何育英 蔡巧青

Fas/FasL系統(tǒng)在 RSA患者蛻膜與絨毛組織的表達(dá)及臨床意義

何育英 蔡巧青

目的 探討反復(fù)自然流產(chǎn)患者蛻膜與絨毛組織Fas/fasL的表達(dá)和研究其臨床意義。方法

采用免疫組化法檢測33例反復(fù)自然流產(chǎn)患者絨毛組織Fas/FasL的表達(dá)水平，并以30例健康早孕組為對照。結(jié)果反復(fù)自然流產(chǎn)患者蛻膜與絨毛組織FasL低于對照組，數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)比較具有顯著差異(P＜0.05)，蛻膜組織Fas數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)比較具有(P＞0.05)，而絨毛組織卻無顯著差異。結(jié)論反復(fù)自然流產(chǎn)患者蛻膜與絨毛組織的Fas/FasL失衡可能是反復(fù)自然流產(chǎn)的原因之一，需加以重視。

反復(fù)自然流產(chǎn);蛻膜;絨毛組織;Fas/FasL

反復(fù)自然流產(chǎn)(RSA)是婦產(chǎn)科常見病，約40%～60%不明原因。近年來多數(shù)研究表明，正常妊娠中母體對胚胎的免疫反應(yīng)以Th2體液免疫為主，而Th1細(xì)胞免疫過強(qiáng)極有可能導(dǎo)致流產(chǎn)。細(xì)胞凋亡已被公認(rèn)為是引起免疫耐受的一個(gè)重要機(jī)理，其中致凋亡基因Fas和其配體FasL在細(xì)胞凋亡中起關(guān)鍵作用。妊娠期Th1/Th2型細(xì)胞因子失衡與Fas/FasL介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡關(guān)系密切。本文主要研究本文研究RSA患者蛻膜和絨毛組織Fas、FasL表達(dá)水平，探討Fas/FasL系統(tǒng)在RSA發(fā)病機(jī)制及對臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 從2010年10月至2011年10月在深圳市鹽田區(qū)計(jì)生中心經(jīng)過婦檢，B超，尿HCG都正常無不孕，無死胎或流產(chǎn)史，要求人流的婦女30例為正常早孕組。年齡25～36歲，平均(29.5±2.6)歲，孕周7～10周，平均(9.1± 1.3)周，孕次2～4次，平均(2.5±1.2)次。同期經(jīng)我中心排除因遺傳，感染及血型不合，抗精子抗體陽性等因素，確診為RSA的婦女33例為研究組。年齡26～37歲，平均(30.1± 3.1)歲，孕周9-11周，平均(10.2±1.7)周，孕次3～7次，平均(5.1±2.2)次。以上年齡，孕周，孕次比較，P＞0.05，無顯著性差異

1.2 設(shè)備及試劑 采用艾美捷科技有限公司的鼠抗人 Fas單克隆抗體，鼠抗人FasL單克隆抗體S-P超敏法試劑盒，按照試劑盒說明書進(jìn)行操作。

1.3 標(biāo)本收集和處理 ①兩組于術(shù)后留取標(biāo)本妊娠組織，置于10%中性甲醛溶液中固定8～24 h，低溫石蠟包埋，制成蠟塊，置-20℃冰箱干燥保存，待切片及免疫組化染色。②結(jié)果判讀黃色顆粒為陽性標(biāo)準(zhǔn)，每張切片隨機(jī)取5個(gè)高倍視野，陽性細(xì)胞比例＜10%，陰性。10%～25%，陽性(+)。25%～50%，陽性(++)。＞50%，陽性(+++)。③采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)處理軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料采用均值±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 對照組和研究組在滋養(yǎng)層細(xì)胞組織中的表達(dá)

2.2 對照組與研究組Fas、FasL在蛻膜和絨毛的表達(dá)比較，見表3。

表1 Fas在正常早孕、反復(fù)流產(chǎn)患者滋養(yǎng)層細(xì)胞組織中的表達(dá)

表2 FasL在正常早孕、反復(fù)流產(chǎn)患者滋養(yǎng)層細(xì)胞組織的表達(dá)(例)

表3 對照組與研究組蛻膜組織比較(例)

表4 對照組與研究組絨毛組織組織比較(例)

2.3 小結(jié)

2.3.1 就對照組而言，研究組滋養(yǎng)層細(xì)胞組織Fas表達(dá)無顯著差異(P＞0.05)，而FasL表達(dá)下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

2.3.2 就對照組而言，研究組蛻膜組織中Fas表達(dá)增強(qiáng)，差異顯著(P＜0.05)，F(xiàn)asL表達(dá)下降，差異顯著(P＜0.05)。

