盛燕茶 楊 新

（南通大學(xué)體育科學(xué)學(xué)院，江蘇 南通 226007）

1 前言

據(jù)第六次全國人口普查數(shù)據(jù)顯示，截至2010年11月1日，我國60歲以上的老年人達(dá)1.78億，占總?cè)丝诘?3.26％，其中65歲以上的老年人1.19億人，占總?cè)丝诘?.87％。人口老齡化已成為我國各級黨政和社會關(guān)注的重點(diǎn)對象。相關(guān)研究結(jié)果表明衰老與免疫機(jī)能進(jìn)行性紊亂的發(fā)生在很多方面有關(guān)，而老年人隨著年齡的不斷增長，機(jī)體機(jī)能狀態(tài)及其免疫功能卻日趨下降，因此如何提高老年人機(jī)能水平及其免疫功能，是當(dāng)今國內(nèi)外學(xué)者所關(guān)注的重大問題。為此本研究選取NK細(xì)胞進(jìn)行研究，NK細(xì)胞又稱為自然殺傷性細(xì)胞是瑞典免疫學(xué)家Kiessling等在20世紀(jì)70年代發(fā)現(xiàn)的一類大顆粒淋巴細(xì)胞（LGL），是人體先天免疫的核心組成部分，具有抗腫瘤、抗感染和免疫調(diào)節(jié)等功能。眾多研究表明運(yùn)動不僅可以預(yù)防由年老而引發(fā)的心血管和新陳代謝疾病，而且，也可以對免疫機(jī)能發(fā)揮深遠(yuǎn)的影響，為此本文試圖以老年人為研究對象，以木蘭拳運(yùn)動為鍛煉方式，綜合研究木蘭拳鍛煉對老年人的NK細(xì)胞影響作用，為木蘭拳運(yùn)動以及全民健身計劃的可持續(xù)發(fā)展，提供實(shí)驗(yàn)與理論參考。

2 研究對象與方法

2.1 研究對象

本次實(shí)驗(yàn)隨機(jī)選取南通市區(qū)虹橋社區(qū)60-65歲的老年人38名為實(shí)驗(yàn)對象，實(shí)驗(yàn)前經(jīng)醫(yī)院健康檢測，無傳染病、慢性病、嚴(yán)重器質(zhì)性病變等病理狀況，且均為無經(jīng)常鍛煉史者。實(shí)驗(yàn)對象的基本情況見表1。

表1 實(shí)驗(yàn)對象基本情況（n=38）

2.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)計

實(shí)驗(yàn)對象進(jìn)行為期6個月的木蘭拳鍛煉，每周5次，每次45分鐘，反復(fù)練習(xí)木蘭拳規(guī)定套路。運(yùn)動強(qiáng)度以中等強(qiáng)度為鍛煉標(biāo)準(zhǔn)，即以60-80％最大心率為靶心率。

2.3 測試指標(biāo)及測定方法

早晨空腹安靜狀態(tài)下，抽取肘靜脈血2ml，置于肝素抗凝的無菌試管，4小時內(nèi)以淋巴細(xì)胞分離液（1.077g/mg）分離單個核細(xì)胞（MNC）檢測血漿NK細(xì)胞活性。

NK細(xì)胞活性的測定：采用LDH釋放法。MNC洗滌后以RPMII640調(diào)濃度為5×106/ml作為效應(yīng)細(xì)胞；靶細(xì)胞為傳代培養(yǎng)24-48小時的K562細(xì)胞，洗滌后制備5×105/ml靶細(xì)胞懸液。實(shí)驗(yàn)設(shè)NK細(xì)胞效應(yīng)管（效應(yīng)細(xì)胞、靶細(xì)胞各100μl），以1％NP-40（Nonidet P40，F(xiàn)lukaAG）破壞靶細(xì)胞作最大釋放管。最小釋放管（靶細(xì)胞與培養(yǎng)液），培養(yǎng)液（200μl）作對照管。分別加入消毒的eppendorf管中，5％CO2 37°C孵育22小時，3000rmp離心3分鐘，各管取上清液100μl分別加入96孔酶標(biāo)板（Nunc）中，加入LDH底物液100μl/孔，立即用DG3022型酶聯(lián)免疫檢測儀，選擇490nm波長測吸光度A，每2分鐘測一次，連續(xù)測10分鐘，計算NK活性。

