付貴財(cái)

（黑龍江省嫩江縣九三管理局尖山農(nóng)場(chǎng)獸醫(yī)院，嫩江 161444）

兔球蟲病

付貴財(cái)

（黑龍江省嫩江縣九三管理局尖山農(nóng)場(chǎng)獸醫(yī)院，嫩江 161444）

兔球蟲病是由孢子蟲綱真球蟲目艾美爾科艾美爾屬的一種或幾種艾美爾球蟲寄生于兔體內(nèi)引起的一種以腹瀉為主要癥狀的疾病。該病對(duì)養(yǎng)兔業(yè)的危害極大，我國把其列為二類動(dòng)物疫病，與兔瘟、兔布氏桿菌病、兔疥螨病一同被稱為四大兔病。

1 病原體

早在1674年列文虎克利用顯微鏡觀察兔的肝臟，無意間發(fā)現(xiàn)了球蟲卵囊，斯氏艾美爾球蟲成為最早發(fā)現(xiàn)的原生動(dòng)物。在1879年，國外學(xué)者Leuckart將兔球蟲分為肝型球蟲和腸型球蟲，并分別命名為斯氏艾美爾球蟲和穿孔艾美爾球蟲。隨著現(xiàn)代生物技術(shù)的發(fā)展，人們通過球蟲純培養(yǎng)鑒定，用分子生物學(xué)手段分析驗(yàn)證，確定了11個(gè)兔球蟲蟲種，其余為同種異名[1，2]。其中只有斯氏艾美爾球蟲寄生于兔的膽管上皮細(xì)胞內(nèi)，其余均寄生于腸黏膜上皮細(xì)胞內(nèi)。雖然兔球蟲是目前已知發(fā)現(xiàn)最早的原蟲，但對(duì)其的研究要遠(yuǎn)遠(yuǎn)落后于雞球蟲。由于養(yǎng)兔業(yè)發(fā)展，兔球蟲的研究也越來越深入。

2 分子分類學(xué)研究

Kvicerova et al.（2008）[1]利用18S rDNA序列進(jìn)行對(duì)11個(gè)兔球蟲有效種進(jìn)行了系統(tǒng)發(fā)育的研究。研究結(jié)果與形態(tài)學(xué)和生物學(xué)研究的結(jié)果并不完全一致。用進(jìn)化理論分析將兔球蟲分為2個(gè)譜系，2者之間存在的主要差異在于是否存在卵囊殘?bào)w，與其他一些因素如卵囊形態(tài)，大小，有無卵膜孔，致病性，潛隱期，孢子化時(shí)間，裂殖生殖代數(shù)及感染位點(diǎn)等因素沒有明顯相關(guān)性。斯氏艾美耳球蟲與其他球蟲同源性在91.7%～92.9 %，寄生于大腸的黃艾美耳球蟲與梨形艾美耳球蟲同源性最高，可達(dá)99.7%。其他小腸球蟲之間同源性在97.1%～99.8%之間。2011年方素芳[3]等人對(duì)腸艾美爾球蟲進(jìn)行單卵囊培養(yǎng)，利用ITS-1序列建立了一種鑒定球蟲種類的新方法；隨后2012年顧小龍[4]等人成功分離到大型艾美爾球蟲、黃艾美爾球蟲及腸艾美爾球蟲單卵囊，并成功克隆ITS-1序列，與GeneBank中發(fā)表的序列相比對(duì)，同源性分別達(dá)到97.4%、97.9%和96.9%?；贗TS-1序列構(gòu)建了系統(tǒng)發(fā)育樹，結(jié)果顯示兔球蟲形成一個(gè)單系群，根據(jù)寄生部位又可分為2個(gè)姊妹群。

3 臨床癥狀及病理變化

兔球蟲病一年四季都可感染發(fā)生，但以夏秋高溫潮濕季節(jié)多發(fā)，且分布及流行極為廣泛。經(jīng)人工感染105和104個(gè)兔球蟲卵囊，家兔死亡率可高達(dá)80%和40%[5]。兔球蟲臨床癥狀分為腸型、肝型2種，臨床上以肝腸混合型感染最為常見。患兔貧血、消瘦、發(fā)育停滯，最終極度衰弱而死亡。臨床癥狀的嚴(yán)重程度與球蟲種類、食入卵囊數(shù)量和兔年齡階段有關(guān)。

肝型癥狀是由斯氏艾美爾球蟲所引起。因?yàn)楦闻K是機(jī)體的重要器官，慢性肝病削弱動(dòng)物的抵抗力，易導(dǎo)致繼發(fā)性感染，斯氏艾美爾球蟲對(duì)機(jī)體健康的影響最大。肝型球蟲病患兔的膽管上皮增生，增生細(xì)胞填補(bǔ)了膽道毛細(xì)血管。膽道血管異常擴(kuò)張并充滿碎屑和球蟲卵囊使膽汁變渾濁。斯氏艾美爾球蟲結(jié)節(jié)被炎性細(xì)胞浸潤，出現(xiàn)實(shí)質(zhì)性病變，后期膽管纖維素變性、增生，導(dǎo)致肝臟邊緣極度腫大并出現(xiàn)肉眼可見的黃色結(jié)節(jié)[6]。

腸球蟲的特征性病變是頑固性腹瀉，病兔采食和排糞量減少，腹瀉導(dǎo)致家兔脫水，體重降低，嚴(yán)重者甚至死亡。由于長期腹瀉，使家兔體內(nèi)離子代謝受到影響，流失大量的鉀離子，可導(dǎo)致低鉀血癥[5]。兔球蟲導(dǎo)致的腸炎還常繼發(fā)大腸桿菌和輪狀病毒感染[7～8]。

