趙麗麗，朱洪權(quán)，李愛麗＊

（1.吉林大學(xué)第二醫(yī)院 神經(jīng)內(nèi)科，吉林 長(zhǎng)春130041；2.吉林大學(xué)第二醫(yī)院 檢驗(yàn)科，吉林 長(zhǎng)春130041）

腦梗死是目前嚴(yán)重危害老年人健康的疾病之一，具有發(fā)病率高、致殘率高、病死率高、復(fù)發(fā)率高及并發(fā)癥多的“四高一多”的特點(diǎn)，而且最近幾年腦梗死發(fā)病有明顯年輕化趨勢(shì)。目前腦梗死已嚴(yán)重威脅人類健康，對(duì)人類健康及家庭社會(huì)經(jīng)濟(jì)造成很大負(fù)擔(dān)，因此做好腦梗死的診治有著極其重要的意義。神經(jīng)營養(yǎng)因子作用于神經(jīng)系統(tǒng)，影響神經(jīng)元和膠質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)、分化及存活，bFGF是其中的一種神經(jīng)營養(yǎng)因子。近年來，bFGF在腦梗死診斷方面的研究成果引起廣泛的關(guān)注。

1 bFGF的分布和生物學(xué)特性

bFGF由Gospodarowicz等［1］首先從牛腦垂體中分離純化而來，屬陽離子單鏈多肽，呈堿性，等電點(diǎn)9.6，對(duì)熱和酸敏感，酸性（pH＝2.0）或56℃條件下作用2h可使其失活。隨后，人、兔、鼠等動(dòng)物體內(nèi)均被發(fā)現(xiàn)有bFGF存在，它們之間有30%－70%的同源性［2］。bFGF的分布極為廣泛，腦、心、肝、腎、腎上腺、骨、眼、胎盤等組織中均有bFGF存在，單核巨噬細(xì)胞、膠質(zhì)細(xì)胞、毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞、肝細(xì)胞、星形細(xì)胞和成纖維細(xì)胞等細(xì)胞中也有分布。免疫組織化學(xué)方法測(cè)出神經(jīng)元細(xì)胞體、軸突和樹突近端、星形膠質(zhì)細(xì)胞等處均有bFGF分布［3］。高表達(dá)區(qū)是大腦半球、丘腦、嗅球；低表達(dá)區(qū)為橋腦、延髓、海馬等。在生理狀態(tài)下，血清和體液中幾乎沒有bFGF存在，但是當(dāng)腦缺血缺氧造成局部血腦屏障（Blood－brain barrier，BBB）損傷后，其通透性增加，bFGF便可以通過病變組織進(jìn)入外周血中［4］，bFGF沒有信號(hào)肽，主要以自分泌或旁分泌的形式出現(xiàn)在胞外，但也可通過細(xì)胞損傷或死亡釋放出來與其靶細(xì)胞上的受體結(jié)合而發(fā)揮作用［5］。bFGF與受體結(jié)合后通過多條信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路將信號(hào)傳入細(xì)胞核內(nèi)，參與調(diào)節(jié)靶細(xì)胞許多反應(yīng)，是許多細(xì)胞過程如生長(zhǎng)、增殖、分化和存活的調(diào)節(jié)者。bFGF與受體結(jié)合后，啟動(dòng)內(nèi)源性酪氨酸酶激活、酪氨酸的自身磷酸化。酪氨酸酶的激活屬于快速效應(yīng)，包括誘導(dǎo)肌醇磷脂（PIP2），釋放乙酸甘油和三磷酸肌醇，最后導(dǎo)致蛋白激酶的激活和胞內(nèi)Ca＋的釋放；酪氨酸自身磷酸化屬于慢性效應(yīng)，包括誘導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)特殊蛋白質(zhì)與受體的結(jié)合，啟動(dòng)包括絲裂原激活的蛋白酶（MAPK）在內(nèi)的磷酸化級(jí)聯(lián)，最終激活轉(zhuǎn)錄因子。bFGF是一種多效能生長(zhǎng)因子，具有對(duì)抗細(xì)胞內(nèi)鈣超載、抑制細(xì)胞凋亡，清除自由基、拮抗興奮性氨基酸毒性及抗氧化等多種生物學(xué)活性［6－8］。bFGF通過以上多種機(jī)制促進(jìn)細(xì)胞增殖分化［9－11］、組織增生和血管形成［12］，并參與炎癥反應(yīng)和創(chuàng)傷愈合［13］。

