李 艷 郭其森

肺癌是世界范圍內(nèi)腫瘤死亡的首要原因［1］。約80%的肺癌為非小細(xì)胞肺癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)，有半數(shù)以上的患者在診斷時(shí)已屬晚期，化療是提高晚期NSCLC生存期的主要手段。以鉑類(順鉑或卡鉑)為基礎(chǔ)聯(lián)合長(zhǎng)春堿類、吉西他濱或紫杉類等第三代化療藥物是目前的一線標(biāo)準(zhǔn)化療方案，盡管化療效果有明顯提高，但其有效率也只有30%～40%，5年生存率僅15%。腫瘤細(xì)胞對(duì)化療藥物耐藥一直以來(lái)是影響藥物療效和患者生存期的重要因素。由于腫瘤耐藥的出現(xiàn)，使得絕大部分腫瘤化療后很快出現(xiàn)復(fù)發(fā)和/或轉(zhuǎn)移，從而限制了許多化療藥物包括抗微管藥物(TBAs)在NSCLC治療中的臨床應(yīng)用。隨著藥物遺傳學(xué)和藥物基因組學(xué)的迅速發(fā)展，大量研究均證實(shí)腫瘤耐藥性與腫瘤組織基因表達(dá)密切相關(guān)。因此，提出了“個(gè)體化治療”這一概念，這也是近年來(lái)腫瘤治療所提倡的新理念。個(gè)體化治療是根據(jù)患者腫瘤組織生物學(xué)特征及藥物基因組學(xué)改變選擇特異的對(duì)其最佳的治療方案。

在個(gè)體化治療化療方案制定中，能夠提示化療藥物敏感性的分子標(biāo)記物具有重要意義。目前，影響NSCLC患者對(duì)化療敏感性的因素除了已被廣泛認(rèn)識(shí)的多藥耐藥(multi-drug resistant，MDR)基因、多藥耐藥相關(guān)蛋白(multi-drug resistant related protein，MRP)基因及它們產(chǎn)物表達(dá)的增加和拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ(TopoisomeraseⅡ，TopoⅡ)表達(dá)下降以外，近年來(lái)研究表明，細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中相關(guān)因子的表達(dá)異常、腫瘤細(xì)胞DNA修復(fù)的異常及其它相關(guān)基因的表達(dá)異常與肺癌耐藥的產(chǎn)生也存在密切聯(lián)系［2］。

抗微管類藥物(TBAs)是通過(guò)影響細(xì)胞微管的聚合和解聚而起到抗腫瘤作用。因此，研究微管表達(dá)水平與抗微管藥物療效的相關(guān)性對(duì)預(yù)測(cè)NSCLC對(duì)此類藥物化療敏感性，并對(duì)不同個(gè)體選擇抗微管藥物化療是近年來(lái)的一個(gè)重要研究進(jìn)展。臨床基礎(chǔ)研究和臨床研究證實(shí)，βⅢ-tubulin的表達(dá)與紫杉醇化療敏感性相關(guān)，可作為評(píng)價(jià)很多實(shí)體腫瘤(如肺癌、卵巢癌、前列腺癌、乳腺癌、不明原發(fā)部位的腫瘤等)預(yù)后的重要指標(biāo)［3］。

現(xiàn)就NSCLC患者腫瘤細(xì)胞中βⅢ-tubulin表達(dá)水平與抗微管類藥物耐藥的相關(guān)性研究進(jìn)展作一綜述。

一、βⅢ-tubulin

微管是是由微管蛋白二聚體(包括α-tubulin亞型和β-tubulin亞型)和微管相關(guān)蛋白組成的復(fù)合體，是細(xì)胞骨架的主要構(gòu)成成分，在維持細(xì)胞形態(tài)、傳遞信息及有絲分裂等方面具有重要作用。微管蛋白是微管的組成基礎(chǔ)，抗微管藥物就是對(duì)微管蛋白選擇性作用后，最終導(dǎo)致細(xì)胞死亡。人類細(xì)胞中存在著6種β-tubulin的同型，其中βⅢ-tubulin與作用于微管的化療藥物敏感性有最密切的關(guān)系。Verdier等［4］用等電點(diǎn)聚焦和質(zhì)譜儀聯(lián)合檢測(cè)耐紫杉醇細(xì)胞株的 β-tubulin，發(fā)現(xiàn)在6種同型中只有 βⅢ-tubulin表達(dá)增高，推測(cè)βⅢ-tubulin才是抗微管藥物耐藥的唯一標(biāo)志物。

