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（1 勝利油田機(jī)關(guān)醫(yī)院，山東 東營(yíng) 257000；2 山東省東營(yíng)市第二人民醫(yī)院，山東 東營(yíng) 257400）

MMP-3、IL-6、TNF-α、hs-CRP技術(shù)在膝骨關(guān)節(jié)炎中的應(yīng)用

徐 萍1李?lèi)?ài)艷2

（1 勝利油田機(jī)關(guān)醫(yī)院，山東 東營(yíng) 257000；2 山東省東營(yíng)市第二人民醫(yī)院，山東 東營(yíng) 257400）

目的 通過(guò)觀察基質(zhì)金屬蛋白酶-3（MMP-3）與白細(xì)胞介素-6（IL-6）、腫瘤壞死因子（TNF-α）和超敏C反應(yīng)蛋白（hs-CRP）的相關(guān)性，探討其與骨關(guān)節(jié)炎發(fā)病過(guò)程的關(guān)系和作用。方法 采用酶聯(lián)免疫吸附法等方法測(cè)定108例早期膝骨關(guān)節(jié)炎患者和100例正常對(duì)照者的血清MMP-3、TIMP-1、IL-6、TNF-α、hs-CRP、NO、iNOS等指標(biāo)。結(jié)果 MMP-3、TIMP-1、IL-6、TNF-α、hs-CRP、iNOS、TG在早期膝骨關(guān)節(jié)炎患者血清中的含量均高于正常對(duì)照者（P＜0.05），患者血清MMP-3水平與IL-6、TNF-α和hs-CRP呈顯著正相關(guān)。結(jié)論 血清MMP-3、IL-6、TNF-α和hs-CRP可作為臨床診斷早期骨關(guān)節(jié)炎的有效指標(biāo)。

骨關(guān)節(jié)炎；金屬蛋白酶；白細(xì)胞介素-6；腫瘤壞死因子-α；超敏C反應(yīng)蛋白

2010年03月至2013年03月，作者經(jīng)過(guò)研究MMP-3與IL-6、TNF-α和hs-CRP的相關(guān)性，探討其與OA發(fā)病過(guò)程的關(guān)系和其所起的作用。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2010年3月至2013年3月3年中在我科住院的早期膝骨關(guān)節(jié)炎患者54例列入早期膝骨關(guān)節(jié)炎組，其中男18例，女36例，平均年齡為（59.18±7.04）歲。列入者均符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)風(fēng)濕病學(xué)分會(huì)2003年頒布的《骨關(guān)節(jié)炎診治指南》的診斷標(biāo)準(zhǔn)。正常對(duì)照組50例，其中男32例，女18例，平均年齡為（57.87±6.39）歲，均體格檢查無(wú)異常。

1.2 方法

所有受試人員經(jīng)禁食12h后清晨抽取空腹靜脈血6mL，充分離心后將上清液置入-30℃冰箱內(nèi)。4～6h后應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)MMP-3、TNF-α、IL-6和基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子-1（TIMP-1）；免疫增強(qiáng)透射比濁法檢測(cè)血清中hs-CRP的數(shù)值；硝酸還原酶法檢測(cè)血清中NO的數(shù)值；化學(xué)比色法檢測(cè)血清中血清誘導(dǎo)型一氧化氮合酶（iNOS）的數(shù)值；葡萄糖氧化酶法檢測(cè)空腹血糖值；酶法檢測(cè)血清總膽固醇（TC）、三酰甘油（TG）、低密度膽固醇（LDL-C）和高密度膽固醇（HDL-C）的數(shù)值[1]。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法

2 結(jié) 果

MMP-3、TIMP-1、IL-6、TNF-α、hs-CRP、iNOS、TG在早期膝骨關(guān)節(jié)炎患者血清中的含量均高于正常對(duì)照者（P＜0.05），患者血清MMP-3水平與IL-6、TNF-α和hs-CRP呈顯著正相關(guān).采用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定治療后膝骨關(guān)節(jié)炎患者的血清MMP-3 7.32μg/L、IL-6 180μg/L、hs-CRP 1.8mg/L、NO 2018nmol/L、iNOS 48000nmol/L等指標(biāo)均恢復(fù)到正常水平，TNF-α轉(zhuǎn)陰性。

