姜恒，吳斌 ，閻冰，吳志強(qiáng)，邢永澤

1.桂林理工大學(xué)，廣西 桂林 541004

2.廣西紅樹林研究中心，廣西 北海 536000

葉綠素?zé)晒饧夹g(shù)是一種以光合作用理論為基礎(chǔ)，利用生物體內(nèi)葉綠素研究和探測生物光合生理狀況及各種外界因子對其細(xì)微影響的新型生物活體測定和診斷技術(shù)。其具有測定快速、靈敏，對細(xì)胞無損傷的優(yōu)點，是研究生物光合作用的理想方法［1］。

微藻是海洋的初級生產(chǎn)者，是海洋食物鏈的基礎(chǔ)，對于海洋生態(tài)的平衡和穩(wěn)定具有不可替代的作用，光合作用是微藻最敏感的生理過程之一，環(huán)境因子的脅迫作用主要破壞光系統(tǒng)Ⅱ(PSⅡ)，而脅迫作用對PSⅡ的破壞可以通過葉綠素?zé)晒鈪?shù)的變化反映出來。目前主要是研究微藻在光照、溫度、pH、N、P、化學(xué)物質(zhì)、重金屬等脅迫條件下葉綠素?zé)晒鈪?shù)的變化。

1 葉綠素?zé)晒饧夹g(shù)中常用的參數(shù)

F0指初始熒光(minimal fluorescence)，其大小主要取決于PSⅡ天線色素內(nèi)的最初激子密度、天線色素之間以及天線色素到PSⅡ反應(yīng)中心的激發(fā)能傳遞機(jī)率的結(jié)構(gòu)狀態(tài)，因此這部分熒光強(qiáng)度與激發(fā)光的強(qiáng)度和葉綠素含量有關(guān)，是純物理過程，它與光合作用光反應(yīng)無關(guān)。F指任意時間實際熒光產(chǎn)量(actual fluorescence intensity at any time)。Fm指最大熒光產(chǎn)量(maximal fluorescence)，是PSⅡ反應(yīng)中心處于完全關(guān)閉時的熒光產(chǎn)量，F(xiàn)m的變化反映PSⅡ的電子傳遞變化情況。Fv為可變熒光(variable fluorescence，F(xiàn)v=Fm-F0)，反映 QA(特殊結(jié)合狀態(tài)的質(zhì)醌)的還原情況。Fv/Fm和Fv/F0分別表示PSⅡ的最大光化學(xué)量子產(chǎn)量(optimal/maximal photochemical efficiency of PSⅡ in the dark)和 PSⅡ的潛在活性。Fv/Fm和Fv/F0下降表明，脅迫使PSⅡ反應(yīng)中心受損，抑制光合作用的原初反應(yīng)，阻礙光合電子傳遞的過程。ΦPSⅡ表示作用光存在時PSⅡ的實際光能轉(zhuǎn)化效率，ΦPSⅡ的降低，說明脅迫阻止藻細(xì)胞同化力(NADPH，ATP)的形成，從而影響對碳的固定與同化。rETR表示PSⅡ的相對電子傳遞速率(relative electron transport rate)，rETR下降表明脅迫使QA→QB(二級電子受體)的電子傳遞受到抑制。ETR代表相對光合電子傳遞速率(electronic transfer rate)。qP為光化學(xué)淬滅(photochemical quenches)，反映PSⅡ天線色素吸收的光能用于光化學(xué)電子傳遞的份額。qP下降表明電子由PSⅡ的氧化側(cè)向PSⅡ反應(yīng)中心的傳遞受阻，用于進(jìn)行光合作用的電子減少，以熱或其他形式耗散的光能增加。qN即非光化學(xué)淬滅(non-photochemical quenches)，又可以寫作NPQ，反映PSⅡ吸收的光能不能用于光合電子傳遞而以熱的形式耗散掉的光部分，qN上升表明卡爾文循環(huán)的活性受抑制的程度增大，PSⅡ的潛在熱耗散能力增強(qiáng)，能夠有效避免或減輕因PSⅡ吸收過多光能對光和機(jī)構(gòu)的損傷。當(dāng)其上升到一定值后下降說明正常生理功能受到嚴(yán)重傷害，對熱能的耗散能力喪失。Y為實際量子產(chǎn)量(actual quantum yield)。PSⅡ光化學(xué)有效量子產(chǎn)量(photochemical efficiency of PSⅡ in the light)用 Y'(Y'=Fv'/Fm')表示，代表激發(fā)能被開放的反應(yīng)中心捕獲的效率，它定量了由于熱耗散的競爭作用而導(dǎo)致PSⅡ的光化學(xué)被限制的程度［2-3］。