二、抗微管藥物(TBAs)

TBAs是一種以β-tubulin為主要細(xì)胞靶點(diǎn)的抗癌藥物，是臨床上包括NSCLC、乳腺癌、卵巢癌和食管癌等許多腫瘤最常用的化療藥物之一，主要包括紫杉類(紫杉醇、多烯紫杉醇)和長(zhǎng)春堿類(長(zhǎng)春新堿、長(zhǎng)春瑞濱)。

抗微管類藥物作用相似，主要將腫瘤細(xì)胞阻滯在G2/M期，通過(guò)與微管蛋白結(jié)合，打斷微管的動(dòng)態(tài)平衡，抑制細(xì)胞分裂，最終引發(fā)細(xì)胞凋亡。但紫杉類和長(zhǎng)春堿類機(jī)制又不完全相同。目前進(jìn)入臨床的兩種紫杉類藥物紫杉醇和多西他賽作用于微管/微管蛋白系統(tǒng)的機(jī)制是:促進(jìn)微管蛋白裝配成微管，但抑制微管的解聚，從而導(dǎo)致微管束的排列異常，形成星狀體，使紡錘體失去正常功能，導(dǎo)致細(xì)胞死亡。而長(zhǎng)春堿類藥物則主要與微管蛋白β亞基結(jié)合，阻斷微管蛋白二聚體聚合，破壞有絲分裂，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞凋亡。

三、βⅢ-tubulin表達(dá)與抗微管藥物耐藥

基礎(chǔ)研究發(fā)現(xiàn)NSCLC細(xì)胞中βⅢ-tubulin存在異常表達(dá)，且βⅢ-tubulin異常表達(dá)與抗微管藥物敏感性有關(guān)，抑制βⅢ-tubulin表達(dá)可以提高藥物敏感性。臨床研究發(fā)現(xiàn)在抗微管類藥物治療的NSCLC患者中βⅢ-tubulin表達(dá)與臨床療效之間存在相關(guān)性。這些研究均提示βⅢ-tubulin可能是抗微管藥物產(chǎn)生高耐藥性的作用位點(diǎn)，在預(yù)測(cè)該類藥物療效方面可能具有重要價(jià)值。其中，大多數(shù)文獻(xiàn)報(bào)道高表達(dá)βⅢ-tubulin的患者對(duì)紫杉類、長(zhǎng)春瑞濱反應(yīng)性較低，生存收益較差。但也有一些研究得到了與之不同的結(jié)果。

1.βⅢ-tubulin表達(dá)與紫杉類藥物耐藥相關(guān)性:Burkhart等［5］發(fā)現(xiàn)在人類肺癌細(xì)胞中βⅢ-tubulin高表達(dá)與紫杉醇耐藥有關(guān)。與此一致的是，Wehbe等［6］也報(bào)道了在對(duì)紫杉醇耐藥的細(xì)胞中，βⅢ-tubulin水平明顯增加。Kavallaris等［7］將對(duì)紫杉醇耐藥的肺癌細(xì)胞暴露于針對(duì)βⅢ-tubulin的抗轉(zhuǎn)錄寡核苷酸中，降低了40% ～50%βⅢ-tubulin mRNA及蛋白水平，同時(shí)，紫杉醇的敏感性增加了39%。Gan等［8］應(yīng)用小干擾 RNA(siRNA)技術(shù)，在兩種肺癌細(xì)胞系中沉默βⅢ-tubulin的表達(dá)。用這種方法抑制βⅢ-tubulin的表達(dá)明顯增高了這些細(xì)胞系對(duì)紫杉醇和對(duì)其他抗微管藥物(長(zhǎng)春新堿和長(zhǎng)春瑞濱)的敏感性。這個(gè)研究也同時(shí)證明了βⅢ-tubulin沉默細(xì)胞對(duì)DNA毒性化療藥物包括順鉑、多柔比星和愛(ài)博霉素的敏感性有所提高。在這個(gè)研究的基礎(chǔ)上，McCarroll等［9］進(jìn)一步證實(shí)了 NSCLC細(xì)胞中沉默βIII-tubulin的表達(dá)導(dǎo)致對(duì)紫杉醇和順鉑的敏感性提高，并應(yīng)用小鼠模型發(fā)現(xiàn)沉默βⅢ-tubulin的表達(dá)可降低致癌性。

