張貴賢，史秋梅

（1．河北省昌黎縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，河北 昌黎066600；2．河北科技師范學(xué)院動(dòng)科院，河北 昌黎066600）

2011年7月，秦皇島市昌黎縣劉臺(tái)莊某養(yǎng)殖戶飼養(yǎng)的500只水貂發(fā)生了一種以腹瀉、便血為特征的急性病例。飼養(yǎng)員曾采用慶大霉素肌肉注射，新霉素飲水，百毒殺消毒等措施，但收效甚微，不能控制病情發(fā)展，3d內(nèi)死亡水貂53只。該貂群通過臨床診斷和實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)等手段，確診為大腸桿菌感染引發(fā)的水貂出血性腸炎，并采取有效措施控制了病情，診治情況報(bào)告如下。

1 臨床癥狀及病理變化

該病發(fā)生于斷奶前后的幼貂、1～2月齡的仔貂，成年貂及老年貂很少發(fā)病。病貂體溫不高，腹瀉，嘔吐，排出水樣糞便，有的水貂見有血便，有的吐血后死亡，病貂糞中有長短不一的黏膜組織。出現(xiàn)癥狀后一般1～3d死亡，有的4～6d死亡。對死亡的水貂進(jìn)行尸體剖檢，主要病變在消化道。胃黏膜有出血點(diǎn)或出血斑，胃腸內(nèi)充滿棕色黏液，腹水增多，腸道臌氣明顯，腸黏膜脫落不全，腸壁菲薄，充滿氣體，盲腸內(nèi)有大量血塊，直腸黏膜出血。腸系膜淋巴結(jié)腫脹、出血；頜下淋巴結(jié)腫脹，肝臟呈土黃色、質(zhì)脆易碎，有壞死灶；脾臟輕微腫脹；心肌呈淡紅色，心內(nèi)膜有點(diǎn)狀或帶狀出血；肺臟表面大量出血；膀胱積尿。

2 實(shí)驗(yàn)室診斷

2．1 細(xì)菌分離培養(yǎng) 無菌取新鮮病死水貂肝臟、脾臟、心血、肺臟分別進(jìn)行直接涂片，革蘭染色、鏡檢，均見有數(shù)量不等的革蘭陰性單個(gè)、成雙的中等大小桿菌。無菌取上述病料接種普通瓊脂，37℃培養(yǎng)24 h，在麥康凱瓊脂上見到生長良好、光滑、邊緣整齊、均勻粉紅色、不透明的菌落；伊紅美藍(lán)瓊脂上為黑色有金屬光澤的菌落；血瓊脂培養(yǎng)基產(chǎn)生溶血環(huán)。鏡檢均為革蘭陰性菌，兩端鈍圓的小桿菌，疑似大腸桿菌。

2．2 生化鑒定 將細(xì)菌純培養(yǎng)物，分別接種于各種微量發(fā)酵管中，37℃培養(yǎng)48h，結(jié)果該菌能發(fā)酵葡萄糖、乳糖、麥芽糖、蔗糖、蕈糖、果糖、蜜二糖和棉子糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣，甘露醇、木膠和阿拉伯膠產(chǎn)酸產(chǎn)氣；山梨醇出現(xiàn)遲緩發(fā)酵，不發(fā)酵衛(wèi)矛醇、側(cè)金盞花醇、賴氨基酸和水楊素；不利用檸檬酸鹽和尿素；甲基紅、吲哚、ONPG、氧化酶試驗(yàn)陽性；石蕊牛乳試驗(yàn)紅色；V－P試驗(yàn)、明膠液化試驗(yàn)陰性；TSI反應(yīng)模式為：斜面產(chǎn)酸／底層產(chǎn)酸產(chǎn)氣，不產(chǎn)生H2S。

2．3 動(dòng)物接種試驗(yàn) 選用10只健康小鼠做動(dòng)物試驗(yàn)，分為2組，每組5只。第1組用分離菌24h肉湯培養(yǎng)物，腹腔注射，每只0．2mL；第2組每只小鼠，腹腔注射0．2mL生理鹽水。結(jié)果第1組小鼠24h后出現(xiàn)精神沉郁，腹式呼吸，有的口腔出血，24～72h全部死亡。剖檢見到小腸黏膜岀血，腸系膜血管充血；肝臟充血、出血、腫大；心肌弛緩，冠狀溝周圍有出血點(diǎn)；有的脾臟腫大，有散在的出血；腎臟皮質(zhì)有出血點(diǎn)或出血斑。用肝臟和心血等涂片鏡檢及接種普通瓊脂分離培養(yǎng)，結(jié)果所得細(xì)菌與2．1和2．2所述形態(tài)和生化特性相同。第2組全部正常，無一發(fā)病。