3 討 論

骨關(guān)節(jié)炎（OA）是一種臨床常見(jiàn)的慢性進(jìn)行性骨關(guān)節(jié)病。研究顯示，骨關(guān)節(jié)炎的發(fā)病過(guò)程中，在關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）的合成與降解失衡中起決定性作用的是基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs），其中在骨關(guān)節(jié)炎的早期和后期均有高水平表達(dá)的是MMP-3基因，且大都存在于關(guān)節(jié)軟骨的深層，這樣可直接降解Ⅱ、Ⅸ、Ⅺ型膠原，并且對(duì)其他的MMPs活性也能起到調(diào)節(jié)作用[2]。此外，當(dāng)骨關(guān)節(jié)炎發(fā)生軟骨分解破壞和保護(hù)修復(fù)時(shí)，其局部就會(huì)釋放細(xì)胞因子，進(jìn)入血液和關(guān)節(jié)液中，其中有兩個(gè)重要的細(xì)胞因子，那就是白細(xì)胞介素-6（IL-6）和腫瘤壞死因子-α（TNF-α），它們均參與骨性關(guān)節(jié)炎的發(fā)病過(guò)程，且在骨關(guān)節(jié)炎滑膜炎性病變、ECM降解及干擾軟骨細(xì)胞功能方面起到了重要作用。超敏C反應(yīng)蛋白（hs-CRP），是機(jī)體非特異性炎性反應(yīng)的一個(gè)敏感標(biāo)志物，在骨關(guān)節(jié)炎的發(fā)病及預(yù)后中它也是一個(gè)重要指標(biāo)。骨關(guān)節(jié)炎發(fā)病的主要特征是關(guān)節(jié)軟骨發(fā)生退變和ECM的降解，骨關(guān)節(jié)炎的病理變化主要是軟骨細(xì)胞發(fā)生功能改變。通常情況下，ECM的分解與合成代謝是一個(gè)動(dòng)態(tài)平衡關(guān)系，這一關(guān)系受多種因素影響，如細(xì)胞內(nèi)外的蛋白分子（如生長(zhǎng)因子和細(xì)胞因子），還有關(guān)節(jié)軟骨酶等。研究表明，MMP-3是成纖維細(xì)胞釋放的，而此種細(xì)胞就大批量存在于骨關(guān)節(jié)炎早期形成的血管翳之中，MMP-3在滑膜和軟骨細(xì)胞中也有較高表達(dá)，這樣不僅可在血管生成時(shí)將基底膜和間質(zhì)成分降解，而且能將Ⅸ型膠原直接降解，從而打破軟骨的穩(wěn)定性能，從而導(dǎo)致細(xì)胞缺氧，使代謝產(chǎn)物發(fā)生堆積，引起局部出現(xiàn)酸性的環(huán)境，使得MMP-3更便于行使功能而致進(jìn)一步惡化。研究證明，MMP-3/TIMP-1的平衡在骨關(guān)節(jié)炎的發(fā)病過(guò)程有著重要意義。正常狀態(tài)下，MMP-3與軟骨局部的TIMP-1維持著動(dòng)態(tài)平衡關(guān)系，它們保持軟骨結(jié)構(gòu)的完整性。本研究結(jié)果顯示，相比于正常對(duì)照組，MMP-3在早期膝骨關(guān)節(jié)炎患者的血清中明顯升高，而且增高的幅度要超出TIMP-1，出現(xiàn)MMP-3/TIMP-1的平衡失調(diào)。據(jù)此可推斷，在早期骨關(guān)節(jié)炎的發(fā)生過(guò)程中，MMP-3的作用比TIMP-1要大，它們之間如果失去平衡將加強(qiáng)關(guān)節(jié)軟骨的降解作用。本實(shí)驗(yàn)證明，IL-6、TNF-α和hs-CRP在早期膝骨關(guān)節(jié)炎患者的血清中顯著升高。文獻(xiàn)表明，IL-6可使滑膜組織的炎性細(xì)胞增加、軟骨細(xì)胞增殖，IL-1誘導(dǎo)增大，加強(qiáng)MMPs的合成作用，減少蛋白多糖的產(chǎn)生，但因?yàn)镮L-6能誘導(dǎo)產(chǎn)生TIMP，但不是MMPs，所以該因子被認(rèn)為可參與限制蛋白分解損傷的負(fù)反饋機(jī)制[3]。

研究表明，HS-CRP與骨關(guān)節(jié)炎呈正相關(guān)的關(guān)系，是高敏感反映炎癥及組織損傷的重要的標(biāo)志物，同時(shí)受IL-6、TNF-α等多種細(xì)胞因子的調(diào)節(jié)和引導(dǎo)。有文獻(xiàn)還提示，早期膝骨關(guān)節(jié)炎婦女外周血中HSCRP水平高于無(wú)膝骨關(guān)節(jié)炎的婦女水平。研究還表明，早期膝骨關(guān)節(jié)炎患者的血清MMP-3與IL-6、TNF-α和HS hs-CRP有著密切的關(guān)系，呈現(xiàn)顯著的正相關(guān)關(guān)系，聯(lián)合檢測(cè)對(duì)早期骨關(guān)節(jié)炎能夠進(jìn)行正確的全面的診斷和詳盡的評(píng)估，能夠?yàn)樵缙诟深A(yù)、預(yù)防關(guān)節(jié)功能障礙提供具體的詳實(shí)的實(shí)驗(yàn)參考重要指標(biāo)。

[1] Nah SS,Choi IY,Yoo B,et al.Advanced glycation end products increases matrix metalloproteinase-1,-3,and -13,and TNF-alpha in human osteoarthritic chondrocytes[J].FEBS Lett,2010,581(9): 1928-1932.

[2] QG,Ji B,Qin WL,et al.Effect of acupotomy lysis on serum matrix metalloproteinase (MMP)-3 and MMP-13 contents in osteoarthritis rabbits[J].Zhen Ci Yan Jiu,2010,33(5):306-309.

[3] Miller GD,Nicklas BJ,Loeser RF.Inflammatory biomarkers and physical function in older, obese adults with knee pain and selfreported osteoarthritis after intensive weight-loss therapy[J].J Am Geriatr Soc,2011,56(4):644-651.

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1671-8194（2013）27-0117-02