這些臨床基礎(chǔ)研究表明βⅢ-tubulin的表達(dá)水平與紫杉醇敏感性呈負(fù)相關(guān)性，βⅢ-tubulin高表達(dá)者，化療敏感性低，提示對(duì)紫杉醇耐藥。βⅢ-tubulin表達(dá)的改變可能是紫杉醇產(chǎn)生高耐藥性的作用位點(diǎn)。

Rosell等［10］用定量 PCR法檢測(cè)75例 NSCLC患者活檢石蠟組織中βⅢ-tubulin mRNA的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)低表達(dá)βⅢ-tubulin的患者對(duì)紫杉醇敏感性高，療效好(P＜0.05)，其疾病進(jìn)展時(shí)間(time to progression，TTP)亦有延長(zhǎng)趨勢(shì)。Sève 等［11］選擇91例Ⅲ期或Ⅳ期NSCLC患者，用免疫組化法測(cè)定βⅢ-tubulin的表達(dá)，其中47例紫杉醇化療的患者中，化療有效率、無(wú)進(jìn)展生存期(progression free survival，PFS)、總生存期(overall survival，OS)均與βⅢ-tubulin表達(dá)水平有關(guān)，總有效率為37.5%。其中低表達(dá)βⅢ-tubulin患者有效率較高(61.9%vs 12.5%，P ＜0.001)，且獲得了較長(zhǎng)的 PFS 和 OS(P=0.003)，而在其余44例非抗微管類藥物化療患者中未發(fā)現(xiàn)這種差別。Dumontet等［12］觀察了19例含紫杉醇類方案化療的NSCLC患者，其腫瘤細(xì)胞中βⅢ-tubulin高表達(dá)者，化療的有效率較低(2/9 vs 6/10)，PFS 較短(41 d vs 288 d;P=0.02)。Azuma等［13］對(duì)16例應(yīng)用紫杉醇與卡鉑聯(lián)合化療而復(fù)發(fā)的NSCLC患者進(jìn)行了分析，發(fā)現(xiàn)了βⅢ-tubulin低表達(dá)患者PFS顯著延長(zhǎng)(40 w vs 35 w;P=0.031)，但OS并沒(méi)有差別(78 w vs 58 w，P=0.087)。隨后該作者在34例順鉑與多西他賽聯(lián)合化療并同步放療的局部進(jìn)展期的患者中發(fā)現(xiàn)βⅢ-tubulin與療效之間相關(guān)性并沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義［14］。

這些臨床研究結(jié)果表明，βⅢ-tubulin水平與含紫杉醇的化療療效及預(yù)后呈負(fù)相關(guān)，提示 βⅢ-tubulin與紫杉醇化療耐藥性呈正相關(guān)，可能是腫瘤細(xì)胞中NSCLC患者紫杉醇化療療效的預(yù)測(cè)因子。