通過以上綜合診斷，確診為大腸桿菌病。

2．4 血清型鑒定 將細(xì)菌的純培養(yǎng)物接種于普通瓊脂斜面上，37℃培養(yǎng)12h，用滅菌的石炭酸生理鹽水2mL反復(fù)沖洗普通桿菌的O抗原。取10mL待檢的抗原滴于載玻片上與已知的標(biāo)準(zhǔn)血清混合，同時(shí)取10mL石炭酸生理鹽水與抗原瓊脂斜面，使細(xì)菌溶于其中。把斜面里的石炭酸生理鹽水傾倒于小試管中，121℃2h高壓滅菌，制成大腸混合作為對照，3min內(nèi)觀察有無凝集現(xiàn)象。結(jié)果顯示，該菌的血清型為O23。

2．5 藥敏試驗(yàn) 選5種常用抗菌藥，用常規(guī)紙片法對分離的綠膿桿菌進(jìn)行藥物敏感試驗(yàn)，結(jié)果其對頭孢拉啶、頭孢噻肟、左氧氟沙星、環(huán)丙沙星高度敏感；對慶大霉素、阿米卡星中度敏感；對新霉素等表現(xiàn)出一定程度的耐荮性。

3 治療措施

首先將發(fā)病水貂進(jìn)行隔離，對食槽及飲水槽用5%漂白粉徹底清洗消毒，籠舍、糞便等用5%熱火堿進(jìn)行噴霧消毒；糞、尿等排泄物及時(shí)進(jìn)行無害化處理。病貂與假定健康貂隔離飼養(yǎng)，對病死貂扒皮后焚燒、深埋。調(diào)整飼料，選用新鮮、適口性好，易消化、營養(yǎng)全價(jià)的飼料。根據(jù)分離菌及藥敏情況進(jìn)行治療。對已發(fā)病的貂選用敏感藥物頭孢拉定，肌肉注射，每日2次；另外用左氧氟沙星拌料飼喂。治療3d，病情得到了控制，病貂基本痊愈。

4 小結(jié)

大腸桿菌是水貂腸道中的一種常在菌，屬于條件性致病菌，當(dāng)水貂機(jī)體抵抗力降低時(shí)才呈現(xiàn)致病性。在氣候突變、管理不當(dāng)時(shí)，幼貂容易受寒感冒，導(dǎo)致機(jī)體抵抗力下降，環(huán)境中和體內(nèi)的條件性致病菌容易入侵機(jī)體，造成水貂發(fā)病，所以在養(yǎng)殖中應(yīng)加強(qiáng)管理，盡量投喂新鮮飼料。

發(fā)病后選擇高敏藥物來治療，本試驗(yàn)所做藥敏試驗(yàn)中只有頭孢拉啶效果較好，其他藥物抑菌效果均不理想。15種抗革蘭陰性菌藥物中毫無作用的竟達(dá)7種，這可能與養(yǎng)殖戶長期不規(guī)范用藥有關(guān)，因此水貂發(fā)生大腸桿菌病時(shí)應(yīng)認(rèn)真找出各種誘發(fā)因素，并根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果，選用高敏藥物治療，不能盲目用藥。

建議在有條件的地方經(jīng)常清洗水塔并進(jìn)行飲水消毒，同時(shí)斷奶后的幼貂、仔貂食物全部熟喂。在飼料中添加多種維生素、微量元素以增強(qiáng)機(jī)體抵抗力。

［1］ 布坎南 R E，吉本斯 N E．伯杰細(xì)菌鑒定手冊［M］．中國科學(xué)院微生物研究所譯，8版．北京：科學(xué)出版社，1984．

［2］ 姚火春．獸醫(yī)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)［M］．2版．北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2002．

［3］ 陳溥言．獸醫(yī)傳染病學(xué)［M］．5版．北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2006．