4 感染途徑

Coudert和Pakandl報(bào)道[9～10]，一般情況下，小于20日齡的幼兔不能感染兔球蟲。可能因泌乳時(shí)有母源抗體的存在，哺乳期幼兔得到了相應(yīng)的保護(hù)。經(jīng)Dürr and Pellérdy研究發(fā)現(xiàn)[11]，在足夠大感染劑量的情況下，泌乳期1～9日齡的幼兔也可感染兔球蟲。蔣金書等[12]對(duì)北京地區(qū)的不同年齡家兔感染兔球蟲情況進(jìn)行調(diào)查，發(fā)現(xiàn)家兔最早在25日齡才可感染兔球蟲。據(jù)林孟初等報(bào)道[13]，不同球蟲卵囊在不同年齡家兔中的分布也不同，幼兔以斯氏艾美爾球蟲、中型艾美爾球蟲和穿孔艾美爾球蟲居多，成年兔以無殘艾美爾球蟲、梨形艾美爾球蟲和大型艾美爾球蟲居多。Pakandl和Hlaskova 研究表明[10]，用黃艾美爾球蟲和腸艾美爾球蟲感染哺乳期幼兔后，卵囊產(chǎn)生數(shù)量與幼兔的年齡呈正相關(guān)。同時(shí)發(fā)現(xiàn)人工接種19日齡與22日齡幼兔，其對(duì)兔球蟲的抵抗力存在較大差異，這可能與19～22日齡時(shí)的幼兔正處于從哺乳轉(zhuǎn)變?yōu)轱暳衔桂B(yǎng)階段，其小腸內(nèi)環(huán)境發(fā)生改變有關(guān)。

5 免疫

家兔抗球蟲免疫應(yīng)答發(fā)生的主要場(chǎng)所是腸道相關(guān)淋巴組織（GALT）和腸系膜淋巴結(jié)。家兔腸道球蟲感染時(shí)起主要作用的是腸道細(xì)胞免疫，而體液免疫無明顯作用，或僅起輔助性作用。具有極強(qiáng)免疫原性的腸艾美耳球蟲初次感染家兔后第14 d，在腸系膜淋巴結(jié)、十二指腸（入侵部位）和回腸（發(fā)育部位）中的CD8+T細(xì)胞比例明顯升高，CD4+T細(xì)胞比例僅出現(xiàn)短暫升高；從感染后第7～21 d，腸系膜淋巴結(jié)淋巴細(xì)胞對(duì)兔球蟲的特異性抗原具有很強(qiáng)的增殖活性。雖然血清中的IgG水平在感染后有所升高，但是與免疫保護(hù)率無相關(guān)性，脾臟中CD8+T細(xì)胞和CD4+T細(xì)胞比例和活性也無明顯變化[14～15]。

6 預(yù)防

保持良好的衛(wèi)生條件，可以在球蟲孢子化之前將球蟲全部殺滅，有效預(yù)防球蟲感染。但在實(shí)踐中，不可能將所有的球蟲卵囊消滅，如果通過衛(wèi)生清潔可以顯著的減少環(huán)境中球蟲數(shù)量，降低球蟲感染力，對(duì)控制球蟲病具有重要意義。而且，小劑量的卵囊感染是獲得抵抗球蟲免疫力的最好途徑，這種生產(chǎn)技術(shù)對(duì)防控兔球蟲病，效果很好。但藥物控制仍是控制球蟲病的最有效方法。

2008年底，法國、意大利和西班牙已經(jīng)授權(quán)地克珠利為兔飼料添加劑，然而，依照雞球蟲模式來研制的抗球蟲藥物，有的對(duì)兔球蟲效果并不好。常用于預(yù)防兔球蟲病的有效藥物有氯苯胍、地克珠利和鹽霉素；治療藥物有磺胺類藥物和妥曲珠利。

抗球蟲藥物通?；旌显陬w粒料中飼喂，像磺胺類或妥曲珠利通過飲水給藥效果更好。但要注意磺胺藥易產(chǎn)生耐藥性，不能用于預(yù)防兔球蟲病。藥物使用要注意防止中毒，注意對(duì)環(huán)境的污染和耐藥株出現(xiàn)。中草藥具有不易產(chǎn)生耐藥性，毒副作用小，還有促進(jìn)生長作用。李佩國等人報(bào)道[16]，在選用鹽霉素的基礎(chǔ)上，添加抑菌中草藥、硒、維生素E及生化黃腐酸配合而成的新藥“兔健寶”，具有抗兔球蟲和抗菌雙重作用。王秋梅等報(bào)道[17]，用白頭翁鮮草喂兔可預(yù)防和減少球蟲病的發(fā)生。李樹榮等[18]，用葫蘆茶提純物對(duì)兔球蟲的卵囊進(jìn)行殺滅試驗(yàn)，結(jié)果表明，Cyclokievitone和葫蘆茶素D效果明顯，葫蘆茶素A效果較差。張西臣等[19]，中草藥制劑球蟲消治療兔球蟲試驗(yàn)，結(jié)果表明球蟲消不僅可以有效的殺滅球蟲，而且還可以提高動(dòng)物的平均增重。

7 展望

目前，球蟲病仍然是危害家兔最嚴(yán)重的疾病之一。因抗球蟲藥物的濫用引起耐藥蟲株的產(chǎn)生，藥物在兔肉中殘留等問題仍然存在。開發(fā)廉價(jià)、有效、較少藥物殘留的新抗球蟲藥是未來研究方向。國外已有6種兔球蟲的早熟株選育成功，兔球蟲早熟弱毒苗一旦上市，可更有效的控制兔球蟲病。