楊俊全等［15］通過(guò)回顧性分析75例接受以紫杉類化療的Ⅳ期NSCLC患者的臨床病理資料，發(fā)現(xiàn)與βⅢ-tubulin高表達(dá)者相比，βⅢ-tubulin低表達(dá)患者化療有效率較高(48.9%vs 25.0%，P=0.036)，進(jìn)展率低(6.4%vs 25.0%)(P=0.037)，且有較長(zhǎng)的OS(15 m vs 12 m)和 PFS(11 m vs 8 m)，P=0.018。這個(gè)研究證實(shí)了 βⅢ-tubulin高表達(dá)的NSCLC患者對(duì)紫杉類藥物耐藥且預(yù)后不良。Hayashi等［16］分析58例NSCLC完全切除術(shù)后的組織發(fā)現(xiàn)，表達(dá)明顯升高的βⅢ-tubulin與多西他賽耐藥性之間呈顯著正相關(guān)(P=0.0025)，而與吉西他濱耐藥無(wú)明顯相關(guān)性(P=0.1465)。該研究表明在完全切除的非小細(xì)胞患者中，βⅢ-tubulin的表達(dá)在多西他賽的耐藥性方面具有重要預(yù)測(cè)價(jià)值。Wang等［17］運(yùn)用實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)分析收集到的37例惡性胸腔積液中癌細(xì)胞的βⅢ-tubulinmRNA的表達(dá)水平，并用ATP-TCA法測(cè)定胸腔積液中存活的癌細(xì)胞對(duì)多西他賽的敏感性。發(fā)現(xiàn)在非小細(xì)胞肺癌患者惡性胸腔積液中βⅢ-tubulin表達(dá)越低其對(duì)多西他賽的敏感性則越高。這一結(jié)果證實(shí)了βⅢ-tubulin的表達(dá)水平與多西他賽敏感性之間的負(fù)相關(guān)性，這突出了βⅢ-tubulin對(duì)于惡性胸腔積液在制定進(jìn)一步化療方案中的潛在的預(yù)測(cè)作用。

以上這些國(guó)內(nèi)外的研究結(jié)果幾乎均顯示βⅢ-tubulin高表達(dá)對(duì)紫杉醇類藥物耐藥，而低表達(dá)則對(duì)紫杉醇類藥物敏感，提示βⅢ-tubulin可以作為選擇紫杉醇類藥物輔助化療的分子標(biāo)志物。對(duì)βⅢ-tubulin高表達(dá)者可考慮選擇其他藥物替代。但由于樣本有限且大都是回顧性研究，這些結(jié)果必須慎重解釋。

2.βⅢ-tubulin表達(dá)與長(zhǎng)春堿類藥物耐藥相關(guān)性:長(zhǎng)春堿類是作用于微管的另一種抗微管藥物，國(guó)內(nèi)外研究發(fā)現(xiàn)非小細(xì)胞肺癌患者βⅢ-tubulin的表達(dá)與長(zhǎng)春堿類藥物化療敏感性之間同樣有密切關(guān)系

Rosell等［18］檢測(cè)了75例 NSCLC患者中 βⅢ-tubulin mRNA表達(dá)水平，發(fā)現(xiàn)在接受長(zhǎng)春堿/順鉑化療的患者中，βⅢ-tubulin mRNA低表達(dá)患者化療的有效率較高，而其TTP也有延長(zhǎng)的趨勢(shì)，提示βⅢ-tubulin的表達(dá)水平可作為預(yù)測(cè)NSCLC患者對(duì)長(zhǎng)春堿化療療效的重要指標(biāo)。Gan等［19］運(yùn)用siRNA技術(shù)降低兩種NSCLC細(xì)胞株(NCI-H460和Calu-6)中βⅢ-tubulin的表達(dá)，結(jié)果這兩種細(xì)胞株對(duì)長(zhǎng)春瑞濱的敏感性均明顯提高。王峻等［20］入選35例NSCLC患者，在19例長(zhǎng)春瑞濱聯(lián)合鉑類化療的患者中，發(fā)現(xiàn)有效患者與無(wú)效患者的腫瘤組織中βⅢ-tubulin mRNA和βⅢ-tubulin蛋白表達(dá)有顯著性差異(P＜0.01)。而在16例吉西他濱聯(lián)合鉑類化療的患者中，則無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。該研究結(jié)果表明，NSCLC患者腫瘤組織中βⅢ-tubulin高表達(dá)者對(duì)長(zhǎng)春瑞濱的敏感性低，提示耐藥性高。