2.3.3 就對照組而言，研究組絨毛組織中Fas表達(dá)無顯著差異(P＞0.05)，而FasL表達(dá)下降。

3 討論

Fas，為Ⅰ類膜蛋白分子，F(xiàn)asL為Ⅱ類膜蛋白分子，也稱Apo-1或CD95，屬于腫瘤壞死因子/神經(jīng)生長因子受體家族之一。細(xì)胞凋亡的過程主要由Fas/FasL介導(dǎo)Fas與FasL之間的相互作用［1］。Reinhard等［2］證實(shí)，妊娠期 Th1/Th2型細(xì)胞因子失衡與Fas/FasL介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡關(guān)系密切。妊娠期由于胎兒大量異體抗原進(jìn)入母體機(jī)體，促使大量T淋巴細(xì)胞被激活，發(fā)生克隆擴(kuò)增并發(fā)生免疫反應(yīng)作用［3］，Th1型淋巴細(xì)胞表達(dá)大量Fas，機(jī)體FasL與其結(jié)合后凋亡，最終導(dǎo)致表達(dá)Fas的 Th1細(xì)胞大量凋亡，數(shù)目減少，具有胚胎毒性作用的Th1細(xì)胞功能下降，利于妊娠成功。研究發(fā)現(xiàn)，RSA患者與正常妊娠者在滋養(yǎng)層細(xì)胞組織，蛻膜組織組絨毛組織中，F(xiàn)as/ FasL系統(tǒng)表達(dá)異常［4］，這與Minchevanilsson等［5］和趙亮［6］的結(jié)論一致。機(jī)體主要通過Fas/FasL信號(hào)誘導(dǎo)母體淋巴細(xì)胞的凋亡，使胎兒能夠免疫逃避母體的溶細(xì)胞毒性，從而保證妊娠的順利進(jìn)行。而流產(chǎn)患者滋養(yǎng)細(xì)胞FasL表達(dá)下降，F(xiàn)as表達(dá)增強(qiáng)。一方面由于FasL的表達(dá)下降，被異體抗原刺激而大量激活的Th1細(xì)胞不能通過Fas/FasL介導(dǎo)的AICD機(jī)制失活，從而使過度活化的Th1型T淋巴細(xì)胞高度表達(dá)Fas，導(dǎo)致Fas表達(dá)增強(qiáng)，另一方面，由于Fas/FasL介導(dǎo)的AICD機(jī)制失活，大量被激活的T淋巴細(xì)胞產(chǎn)生Th1型細(xì)胞因子，最終導(dǎo)致流產(chǎn)［7］。Fas/FasL系統(tǒng)表達(dá)異常使妊娠期Th1/Th2型細(xì)胞因子失衡、母-胎免疫排斥［8］，可能在反復(fù)流產(chǎn)免疫病因中起重要作用［9］。廖丹等［10］報(bào)道，RSA患者可通過免疫治療后，促進(jìn)機(jī)體向Th2淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化，或范舒舒［11］等主動(dòng)免疫治療可通過改變淋巴細(xì)胞Fas/FasL的表達(dá)水平，改善細(xì)胞免疫狀態(tài)取得療效。調(diào)節(jié)優(yōu)勢應(yīng)答的類型，達(dá)到早預(yù)防，早治療，達(dá)到妊娠成功的目標(biāo)。

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The expression of the Fas/Fas Ligand(FasL)of the deciduas and the villus trophoblasts in RSA and study their clinical significance．

HE Yu-ying，CAI，Qiao-qing.Population and Famaily Planning Center of TanTian，Shenzhen 518000，China

Objective To discuss the expression of the Fas/Fas Ligand(FasL)of the deciduas and the villus trophoblasts in patient with RSA and study their clinical significance.MethodsThe level of Fas/FasL of the deciduas and the villus trophoblasts in 33 patient with RSA were measured by immunohistochenical.30 normal pregnant women made up the reference.Resultsthe level of FasL of the deciduas and the villus trophoblast in patient with RSA was significantly lower than the health group，the level of Fas of decidus was significantly different while the villus trophoblasts is no.ConclusionThe balance of Fas/FasL of the villus trophoblast is one of the important reason to the recurrent spontaneous abortion.We should pay more attention to it．

Recurrent spontaneous abortion;Deciduas;the villus trophoblasts;Fas/FasL．

518000深圳市鹽田區(qū)鹽田街道計(jì)生中心(何育英);深圳市北京大學(xué)深圳醫(yī)院婦產(chǎn)科(蔡巧青)