2.4 數(shù)理統(tǒng)計法

所有數(shù)據(jù)運(yùn)用國際通用統(tǒng)計軟件SPSS13.0進(jìn)行單因素方差分析、獨(dú)立樣本T檢驗(yàn)以及配對T檢驗(yàn)等方法進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析。

3 研究結(jié)果

本研究屬小樣本實(shí)驗(yàn)研究，有必要對數(shù)據(jù)進(jìn)行正態(tài)分布檢驗(yàn)，經(jīng)檢驗(yàn)鍛煉前，實(shí)驗(yàn)對象NK細(xì)胞活性呈正態(tài)分布，同時經(jīng)單因素方差分析（見表2、表3）：鍛煉前NK細(xì)胞活性參數(shù)間差異不具統(tǒng)計學(xué)意義，故可以進(jìn)行實(shí)驗(yàn)前后配對比較T檢驗(yàn)。

表2 木蘭拳鍛煉前NK細(xì)胞活性的單因素方差分析表

經(jīng)過6個月木蘭拳鍛煉后實(shí)驗(yàn)對象在實(shí)驗(yàn)前后NK細(xì)胞活性具有非常顯著性差異，具體見下表3。

表3 6個月木蘭拳鍛煉前后各組NK細(xì)胞活性比較表

4 分析與討論

4.1 六個月木蘭拳鍛煉對老年人NK細(xì)胞活性的影響

木蘭拳誕生于20世紀(jì)80年代的上海，它吸取了部分舞蹈、體操動作而創(chuàng)編成武舞相融、輕柔健美、富有時代氣息的新型武術(shù)健身運(yùn)動項(xiàng)目，已成為一項(xiàng)具有很高的健身價值并深受廣大群眾喜愛的體育運(yùn)動。在本次實(shí)驗(yàn)過程中以中等強(qiáng)度為鍛煉標(biāo)準(zhǔn)（以60-80％最大心率為靶心率），以有氧運(yùn)動作為運(yùn)動方式，實(shí)驗(yàn)期間每周鍛煉5次，每次鍛煉時時間為45分鐘左右，實(shí)驗(yàn)進(jìn)行6個月。經(jīng)過6個月鍛煉，木蘭拳鍛煉對老年人機(jī)體產(chǎn)生了良好的刺激作用，使外周血NK細(xì)胞活性顯著增強(qiáng)，具有非常顯著性差異（P＜0.001），本次實(shí)驗(yàn)結(jié)論其他學(xué)者的研究結(jié)論相一致，例：Crist等對一組老年婦女進(jìn)行16周中等強(qiáng)度的運(yùn)動訓(xùn)練后，發(fā)現(xiàn)NK細(xì)胞活性增加33％［1］。Nieman對12名良好身體條件的年齡在65－84歲的女性和32名久坐的年齡在67－85歲的女性安靜時T細(xì)胞增殖應(yīng)答和NK細(xì)胞活性進(jìn)行比較。前者已經(jīng)進(jìn)行5年每天1h的運(yùn)動，并且參加比賽，相比后者，在安靜時NK細(xì)胞活性增加54％。［2］同時Nieman等還發(fā)現(xiàn)對一組中年婦女進(jìn)行6周中等強(qiáng)度的運(yùn)動訓(xùn)練（60％VO2max）后，發(fā)現(xiàn)NK細(xì)胞活性增加57％［3］，以及國內(nèi)學(xué)者李志清的報道，長期練習(xí)吳氏太極拳的8名老年男性，打一套拳后即刻（20分鐘）NK細(xì)胞活性上升67.29％。打拳后2小時NK細(xì)胞指標(biāo)值有相當(dāng)程度的恢復(fù)，但長期堅持練拳必然會對免疫系統(tǒng)產(chǎn)生良好的適應(yīng)刺激［4］。

4.2 六個月木蘭拳鍛煉對不同性別老年人NK細(xì)胞活性的影響

六個月木蘭拳鍛煉后男女受試者NK細(xì)胞活性都發(fā)生顯著變化，但從上表3中可以發(fā)現(xiàn)男性受試者NK細(xì)胞活性增加的程度要低于女性受試者增加的程度，兩者之間具有非常顯著性差異，本次實(shí)驗(yàn)說明長期木蘭拳鍛煉對不同性別中老年人免疫機(jī)能都有不同程度的改善作用，相對于男性而言對女性受試者影響更大。本研究認(rèn)為，可能是由以下二個方面的原因造成的，其一，可能是因?yàn)槟信g內(nèi)分泌的差異造成的，女性雌激素、前列腺素的分泌比男性高［5］，有研究表明兒茶酚胺、糖皮質(zhì)激素、前列腺素對免疫應(yīng)答都有抑制作用。而生長激素、甲狀腺激素、胰島素和雌激素能促進(jìn)免疫應(yīng)答［6］，這可能是女性受試者免疫力提高的原因。其二，可能因?yàn)槟信男睦硪蛩夭町愃斐傻?，同時也有可能因?yàn)槭茉囌咚幍募彝キh(huán)境以及他們的身體狀況、應(yīng)激反應(yīng)程度、以及男性受試者吸煙等因素都會對試驗(yàn)的結(jié)果產(chǎn)生影響。