Sève等［21］在 93 例接受長(zhǎng)春瑞濱方案的Ⅲ-Ⅳ期NSCLC患者中發(fā)現(xiàn)，βⅢ-tubulin高表達(dá)和低表達(dá)者有效率、PFS和中位生存期分別為22.7%、89d、162d 和34.4%、208 d、306 d，高表達(dá)組均顯著低于低表達(dá)組。結(jié)果提示βⅢ-tubulin的高表達(dá)可能意味著應(yīng)用長(zhǎng)春瑞濱的療效差，提示對(duì)長(zhǎng)春瑞濱耐藥。然而該作者［22］在回顧性分析了NCIC JBR.10實(shí)驗(yàn)中265例ⅠB-Ⅱ期的NSCLC患者的標(biāo)本后得出了相反地結(jié)果。研究者發(fā)現(xiàn)，βⅢ-tubulin高表達(dá)的65例觀察(未化療)患者與68例長(zhǎng)春瑞濱聯(lián)合順鉑方案化療患者相比，后者明顯改善了無(wú)復(fù)發(fā)生存期(progression free survival，RFS)和 OS(P=0.002);而在低表達(dá)的60例觀察患者和72例化療患者中RFS、OS均無(wú)顯著性差異(P=0.78)。長(zhǎng)春瑞濱聯(lián)合順鉑輔助化療使高表達(dá)βⅢ-tubulin患者RFS和OS獲益比在低表達(dá)者更多。對(duì)產(chǎn)生這種不同結(jié)果原因的解釋有:首先可能是βⅢ-tubulin表達(dá)本身對(duì)早、晚期的NSCLC就存在著不同的預(yù)測(cè)價(jià)值;其次是高、低表達(dá)界定的不同標(biāo)準(zhǔn)及樣本量的限制都可能是造成結(jié)果不同的原因。另外也反映了βⅢ-tubulin的表達(dá)對(duì)長(zhǎng)春瑞濱的預(yù)測(cè)作用可能不如紫杉類。Hirai等［23］為探究βⅢ-tubulin是否為長(zhǎng)春瑞濱化療敏感性的預(yù)測(cè)因子，進(jìn)行了體外藥物敏感性試驗(yàn)，長(zhǎng)春瑞濱的平均坡度因子、半數(shù)有效量和最大有效率分別是(8.7 ±5.4)，(39.0 ±17.9)μg/ml和(85.5 ±5.1)%，平均抑制率是(26.4 ±16.2)%，平均H評(píng)分是1.09±1.07，平均抑制率與TUBB3表達(dá)明顯相關(guān)(r=0.27，P=0.03)，并且在 βⅢ-tubulin陽(yáng)性表達(dá)的標(biāo)本中比在陰性標(biāo)本中明顯增高(P=0.003)。該實(shí)驗(yàn)中βⅢ-tubulin高表達(dá)的腫瘤對(duì)長(zhǎng)春瑞濱表現(xiàn)出更強(qiáng)的化療敏感性。最終，這個(gè)研究支持了JBR.10的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

四、Meta分析

以上研究均是基礎(chǔ)研究或者是小樣本臨床研究，近幾年，很多專家對(duì)以往的多項(xiàng)獨(dú)立臨床研究進(jìn)行了系統(tǒng)的、定量的綜合性分析。其優(yōu)點(diǎn)是通過(guò)增大樣本含量來(lái)增加結(jié)論的可信度，解決研究結(jié)果的不一致性。