2 缺血腦組織bFGF的含量變化

有研究表明，在一側(cè)大腦中動(dòng)脈永久性閉塞（MCAO）及局灶性缺血再灌注（I/R）大鼠模型中，通過免疫印跡檢測(cè)出大鼠缺血半暗帶區(qū)域bFGF表達(dá)增加，并持續(xù)到梗死后的14天。此外，本研究還表明梗死后血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF），和血管生成素 （Ang－2）也不同程度增加［14］。在人類有關(guān)腦缺血組織bFGF表達(dá)的研究也得到了相似結(jié)論，Horrigan［15］等從10例卒中后存活24h－43d的患者腦組織中取出壞死12h以內(nèi)的腦組織，用Westem blot分析研究，發(fā)現(xiàn)腦梗死組織中心和半暗帶的灰質(zhì)和白質(zhì)中bFGF的mRNA和蛋白表達(dá)，與對(duì)側(cè)正常的腦組織比較均明顯增加。石蠟包埋切片，采用間接免疫過氧化物酶染色法，結(jié)果顯示在神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞中都有bFGF的存在。用原位雜交法檢測(cè)10例患者的缺血腦組織，bFGFmRNA的集中定量表達(dá)研究發(fā)現(xiàn)，與正常形態(tài)的對(duì)側(cè)腦組織和梗死腦組織相比較，缺血半暗帶的bFGFmRNA表達(dá)顯著增高。因此，腦缺血刺激bFGF表達(dá)增加，bFGF等多種生長(zhǎng)因子可能與梗死半暗帶特定的細(xì)胞表面受體結(jié)合，觸發(fā)信號(hào)級(jí)聯(lián)反應(yīng)，通過直接或間接途徑刺激其他神經(jīng)營養(yǎng)因子合成釋放，參與腦梗死的病理生理過程［16］。

3 bFGF通過血腦屏障的機(jī)制

劉穎［17］等采用抗BBB抗體的免疫組化方法顯示大鼠持續(xù)性局灶性腦缺血（pMCAO）后不同時(shí)間BBB結(jié)構(gòu)的改變。采用125I標(biāo)記bFGF示蹤法顯示靜脈注射125I－bFGF后腦組織C射線計(jì)數(shù)變化表示bFGF通透性的變化。結(jié)果顯示在動(dòng)脈栓塞后0.5 h抗BBB免疫組化染色顯示毛細(xì)血管壁的結(jié)構(gòu)已發(fā)生改變，即使到了14d時(shí)大量新生毛細(xì)血管出現(xiàn)在梗死區(qū)周圍，但是抗BBB抗體免疫組化仍為陰性，表明此時(shí)血管壁尚未達(dá)到完全修復(fù)。從梗死后2h開始125I－bFGF通透有明顯的增加，持續(xù)到梗死后14d，125I－bFGF主要出現(xiàn)在基底節(jié)及梗死累及的島葉和頂葉皮層.這也從相反的角度證明，當(dāng)腦缺血缺氧造成BBB損傷后，其通透性增加，bFGF便可以通過受損BBB進(jìn)入外周血中，因此檢測(cè)外周血清bFGF水平有助于腦梗死的診斷。

4 腦梗死患者血清bFGF的含量變化

宋水江［18］等采用酶聯(lián)免疫吸附法（EL1SA）檢測(cè)55例急性期腦梗死患者和32例其他疾病對(duì)照組患者及30例健康人為對(duì)照組測(cè)量血清bFCF含量，結(jié)果顯示，腦梗死患者血清bFGF水平明顯增高，且與梗死灶大小關(guān)系密切，恢復(fù)期時(shí)血清bFGF水平雖較急性期明顯下降，但與健康對(duì)照組和其他疾病對(duì)照組相比，差異仍顯著。此后有學(xué)者進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，腦梗死發(fā)病24h內(nèi)患者血清bFGF水平較對(duì)照組明顯增高，且在第3天達(dá)到高峰，并維持相對(duì)高值達(dá)14天，此外，根據(jù)腦梗死患者梗死灶的大小不同，將腦梗死患者分為三組，同時(shí)研究結(jié)果表明，患者血清bFGF水平與梗死灶大小程正相關(guān)［19］，這一方面可能與血管內(nèi)皮損傷后血管平滑肌細(xì)胞死亡而導(dǎo)致上調(diào)表達(dá)的bFGF釋放有關(guān)；另一方面，缺血區(qū)細(xì)胞上調(diào)表達(dá)bFGF，而血腦屏障的破壞可使梗死灶及其周圍細(xì)胞上調(diào)表達(dá)的bFGF，由于細(xì)胞死亡或亞急性損傷而釋放增加，而病灶越大血腦屏障破壞越嚴(yán)重、激活的膠質(zhì)細(xì)胞也越多。腦梗死患者血清中bFGF含量動(dòng)態(tài)變化說明bFGF在腦梗死的病理生理中承擔(dān)著重要角色，監(jiān)測(cè)內(nèi)源性bFGF的含量變化有助于疾病的診斷及病情程度的預(yù)判。