4.3 情緒與NK細(xì)胞活性的關(guān)系

研究表明除了運(yùn)動對NK細(xì)胞的活性產(chǎn)生影響作用外，不同的情緒狀態(tài)也可以影響NK細(xì)胞的活性產(chǎn)生不同的影響，良好的情緒狀態(tài)可以使大腦及下丘腦等神經(jīng)系統(tǒng)通過激素、神經(jīng)肽、神經(jīng)遞質(zhì)等信息分子，作用于內(nèi)分泌系統(tǒng)從而影響免疫細(xì)胞，使其增強(qiáng)免疫功能，例垂體分泌的β-內(nèi)啡肽可增強(qiáng)淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)化功能，加強(qiáng)NK細(xì)胞的殺傷能力，同時還能增加NK細(xì)胞產(chǎn)生干擾素的能力，劉素杰等人的研究成果也證實(shí)了情緒對NK細(xì)胞的活性有影響作用。［7］本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，經(jīng)過6個月的木蘭拳鍛煉受試者血液中NK細(xì)胞活性顯著增加，也有很可能與木蘭拳運(yùn)動促進(jìn)練習(xí)者良好情緒的產(chǎn)生有關(guān)。因?yàn)槟咎m拳運(yùn)動過程中始終有優(yōu)美的音樂相伴奏，而音樂是以節(jié)奏、旋律調(diào)式等構(gòu)成的聽覺藝術(shù)，對人體運(yùn)動和人的感情、情緒變化有著直接的影響，木蘭拳鍛煉時一般都配以悠揚(yáng)的古典音樂這很容易使鍛煉者產(chǎn)生共鳴，使鍛煉者陶醉其中，從而在一定程度上疏導(dǎo)了參與者的情緒，因此，本次實(shí)驗(yàn)受試者良好的情緒以及愉悅的精神狀態(tài)也是增加NK細(xì)胞活性，調(diào)節(jié)機(jī)體免疫平衡，進(jìn)而對抗腫瘤發(fā)生的可能機(jī)制。

5 結(jié)論

通過連續(xù)6個月中等強(qiáng)度木蘭拳的鍛煉，受試者的NK細(xì)胞活性明顯高于練習(xí)之前，與練習(xí)之前具有非常顯著差異，本次實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)了長期從事中等強(qiáng)度的木蘭拳鍛煉能有效地提高NK細(xì)胞的活性，從而可以調(diào)節(jié)老年人的免疫平衡，對抗腫瘤的發(fā)生和形成。

［1］Crist DM，Mackinnon LT，Thompson RF，et al.Physical exercise in-crease natural killer cellular-mediated tumor cytotoxicity in elderly women［J］.Gerontology，1989（35）：66.

［2］王 龍.運(yùn)動，免疫機(jī)能和老年人［J］.廣州體育學(xué)院學(xué)報，2011（4）：111-113.

［3］Nieman DC，Nehlsen Cannarella SL，Markodd PA，et al.The effects of moderate exercise training on natural kill cells and acute upper respiratory tract infections［J］.Int J Sports Med，1987 （11）：467.

［4］李志清.吳氏太極拳對老年人外周血NK細(xì)胞活性的影響［J］.中國運(yùn)動醫(yī)學(xué)雜志，1995（1）：71-74.

［5］唐勝南，楊華編.現(xiàn)代老年醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)［M］.鄭州：鄭州大學(xué)出版社，2002（4）.

［6］袁育康主編.醫(yī)學(xué)免疫學(xué)與病原生物學(xué)［M］.北京：北京醫(yī)科大學(xué)出版社，2000.

［7］劉素杰，曹穎靜，鄭 威等.心理干預(yù)對乳腺癌患者圍手術(shù)期情緒及 NK細(xì)胞活性的影響［J］.中國誤診學(xué)雜志，2008（29）：7081-7082.