Reiman 等［24］對(duì) JBR.10，ANITA，CALGB9633和IALT四個(gè)隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)進(jìn)行了交叉驗(yàn)證。比較了來(lái)自這四個(gè)實(shí)驗(yàn)的術(shù)后輔助化療與單純手術(shù)切除(觀察組)的NSCLC患者之間的療效。未能證實(shí)βⅢ-tubulin的預(yù)后效應(yīng)。沈紅等［25］選取5篇英文和3篇中文對(duì)晚期非小細(xì)胞肺癌患者βⅢ-tubulin表達(dá)與抗微管類化療藥有效性的文獻(xiàn)進(jìn)行綜合定量評(píng)價(jià)，共入選457例。分別分析了紫杉醇、長(zhǎng)春瑞濱治療組βⅢ-tubulin高表達(dá)與低表達(dá)患者的有效率及合并優(yōu)勢(shì)比，發(fā)現(xiàn)紫杉類化療藥在βⅢ-tubulin高表達(dá)的晚期非小細(xì)胞肺癌患者中敏感性顯著下降，這有助于個(gè)體化療方案的制定。Zhang等［26］2012年通過(guò)分析來(lái)自10個(gè)不同研究的552例患者βⅢ-tubulin的表達(dá)水平及其對(duì)紫杉醇和長(zhǎng)春瑞賓的客觀緩解率和中位生存期。在βⅢ-tubulin低表達(dá)或陰性表達(dá)的患者中紫杉醇/長(zhǎng)春瑞濱為基礎(chǔ)的化療的客觀緩解率明顯較高(OR=0.28;95%CI，0.20～0.41;P ＜0.00001)。βⅢ-tubulin 低表達(dá)的患者與高表達(dá)的患者相比，中位生存期明顯較長(zhǎng)(MR=1.40;CI，0.89 ～ 0.90;P ＜ 0.00001)。NSCLC患者中，紫杉醇治療比長(zhǎng)春瑞濱治療得到了更好的臨床效果 (Chi2=3.69，P=0.05)。這個(gè)Meta分析結(jié)果使得βⅢ-tubulin mRNA在檢測(cè)非小細(xì)胞肺癌患者對(duì)紫杉醇或長(zhǎng)春瑞濱為基礎(chǔ)的化療敏感性方面的重要價(jià)值得到支持。

然而，始終沒(méi)有一個(gè)大樣本、系統(tǒng)的評(píng)估紫杉類或長(zhǎng)春堿藥物為基礎(chǔ)的化療耐藥與βⅢ-tubulin高表達(dá)之間關(guān)系的文獻(xiàn)，并且，大多數(shù)研究都是評(píng)價(jià)紫杉醇或者長(zhǎng)春瑞濱其中一種藥物為基礎(chǔ)的聯(lián)合化療與βⅢ-tubulin表達(dá)之間的相關(guān)性。目前還沒(méi)有確切的數(shù)據(jù)可以顯示以某一種抗微管藥物單藥治療的晚期非小細(xì)胞肺癌患者β-tubulin的表達(dá)狀況及患者的療效。因此，對(duì)于β-tubulin的表達(dá)能否預(yù)測(cè)抗微管藥物單藥治療的晚期非小細(xì)胞肺癌的藥物敏感性和療效還不清楚。

一個(gè)靶點(diǎn)并不能解釋所有的化療療效差異，一些其他生物靶點(diǎn)，比如ERCC1蛋白和p53與鉑類化療療效相關(guān)，而βⅢ-tubulin與抗微管類藥物療效也相關(guān)。近幾年，國(guó)內(nèi)外也進(jìn)行了很多聯(lián)合檢測(cè)兩個(gè)或多個(gè)非小細(xì)胞肺癌組織中耐藥因子的表達(dá)的研究，其目的均在于有益于化療方案的個(gè)體化選擇、化療療效及預(yù)后的判斷［27-28］。

五、結(jié)語(yǔ)

目前關(guān)于NSCLC中βⅢ-tubulin的表達(dá)與抗微管類藥物耐藥相關(guān)性的研究中，大多數(shù)結(jié)果支持βⅢ-tubulin的表達(dá)與抗微管類藥物耐藥呈正相關(guān)，且與預(yù)后呈負(fù)相關(guān)。但這些研究幾乎均是回顧性研究，尚需大樣本前瞻性隨機(jī)對(duì)照臨床試驗(yàn)的結(jié)果支持。

