王悅，鄭琳琳，佟永薇，王人悅

（1.譜尼測(cè)試科技（天津）有限公司，天津300100；2.天津市食品研究有限公司，天津301609）

生活飲用水中細(xì)菌總數(shù)一直是備受公眾關(guān)注的指標(biāo)，是影響人們身體健康和生活品質(zhì)的重要方面，本研究對(duì)飲用水中的菌落總數(shù)進(jìn)行了不確定度分析，以期找出影響測(cè)量結(jié)果不確定度的各種因素，進(jìn)行逐項(xiàng)分析及評(píng)定，為評(píng)定測(cè)量結(jié)果質(zhì)量提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 儀器和試劑

測(cè)定儀器：DHP-600S 電熱恒溫培養(yǎng)箱：天津中環(huán)試驗(yàn)電爐有限公司。

試劑：氯化鈉（分析純）；營(yíng)養(yǎng)瓊脂（BR）。

1.2 檢測(cè)方法

檢驗(yàn)依據(jù)：GB/T 5750.12—2006《生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法微生物指標(biāo)》[1]。

1.3 樣品的制備

以無(wú)菌操作取樣品原液及充分混勻后經(jīng)10 倍和100 倍稀釋的稀釋液作檢測(cè)，每個(gè)稀釋度做2 個(gè)平衡樣，各取生活飲用水原液及稀釋液1 mL，分別注入平皿中，立即傾注15 mL～20 mL 冷卻到45 ℃～50 ℃的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，旋轉(zhuǎn)平板，將培養(yǎng)基與樣液充分混合，待瓊脂凝固后，翻轉(zhuǎn)平皿，置36 ℃的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48 h，并做平行樣。計(jì)數(shù)菌落總數(shù)并報(bào)告。

2 結(jié)果與討論

2.1 數(shù)學(xué)模型

由于測(cè)量結(jié)果具有發(fā)散性，與之相比其他不確定度來(lái)源均可以忽略不計(jì)[2]，僅考慮由測(cè)量結(jié)果散發(fā)引入的不確定度分量。此次檢測(cè)數(shù)學(xué)模型可以簡(jiǎn)單地寫(xiě)為：

設(shè)菌落總數(shù)為A，檢測(cè)結(jié)果為X，則A=X cfu/mL

2.2 原因分析

在微生物檢驗(yàn)中，樣品中細(xì)菌分布的均勻性和重復(fù)測(cè)量帶來(lái)的不確定度是影響檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確度的主要原因[3]。而B(niǎo) 類(lèi)不確定度分量對(duì)合成不確定度影響較少。按GB/T 5750.12-2006《生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法微生物指標(biāo)中細(xì)菌總數(shù)測(cè)定》中方法，同一樣品每個(gè)稀釋度做兩個(gè)平行樣，因此可采用合并樣本標(biāo)準(zhǔn)差來(lái)求得檢測(cè)結(jié)果的不確定度，見(jiàn)表1。

從檢驗(yàn)結(jié)果可知，根據(jù)貝賽爾公式計(jì)算檢測(cè)結(jié)果對(duì)數(shù)值的合并樣品標(biāo)準(zhǔn)差：

P 代表平均值；n 為測(cè)定次數(shù)。

表1 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果記錄Table 1 Laboratory test results recorded

2.3 擴(kuò)展不確定度評(píng)定

擴(kuò)展不確定度為：u=kuc，取置信水平p=95%，自由度為19，查t 表分布得：t95（19）=2.093，故u=2.093×0.016 2=0.033 9。

3 測(cè)量不確定度報(bào)告

X 為測(cè)試結(jié)果，X1，X2為重復(fù)測(cè)試的結(jié)果，所以在95%置信水平，此測(cè)試方法之不確定度為0.033 9。當(dāng)檢查結(jié)果以平衡樣結(jié)果取對(duì)數(shù)值的平均值表示時(shí)，其取值區(qū)間分布于X±0.033 9 之間。當(dāng)檢測(cè)結(jié)果以平衡樣結(jié)果平均值表示時(shí)，相對(duì)于對(duì)數(shù)值的取值再取反對(duì)數(shù)得其取值區(qū)間。這個(gè)取值區(qū)間適合于任何一次檢測(cè)。

4 結(jié)論

通過(guò)對(duì)飲用水中菌落總數(shù)含量的不確定度來(lái)源進(jìn)行分析，并對(duì)其不確定度分量進(jìn)行評(píng)定，得出該分析方法的相對(duì)擴(kuò)展不確定度為0.033 9，其取值區(qū)間分布于X±0.033 9 之間。因此，在測(cè)定時(shí)，必須嚴(yán)格控制試驗(yàn)條件，在測(cè)試樣品時(shí)，必須嚴(yán)格按照操作規(guī)范，并且使用合格的計(jì)量器具，盡量減小測(cè)量結(jié)果的不確定度，保證檢測(cè)結(jié)果的質(zhì)量。

[1] 食品衛(wèi)生檢驗(yàn)方法編委會(huì).GB/T 5750.12-2006 生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法微生物指標(biāo)[S].北京:中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社,2003:89-92

[2] 張濤,趙明.食物成分表[J].北京大學(xué)學(xué)報(bào):食品科學(xué)版,1999,35(1):101-106

[3] 國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局.JJF 1059—1999 測(cè)量不確定度評(píng)定與表示[S].北京:中國(guó)計(jì)量出版社,1999:1-31