5 腦缺血和腦梗死對(duì)血清bFGF含量的影響

李建生［20］等學(xué)者曾做如下研究：將青年SD大鼠按隨機(jī)數(shù)字表法分組，老齡SD大鼠按體重分層隨機(jī)法分組，分為假手術(shù)組，缺血（I）3h，I/R1、3、6、12d組，每組6只，采用免疫祖化法測(cè)定各組大鼠腦中bFGF蛋白表達(dá)程度，結(jié)果顯示，青年和老年組bFGF蛋白表達(dá)同步增強(qiáng)，I/R3d達(dá)峰值后逐漸減弱，老齡組I/R6dbFGF蛋白表達(dá)與青年組同時(shí)間點(diǎn)無差異外，余各組時(shí)間點(diǎn)bFGF的蛋白表達(dá)均較青年組明顯減弱。牛麗紅［21］將急性腦梗死患者90例按入院時(shí)血糖、口服糖耐量試驗(yàn)（oral glucose tolerance test，OGTT）及糖尿病史等分為糖尿病性急性 腦 梗 死 組 （Diabetes－Acute cerebral infarction group，DACI組）；糖調(diào)節(jié)異常性急性腦梗死組（Impaired glucose regulation一Acute cerebral infarction group，IGACI組）；正常血糖性急性腦梗死組（Normal blood glucose－Acute cerebral infarction group，NGACI組），各組均30例。對(duì)急性腦梗死各組及正常對(duì)照組（Normal－Control group，NC組）30例均采用ELISSA檢測(cè)其外周血清中bFGF的含量，來比較DACI組、IGACI組、NGACI組及NC組血清bFGF表達(dá)水平的差異。結(jié)果顯示DACI組、IGACI組、NGACI組較NC組血清bFGF水平顯著升高，說明腦缺血可以誘導(dǎo)bFGF表達(dá)增強(qiáng)，這符合動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)論；DACI組、IGACI組血清bFGF水平無顯著性差異，說明bFGF表達(dá)水平與血糖水平無顯著相關(guān)性；DACI組、IGACI組血清bFGF水平顯著低于NGACI組，說明高血糖可加重急性腦梗死，造成bFGF的表達(dá)不足。有研究發(fā)現(xiàn)，無論在急性期還是恢復(fù)期，有高血壓史腦梗死組與無高血壓史腦梗死組之間bFGF水平差異無明顯，相關(guān)分析提示血清bFGF含量與血脂無明顯相關(guān)性，這表明bFGF與高血壓、高血脂關(guān)系不密切［18］。這提示我們應(yīng)用bFGF評(píng)價(jià)腦梗死嚴(yán)重程度時(shí)，需要考慮到患者年齡、性別、基礎(chǔ)疾病、免疫力及其他狀況，不同病理生理狀態(tài)的腦梗死患者其血清bFGF升高幅度可能有差異，因某些因素都可能影響患者血清bFGF水平。

5 無癥狀性腦梗死

無癥狀性腦梗死［22］包括無臨床短暫性腦缺血發(fā)作或腦梗死病史，而CT或（和）MRI等影像學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)有腦梗死灶，或有臨床腦梗死病史，但CT或（和）MRI發(fā)現(xiàn)了與臨床表現(xiàn)無關(guān)的非責(zé)任病灶。對(duì)于無癥狀性腦梗死，我們是否可以在適當(dāng)時(shí)間點(diǎn)通過檢測(cè)血清bFGF來及時(shí)診斷本病，提高腦梗死患者檢出率，進(jìn)而早期治療，延緩病情進(jìn)展，提高患者生活質(zhì)量，這還需進(jìn)一步研究。

6 展望

隨著臨床研究進(jìn)展，血清bFGF含量在腦梗死診斷方面的應(yīng)用價(jià)值不斷被重視。血清bFGF檢測(cè)方便易行，為不便行頭部CT或MRI檢查患者提供了另一種檢測(cè)方法，也為判斷腦梗死病人是否為急性期階段提供了一個(gè)新的臨床指標(biāo)。盡管目前單一的使用bFGF診斷腦梗死的體系還沒有建立起來，但其在腦梗死診斷及病情評(píng)估方面有很好的應(yīng)用前景。因此，有必要進(jìn)行深入細(xì)致的研究，以進(jìn)一步明確血清bFGF在腦梗死診斷方面的標(biāo)準(zhǔn)及嚴(yán)重程度分級(jí)。

［1］Gospodarowicz D，Chen J，Liu GM，et al.Isolation of brian fibroblast growth factor by heparin－Sepharose affinity chromatography：identity with pituitary fibroblast growth factor［J］.Proc Natl Acad Sci USA，1984，81（22）：6963.