隨著功能性基因組學(xué)的發(fā)展，研究者對(duì)腫瘤發(fā)生和腫瘤治療的機(jī)制有了更深層次的認(rèn)識(shí)，這使得對(duì)每一個(gè)肺癌患者選擇最佳最適合的治療方案成為可能。個(gè)體化化療在NSCLC治療中已經(jīng)顯示出良好的效果和應(yīng)用前景，給腫瘤治療帶來(lái)了曙光，這將是腫瘤化療的發(fā)展方向。只有在腫瘤分子標(biāo)志物與腫瘤生物學(xué)特性方面繼續(xù)不斷地探索以獲得更多的循證醫(yī)學(xué)證據(jù)，才能指導(dǎo)治療以實(shí)現(xiàn)個(gè)體化治療的飛躍。

1 錢桂生.肺癌不同病理類型發(fā)病率的變化情況及其原因［J］.中華肺癌疾病雜志:電子版，2011，4(1):1-5.

2 Sève P，Dumontet C.Chemoresistance in non-small cell lung cancer［J］.Curr Med Chem Anti cancer Agents，2005，5(1):73-88.

3 Sève P，Dumontet C.Is classⅢ beta-tubulin a predictive factor in patients receiving tubulin-binding agents?［J］ .Lancet Oncol，2008，9(2):168-175.

4 Verdier-Pinard P，Wang F，Martello L，et al.Analysis of tubulin isotypes and mutations from taxol-resistant cells by combined isoelectrofocusingand mass spectrometry［J］.Biochemistry，2003，42(18):5349-5357.

5 Burkhart CA，Kavallaris M，Band Horwitz S.The role of β-tubulin isotypes in resistance to antimitotic drugs［J］.Biochim Biophys Acta，2001，1471(2):1-9.

6 Wehbe H，Kearney CM，Pinney KG.Combretastatin A-4 resistance in H640 human lung carcinomas demonstrates distinctive alterations in β-tubulin isotype expression［J］.Anticancer Res，2005，25(6B):3865-3870.

7 Kavallaris M，Burkhart CA，Horwitz SB.Antisense oligonucleotides to class Ⅲ β-tubulin sensitize drug-resistant cells to Taxol.［J］.Br J Cancer，1999，80(7):1020-1025.

8 Gan PP，Pasquier E，Kavallaris M.ClassⅢ beta-tubulin mediates sensitivity to chemotherapeutic drugs in non small cell lung cancer［J］.Cancer Res，2007，67(19):9356-9363.

9 McCarroll JA，Gan PP，Liu M，et al.betaⅢ-tubulin is a multifunctional protein involved in drug sensitivity and tumorigenesis in non-small cell lung cancer［J］.Cancer Res，2010，70(12):4995-5003.

10 Rosell R，Scagliotti G，Danenberg KD，et al.Transcripts in pretreatment biopsies from a three-arm randomized trial in metastatic non-smallcell lung cancer［J］.Oncogene，2003，22(23):3548-3553.

11 Sève P，Mackey J，Isaac S，et al.Class Ⅲ beta-tubulin expression in tumor cells predicts response and outcome in patients with non–small cell lung cancer receiving paclitaxel［J］.Mol Cancer Ther，2005，4(12):2001-2007.

12 Dumontet C，Isaac S，Souquet PJ，et al.Expression of classⅢ beta tubulin in non-small cell lung cancer is correlated with resistance to taxane chemotherapy［J］.Bull Cancer，2005，92(2):E25-E30.

13 Azuma K，Sasada T，Kawahara A，et al.Expression of ERCC1 and classⅢbeta-tubulin in non-small cell lung cancer patients treated with carboplatin and paclitaxel［J］.Lung Cancer，2009，64(3):326-333.

14 Azuma K，Sasada T，Kawahara A，et al.Expression of ERCC1 and classⅢbeta-tubulin in non-small cell lung cancer patients treated with a combination of cisplatin/docetaxel and concurrent thoracic irradiation［J］.Cancer Chemother Pharmacol，2009，64(3):565-573.