2 環(huán)境因子對微藻葉綠素?zé)晒獾挠绊?/h2>

2.1 光

目前光照對鹽生杜氏藻影響的研究比較多［4］，White等［5］將鹽生杜氏藻(Dunaliella salina)和巴氏杜氏藻(Dunaliella bardawil)暴露于UVAR(紫外線A輻射)下，試驗表明其Fv/Fm顯著降低，PSⅡ光合電子傳遞效率部分損失，但是UVBR(紫外線B輻射)對其光合參數(shù)沒有顯著影響。Nilawati等［6］研究了紫外輻射對兩種海洋冷水性硅藻(Pseudonitzschia seriata和Nitzschia sp.)的影響，試驗表明，UVBR使這兩種藻的Fv/Fm降低，PSⅡ反應(yīng)中心遭到破壞。李守淳等［7］研究發(fā)現(xiàn)，隨著UVB輻射時間的延長，南極小球藻(Chlorella vulgaris Antarctic strain)葉綠素?zé)晒庋杆傧陆?。張麗霞等?］在四種不同光照強(qiáng)度下培養(yǎng)銅綠微囊藻(Microcystic aeruginosa)，并運(yùn)用葉綠素?zé)晒鈨x進(jìn)行測定，試驗表明，銅綠微囊藻生長和進(jìn)行光合作用的最適光照為40 μE/(m2·s)，強(qiáng)光脅迫使銅綠微囊藻的 Fv/Fm顯著降低。

2.2 溫度

微藻光合作用對溫度比較敏感，高溫可使類囊體膜的結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，這種變化首先反映在F0的上升，F(xiàn)0是反映微藻溫度脅迫的重要指標(biāo)。Sayed等［9］發(fā)現(xiàn)，當(dāng)溫度為25～35℃時，小球藻(Chlorella vulgaris)的Fv/Fm、Fm和Fv/2均隨溫度的升高而增大，在35～40℃時達(dá)到最大值，隨后開始下降。黃仿等［10］研究了熱脅迫對角毛藻(Chaetoceras sp.)的影響，發(fā)現(xiàn)引起該藻F0驟升的溫度為49.5℃，當(dāng)溫度升高至45℃時，F(xiàn)v/Fm和Fv迅速下降，qN顯著增加。梁英等［11］研究發(fā)現(xiàn)，鹽生杜氏藻(Dunaliella salina)的 Fv/Fm、Fv'/Fm'、ΦPSⅡ、rETR 和 qP 都隨著溫度和時間的增加而明顯下降，qN呈先上升再下降的現(xiàn)象，在50℃下處理18 min后，各熒光參數(shù)均下降為 0。塔胞藻(Pyramimonas sp.)的 Fv/Fm、Fv'/Fm'、ΦPSⅡ、rETR和qP都隨溫度和時間的增加而下降，qN在35℃下隨著時間的延長逐漸降低，在20 min時下降到0，在40℃下10 min后 qN變?yōu)?，但60 min時又升到0.48。45℃下處理18 min后，各熒光參數(shù)均下降為0。梁英等［12］通過研究發(fā)現(xiàn)，等鞭金球藻3011(Isochrysis galbana MACC/H59)在 35，40和45℃下處理不同時間Fv/Fm、Fv/F0、ΦPSⅡ、rETR和qP都有不同程度的下降，且隨處理時間的延長和處理溫度的升高而下降，處理時間越長、處理溫度越高，下降幅度越大。而qN是先上升到最大值，然后降低。球等鞭金藻8701(Isochrysis galbana MACC/H60)在35，40和45℃下處理不同時間Fv/Fm、Fv/F0、ΦPSⅡ和rETR都有不同程度的下降，且隨著溫度的升高，時間的延長，下降幅度逐步增大，而qP和qN表現(xiàn)為先上升后下降。韓志國等［13］研究發(fā)現(xiàn)，纖細(xì)角刺藻(Chaetoceros gracilis)在適宜的鹽度下隨溫度的升高Fv/Fm先有輕微的上升，隨后開始逐漸下降。在兩種鹽度下F0均隨溫度的升高而升高。小球藻(Chlorella minutissima)在適宜的鹽度下隨溫度的逐漸升高，F(xiàn)v/Fm逐漸降低;而角刺藻中，出現(xiàn)Fv/Fm輕微升高的現(xiàn)象，并在中等溫度(35和40℃)下緩慢降低，在高溫(45和50℃)下急劇降低。兩種鹽度下小球藻的F0亦隨溫度的升高而逐漸上升。

