧化物歧化酶（SOD）含量的檢測與對照組比較，糖尿病對照組顯著降低（P＜0.01）；大豆皂甙治療組略微降低無顯著差異（P＞0.01），見表1。

2.3 大鼠腎臟過氧化氫酶（CAT）含量的檢測 與對照組比較，糖尿病對照組顯著降低（P＜0.01）；大豆皂甙治療組略微降低無顯著差異（P＞0.01），見表1。

2.4 大鼠腎臟脂質(zhì)過氧化物（LPO）含量的檢測與對照組比較，糖尿病對照組顯著升高（P＜0.01）；大豆皂甙治療組略微升高無顯著差異（P＞0.01），見表1。

2.5 大鼠腎臟谷胱甘肽過氧化物酶（GSH－Px）含量的檢測 與對照組比較，糖尿病對照組顯著升高（P＜0.01）；大豆皂甙治療組略微升高無顯著差異（P＞0.01），見表1。

表1 大豆皂甙作用下Wistar大鼠SOD、CAT、LPO和GSH－Px含量的變化（n＝10，±s）Group SOD（U／ml）CAT（U／ml）LPO（nmol·g－1）GSH－Px（U／ml）Control 13.48±0.72 1.44±0.31 284.32±4.17 20.63±1.43 Diabetic model 7.45±0.28＊ 0.83±0.11＊ 487.13±6.49＊ 41.36±2.04＊SS treatment 13.06±0.91△ 1.36±0.25△ 310.13±6.37△ 21.03±1.26△＊P＜0.01，△P＞0.01 compared with control group；

3 討論

大豆皂甙有降血脂、抗氧化、抑制腫瘤、抗血栓、抗病毒、免疫調(diào)節(jié)、減肥、調(diào)節(jié)糖代謝等多種生物活性［8－10］。自由基廣泛存在于生物體內(nèi)，正常條件下對機(jī)體起保護(hù)作用，消滅體內(nèi)有害無用的物質(zhì)，機(jī)體內(nèi)也存在一整套抗氧化系統(tǒng)，消除多余的自由基，自由基可以由體內(nèi)代謝產(chǎn)生或由外界進(jìn)入人體內(nèi)，如果血液中一些“垃圾”和毒素不能及時消除，便會形成自由基，如果環(huán)境中的一些有毒物質(zhì)通過呼吸、皮膚接觸而進(jìn)入人體，也會沉淀成自由基。自由基能破壞機(jī)體細(xì)胞膜，甚至到切斷DNA鏈，從而加速細(xì)胞的衰老，降低機(jī)體的免疫功能，甚至起到誘發(fā)腫瘤等極壞的作用［11］。目前已經(jīng)查明能對抗自由基的物質(zhì)有維生素C、輔酶Q、谷胱甘肽、過氧化氫酶、超氧化物岐化酶（SOD）等。SOD被認(rèn)為是消除自由基、抗腫瘤、抗衰老、提高機(jī)體免疫力、限制炎癥等方面最有價值的物質(zhì)，它是1968年由 Mocord和Fmidovich發(fā)現(xiàn)的。超氧化物歧化酶是直接的抗氧化酶，抑制體內(nèi)脂肪和蛋白質(zhì)過氧化反應(yīng)速度提高機(jī)體免疫力；過氧化氫酶是過氧化物酶體的標(biāo)志酶，LPO反應(yīng)了機(jī)體脂質(zhì)受活性氧／自由基攻擊受損的程度［12］。

腎臟有完整的抗氧化酶保護(hù)系統(tǒng)，主要有SOD、CAT和GSH－Px等，他們對防御自由基損傷有重要作用。本研究結(jié)果表明，大豆皂甙能夠提高糖尿病大鼠腎臟SOD和CAT含量，降低LPO和GSH－Px含量，提示大豆皂甙對糖尿病大鼠腎臟自由基防御機(jī)能具有一定的保護(hù)作用，其具體的調(diào)節(jié)機(jī)制、保護(hù)機(jī)理是否具有相關(guān)性還有待于進(jìn)一步的研究。

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