15 楊俊全，高獻(xiàn)書，劉宏俠，等.Ⅳ期非小細(xì)胞肺癌組織βⅢ-tubulin表達(dá)與紫杉類化療耐藥相關(guān)［J］.第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)，2008，29(10):930.

16 Hayashi Y，Kuriyama H，Umezu H，et al.ClassⅢ beta-tubulin expression in tumor cells is correlated with resistance to docetaxel in patients with completely resected non-small-cell lung cancer［J］.Intern Med，2009，48(4):203-208.

17 Wang LF，Yin HT，Qian XP，et al.beta-Tubulin Ⅲ mRNA expression and docetaxel sensitivity in non-small cell lung cancer［J］.Clin Invest Med，2009，32(6):E278.

18 Rosell R，Scagliotti G，Danenberg KD，et al.Transcripts in pretreatment biopsies from a three-arm randomized trial in metastatic non-smallcell lung cancer［J］.Oncogene，2003，22(23):3548-3553.

19 Gan PP，Pasquier E，Kavallaris M.ClassⅢ beta-tubulin mediates sensitivity to chemotherapeutic drugs in non small cell lung cancer［J］.Cancer Res，2007，67(19):9356-9363.

20 王 峻，蒲驍麟，俞明峰，等.β-tubulin-Ⅲ基因的表達(dá)與長(zhǎng)春瑞濱治療非小細(xì)胞肺癌療效關(guān)系的研究［J］.臨床腫瘤學(xué)雜志，2008，14(3):205-208.

21 Sève P，Isaac S，Trèdan O，et al.Expression of class Ⅲ betatubulin is predictive of patient outcome in patients with non-small cell lung cancer receiving vinorelbine-based chemotherapy［J］.Clin Cancer Res，2005，11(15):5481-5486.

22 Sève P，Lai R，Ding K，et al.ClassⅢ beta-tubulin expression and benefitfrom adjuvantcisplatin /vinorelbine chemotherapy in operable non-small cell lung cancer:analysis of NCIC JBR.10［J］.Clin Cancer Res，2007，13(3):994-999.

23 Hirai Y，Yoshimasu T，Oura S，et al.Is classⅢ beta-tubulin a true predictive marker of sensitivity to vinorelbine in non-small cell lung cancer?Chemosensitivity data evidence［J］.Anticancer Res，2011，31(3):999-1005.

24 Reiman T，Lai R，Veillard AS，et al.Cross-validation study of classⅢbeta-tubulin as a predictive marker for benefit from adjuvant chemotherapy in resected non-small-cell lung cancer:analysis of four randomized trials［J］.Ann Oncol，2012，23(1):86-93.

25 沈 紅，蔡健康，沈 立，等.晚期非小細(xì)胞肺癌β-微管蛋白Ⅲ表達(dá)與抗微管藥敏感性Meta分析［J］.循證醫(yī)學(xué)，2011，11(2):102-106.

26 Zhang HL，Ruan L，Zheng LM，et al.Association between classⅢβ-tubulin expression and response to paclitaxel/vinorebine-based chemotherapy for non-small cell lung cancer:a meta-analysis［J］.Lung Cancer，2012，77(1):9-15.

27 Joerger M，deJong D，Burylo A，et al.Tubulin，BRCA1，ERCC1，Abraxas，RAP80 mRNA expression，p53/p21 immunohistochemistry and clinical outcome in patients with advanced non small-cell lung cancer receiving first-line platinum-gemcitabine chemotherapy［J］.Lung Cancer，2011，74(2):310-317.

28 Kang CH，Jang BG，Kim DW，et al.Differences in the expression profiles of excision repair crosscomplementation group 1，x-ray repair crosscomplementation group 1，and betaⅢ-tubulin between primary non-small cell lung cancer and metastatic lymph nodes and the significance in mid-term survival［J］.Thorac Oncol，2009，4(11):1307-1312.