[摘要] 目的 通過比較不同原核質粒表達丙型肝炎核心蛋白(CORE)的差異,篩選出能高效表達CORE的原核質粒。方法 用PCR擴增并獲得CORE基因,擴增產(chǎn)物分別構建到7種不同原核表達質粒中,重組質粒用IPTG誘導表達,聚丙烯凝膠電泳(SDS-PAGE)初步鑒定表達產(chǎn)物,并經(jīng)Western blot驗證。 結果 PCR及雙酶切驗證表明CORE基因成功構建到7種原核質粒中,SDS-PAGE驗證各融合質粒表達目的蛋白存在差異,其中pTrc-CKS-CORE及Pmbp-C-CORE可見相應的融合蛋白表達,以pTrc-CKS-CORE表達量高,表達產(chǎn)物經(jīng)Western blot驗證表達成功。 結論 成功構建7株不同CORE原核表達質粒,各融合質粒表達CORE存在較大差異,篩選出高表達CORE質粒,為下一步研究奠定基礎。
[關鍵詞] 丙型;肝炎病毒核心蛋白;質粒構建
[中圖分類號] R512.6 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-9701(2012)33-0009-04