張西云，胡國(guó)元，李生慶，范玉霞，李志寧，王亭亭，黃 榮

（青海省畜牧獸醫(yī)科學(xué)院獸醫(yī)研究所，西寧810006）

1 流行及發(fā)病情況

2011年10月份以來(lái)，祁連縣央隆鄉(xiāng)托勒村三社25戶牧民母羊群發(fā)生以小腸出血、膽囊腫大為特征的高致死性疫病，1個(gè)月內(nèi)共發(fā)病96只，死亡94只，致死率為97．92%，造成了較大的經(jīng)濟(jì)損失。此起疫病病程為2～4d，經(jīng)用抗生素治療后2只存活。該羊群6月份曾全群注射三聯(lián)苗（快疫、瘁狙、腸毒血癥）。

此次發(fā)病均為2歲以上成年母羊，2歲以下母羊和羯羊未見(jiàn)發(fā)?。话l(fā)病區(qū)域僅限于冬季草場(chǎng)、高山草場(chǎng)，其他村社未見(jiàn)發(fā)病。25戶牧民存欄羊12 000只，發(fā)病率為0．8%。病羊曾用慶大霉素、消炎利膽片、油劑青霉素、土霉素、磺胺類藥物治療，效果不明顯。環(huán)丙沙星類抗生素有一定療效，但大部分仍然死亡。

2 癥狀及剖檢變化

發(fā)病初期體溫39℃～40．3℃，排黑綠色稀糞，食欲廢絕，喜食雪，精神不振、臥地不起，病程1～2 d，有的可達(dá)10d，有腹痛癥狀，發(fā)病母羊多數(shù)流產(chǎn)。皮下出血，小腸充氣、出血，膽囊腫大（正常的8～10倍），腹腔惡臭，其他臟器無(wú)明顯變化。

3 細(xì)菌檢查

3．1 臟器觸片 分別取病死羊的心、肝、脾、肺及腎觸片，瑞氏染色、鏡檢，均未見(jiàn)到任何細(xì)菌。

3．2 臟器培養(yǎng) 分別取病死羊的心、肝、脾、肺及腎接種于鮮血斜面和厭氣肝湯中，37℃培養(yǎng)24h，結(jié)果心、肝、脾、肺及腎均無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)。

3．3 小腸內(nèi)容物培養(yǎng) 取病死羊的小腸內(nèi)容物（血水）劃線接種于葡萄糖鮮血瓊脂平皿，37℃厭氣培養(yǎng)48h，挑選可疑菌落，接種于厭氣肝湯37℃培養(yǎng)24 h。結(jié)果由小腸內(nèi)容物分離出2株產(chǎn)氣莢膜梭菌。此菌在鮮血瓊脂平板上形成表面光滑、隆起、半透明的菌落，外圍有透明溶血環(huán)，其在厭氣肝湯中4h開(kāi)始生長(zhǎng)、產(chǎn)氣，培養(yǎng)液混濁，48h后菌體沉淀于管底，上部清澈。涂片鏡檢可見(jiàn)革蘭染色陽(yáng)性、中等大小的大桿菌。

3．4 動(dòng)物試驗(yàn) 兩株菌的培養(yǎng)物上清液分別以0．2mL／只的劑量，靜脈注射兩只小鼠，均在2min內(nèi)死亡，以不同濃度稀釋后靜脈注射小鼠，測(cè)定其最小致死量。結(jié)果：2株菌的最小致死量分別為500 MLD／mL（小鼠靜脈注射）和200MLD／mL（小鼠靜脈注射）。

3．5 中和試驗(yàn) 取上清液1mL分別與等量C型和D型魏氏梭菌定型血清混合，放于37℃恒溫箱內(nèi)中和50min，分別靜脈注射2只小鼠（每只0．4 mL）。結(jié)果D型血清中和組小鼠在18min內(nèi)死亡，C型血清中和組小鼠健活，表明分離菌為C型產(chǎn)氣莢膜梭菌。

4 結(jié)果

根據(jù)臨床和實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)，證明該地區(qū)綿羊所發(fā)生的急性死亡為綿羊瘁狙。

5 討論

5．1 從病死羊腸內(nèi)容物分離出了C型產(chǎn)氣莢膜梭菌，證明該地區(qū)此次發(fā)生在綿羊的急性死亡是綿羊瘁狙。

5．2 采取病料后應(yīng)及時(shí)檢驗(yàn)，因?yàn)槟c內(nèi)細(xì)菌極易死亡，檢菌時(shí)應(yīng)將腸內(nèi)容物直接接種鮮血平板，培養(yǎng)48h。挑菌時(shí)應(yīng)挑選3～5個(gè)不同形態(tài)的菌落，分別測(cè)毒，因?yàn)橐l(fā)綿羊瘁狙的產(chǎn)氣莢膜梭菌菌株之間生長(zhǎng)特性和產(chǎn)毒特性均有較大差別。

5．3 產(chǎn)氣莢膜梭菌是土壤常在菌，秋季氣溫多變，多雨潮濕，加之轉(zhuǎn)群奔波可能造成綿羊體質(zhì)降低而誘發(fā)本病。適時(shí)免疫接種羊三聯(lián)或四聯(lián)疫苗，尤其綿羊轉(zhuǎn)群或進(jìn)入換季草場(chǎng)之前，加強(qiáng)免疫接種是預(yù)防本病發(fā)生最為可行的方法。