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        男性Y染色體amelogenin、DYS456及DYS458缺失1例分析

        2012-12-26 09:34:52王偉妮楊雅冉
        中國計劃生育學雜志 2012年6期
        關鍵詞:父與子基因座父子

        王偉妮 楊雅冉 任 賀 劉 芳

        1.山西醫(yī)科大學法醫(yī)學院(太原,030001);2.中國科學院北京基因組研究所 ;3.北京人民警察學院;4.北京市公安局昌平分局刑偵支隊

        男性Y染色體amelogenin、DYS456及DYS458缺失1例分析

        王偉妮1楊雅冉2任 賀3劉 芳4

        1.山西醫(yī)科大學法醫(yī)學院(太原,030001);2.中國科學院北京基因組研究所 ;3.北京人民警察學院;4.北京市公安局昌平分局刑偵支隊

        1 資料

        某對父子在進行親子鑒定時,用Goldeneye 20A(基點認知)對父與子DNA進行擴增,amelogenin基因座分型結果如圖1,父與子均只顯示X等位基因,Y等位基因缺失。同時用 PowerPlex?16 System(Promega)進行了驗證,結果一致。為驗證受檢者性別,采用AmpF STR Y-filer kit(ABI)對父與子進行了YSTR的檢驗,分型結果如圖2,均顯示 DYS456及DYS458的缺失。根據(jù)NCBI數(shù)據(jù)庫提供的Y染色體上的序列信息,避開試劑盒中amelogenin Y、DYS456及DYS458引物結合區(qū),將原產物片段分別延長至696bp、743bp和745bp自行設計引物(表1)進行擴增。電泳結果如圖3所示,正常男性amelogenin、DYS456及DYS458條帶均清晰,而受檢者均無產物。

        圖1 父子的amelogenin基因座檢測結果

        圖2 父子的DYS456及DYS458基因座檢測結果

        圖3 amelogenin、DYS456及 DYS458基因座電泳圖

        表1 針對amelogenin Y、DYS456及DYS458設計的引物

        2 討論

        amelogenin是編碼牙釉質蛋白的基因,位于X(p22.1 -22.3)和 Y(Yp11.2)的同源染色體中,為單拷貝。其特異PCR引物最早由FSS(英國法庭科學服務部)設計,擴增X和Y染色體可同時分別得到106pb和112bp的產物,這樣的片斷差異在法醫(yī)鑒定中常用于性別鑒定[1]。

        本例用Goldeneye 20A(基點認知)對父子DNA分型進行檢驗時,結果出現(xiàn)amelogenin Y等位基因的缺失?;?PowerPlex?16 System中 amelogenin基因的擴增產物片段與Goldeneye 20A(基點認知)的序列有兩個堿基的差異,使用PowerPlex?16 System進行了驗證,分型結果與Goldeneye 20A(基點認知)一致,仍見amelogenin Y等位基因的缺失。為驗證父子性別而進行Y-STR擴增,結果DYS456及DYS458基因座的等位基因缺失。DNA檢驗中,等位基因丟失有多種原因,如DNA嚴重降解、抑制物的存在或低拷貝模板、引物區(qū)點突變等均可導致等位基因缺失。本案檢材良好,電泳熒光峰高(RFU值)大于500且重復擴增結果一致,因此認為本實驗結果中等位基因的缺失不是模板質量的原因。且為排除引物區(qū)點突變,避開試劑盒中amelogenin Y、DYS456及DYS458引物結合區(qū)而自行設計引物,擴增結果顯示仍出現(xiàn)缺失。因此推斷是Y染色體的部分缺失導致擴增失敗。

        Chang等[3]曾報道18個缺失 amelogenin的男性均出現(xiàn)DYS458的缺失,并且認為amelogenin與DYS458相隔1.13 Mb通常會出現(xiàn)同時缺失,本文驗證了此結論。但Jobling等[4]報道來自12個不同國家的45名amelogenin缺失的男性中,有4名沒有出現(xiàn)DYS458的缺失。因本案兩位受檢男性確認為父子關系,顯然amelogenin、DYS456及DYS458的缺失沒有影響其生殖功能。Turrina等[2]也報道過相同案例,認為amelogenin與 DYS458缺失是不影響生育的,且在父子之間表現(xiàn)出垂直遺傳。張清健等[5]曾報道影響男性生育的原因通常是Y染色體長臂的變異,而短臂對生育影響較小。

        綜上所述,法庭科學應用amelogenin基因判斷性別時應謹慎,在實際辦案中若發(fā)現(xiàn)amelogenin對性別的判定結果與其線索或證據(jù)不符時,應考慮是否有Y等位基因丟失的可能,需結合其他方法(如SRY[6]、Y-STR)加以核實。Y染色體為男性所特有,在司法鑒定中具有優(yōu)勢,尤其是在父系相關鑒定及性侵犯案件中具有明顯優(yōu)勢。基于少數(shù)男性可能會出現(xiàn)Y染色體的部分缺失,為了提高法醫(yī)應用的信息量,建議在現(xiàn)有的Y-STR基礎上增加新的基因座。

        1 Sullivan KM,Mannucci A,Kimpton CP,et al.A rapid and quantitative DNA sex test:fluorescence-based PCR analysis of XY homologous gene amelogenin[J].Biotechniques ,1993,15(4):636 -638.

        2 Turrina S,F(xiàn)ilippini G,Voglino G,et al.Two additional reports of deletion on the short arm of the Y chromosome[J].Forensic Sci Int Genet.,2011,5(3):242 -246.

        3 Chang YM,Perumal R,Keat PY,et al.A distinct Y -STR haplotype for amelogenin negative males characterized by a large Yp11.2(DYS458 - MSY1 - AMEL - Y)deletion[J].Forensic Sci Int,2007,166(2-3):115-120.

        4 Jobling MA,Lo IC,Turner DJ,et al.Structural variation on the short arm of the human Y chromosome:recurrent multigene deletions encompassing amelogenin Y[J].Hum Mol Genet,2007,16(3):307-316.

        5 張清健,鄭立新,田佩玲,等.人類男性Y染色體變異對男性生育力影響的臨床分析[J].中國計劃生育學雜志,2006,14(5):289-292.

        6 Kastelic V,Budowle B,Drobnic K.Validation of SRY marker for forensic casework analysis[J].J Forensic Sci,2009,54(3):551 -555.

        2011-12-22

        2012-03-01

        [責任編輯:裴開顏]

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