［2］Hu MC，Wang YP，Cheng XB，et al.Human fibroblast growth factor－18stimulates fibroblast cell proliferation and is mapped to chromosome 14p11［J］.Oncogene，1999，18（16）：2635.

［3］Ding Xiao jie，Sun Feng，Wang Chao，etal.Neuronal apoptosis associated with basic fibroblast growth factor and its receptor following cerebral ischemia reperfusion.Journal of Clinical Rehabilitative［J］.Tissue Engineering Research，2007，11（14）：2776.

［4］Ren JM，KinKlestein SP.Time window of infarct reduction by intravenous basic fibroblast growth factor in focal cerebral ischemia［J］.Eur J Pharmacol，1997，327：11.

［5］李欣欣，戴德哉.堿性成纖維細(xì)胞因子對(duì)腦缺血的保護(hù)作用［J］.藥學(xué)進(jìn)展，2003，27（1）：23.

［6］Mattson MP，Barger SW.Programmed cell life：neuroprotective signal transduction and ischemic brian injury.In：Moskowitz MA，Caplan LR，eds.Cerebrovascular Diseases：The 19th Princeton Stroke Conference.Newton，MA ：Butterworth Heinemann，1995.271－290.

［7］Wagner J，Boniece I，DeMeo D，et al.Regulation of neuronal vulnerability to ischemia by peptide growth factors and intracellular second messenger systems：the role of protein kinase C and cAMP dependent protein kinase.In：Moskowitz MA，Caplan LR，eds.Cerebrovascular Diseases：The 19th Princeton Stroke Conference.Newton，MA：Butterworth Heinemann，1995，291－314.

［8］Mattson MP，Scheff SW.Endogenous neuroprotection factors and traumatic brian injury：mechanisms of action and implications for therapy［J］.J Neurotrauma，1994，11：3.

［9］Sun JQ，Sha B，Zhou WH，et al.Basic broblast growth factor stimulates the proliferation and differentiation of neural stem cells in neonatal rats after ischemic brain injury［J］.J Brain ＆Development，2009，31：331.

［10］Ma YP，Ma MM，Cheng SM，et al.Intranasal bFGF－induced progenitor cell proliferation and neuroprotection after transient focal cerebral ischemia［J］.J Neuroscience Letters 2008，437：93.

［11］Wang F，Tu GJ，Zhu Y.The effect of bFGF on glial differentiation of neural stem cells［J］.Journal of China Medical University，2012，41（3）：193.

［12］Fleish M，Billinger M，Eberli FR，etal.Physiologically assessed coronary collateral flow and intracoronary growth factor concentrations in patients with 12to 32vessel coronary artery disease［J］.Circulation，1999，100（19）：1945.

［13］馬岳峰，張茂，江觀玉，等堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)椅子保護(hù)兔全腦缺血再灌注損傷的研究［J］.中華急診醫(yī)學(xué)雜志，2006，15（1）：23.

［14］Li J，Li JP，Zhang X，et al.Expression of heparanase in vascular cells and astrocytes of the mouse brain after focal cerebral ischemia［J］.Brain Res，2012，1433：137.

［15］Horrigan MCG.Expression of basic fibroblast growth factor mRNA and protein in the human brain following ischemic stroke［J］.Angiogenesis，2005，8：53.

［16］Liu Y，Lu JB，Ye ZR.Permeability of injured blood brain barrier for exogenous bFGF and protection mechanism of bFGF in rat brain ischemia［J］.Neuropathology，2006，26：257.

［17］Liu Y，Lu JB，Ye ZR.Influence of Injured Blood Brain Barrier on the Permeability of 125I－bFG after Permanent Middl eCerebral Artery Occlusion of Rat［J］.Fudan Univ J Med Sci，2002，29（2）：79.

［18］Song SJ，Wu GP，Wen SQ，et al.The changes of serum bFGF in patients with acute cerebral infarction and its clinical significance［J］.Chin J Emerg Med，2003，12（6）：400.

［19］Huai LG，Li H，Min C，et al.Serial measurement of serum basic fibroblast growth factor in patients with acute cerebral infarction［J］.Neuroscience Letters，2006，393：56.

［20］Li JS，Zhou YL，Liu K，et al.angiogenesis of brain after ischemia/reperfusion injury of brain in aged rats and changes in expressions of basic fibroblast growth factor and transformation growth factor－β1［J］.Chin crit care med，2010，22（10）：583.

［21］NIU LH.Influence of Hyperglycemia on the Expression of Basic Fibroblast Growth Factor after Acute Cerebral Infarction，2011（4）：8.

［22］郭虎生，徐明安，王艷昕.無癥狀性腦梗死的臨床特征及中醫(yī)藥干預(yù)［J］.中醫(yī)藥臨床雜志，2012，24（3）：248.