2.3 pH

水體pH是一個重要的生態(tài)因子，藻類的光合作用與水體的pH有著密切的關(guān)系，每種藻類都有它自身適合的pH范圍，改變pH會影響藻類的光合作用，使藻類生長發(fā)生變化。大多數(shù)藻類適宜在中性或弱堿性水中生活。有研究表明，酸化水體中藻類的生長潛力微弱［14］。王銘等［15］研究發(fā)現(xiàn)，雨生紅球藻(Haematococcus pluvialis CG-l)在pH為6.0～7.5時，F(xiàn)v/Fm、Fv/F0、ΦPSⅡ和 ETR 隨 pH 升高而增大，pH為7.5時達(dá)到最大值，pH超過7.5時，F(xiàn)v/Fm和Fv/F0明顯下降，而ΦPSⅡ和ETR的下降趨勢不明顯。李艷紅等［16］發(fā)現(xiàn)當(dāng)pH為6.0～7.0時，銅綠微囊藻(Microcystic aeruginosa FACHB-496)葉綠素?zé)晒鈪?shù) Y、Y'、ΦPSⅡ、ETR和 qP逐漸減小，特別是pH為6.0時，其減小的趨勢更明顯。當(dāng)pH為8.0～10.0 時，Y、Y'、ΦPSⅡ、ETR 和 qP 逐漸增加。

2.4 氮、磷

氮、磷是微藻生長必不可少的重要因子，氮、磷的缺乏以及氮、磷比的失衡都能限制微藻的生長。尹翠玲等［17］在5種氮濃度的培養(yǎng)液中培養(yǎng)球等鞭金藻3011(Isochrysis galbana MACC/H59)和球等鞭金藻8701(Isochrysis galbana MACC/H60)，研究葉綠素?zé)晒鈪?shù)的變化，發(fā)現(xiàn)球等鞭金藻3011的Fv/Fm隨著起始氮濃度的增加而增加，在7040 μmol/L時達(dá)到最大值;球等鞭金藻8701的Fv/Fm隨著起始氮濃度的增加而增加，在440 μmol/L時達(dá)到最大值，其后隨氮濃度的增加其上述指標(biāo)反而下降。梁英等［18］將綠色巴夫藻(Pavloca viridis)在不同氮濃度的培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)，各濃度下的Fv/Fm、ΦPSⅡ和ETR總體呈先上升后下降的趨勢，而qN和NPQ總體呈先下降后上升的趨勢。在氮濃度為880 μmol/L時，上述各值顯著高于其他濃度。尹翠玲等［19］將鹽生杜氏藻(Dunaliella salina)和纖細(xì)角毛藻(Chaetoceros gracilis)在不同氮濃度的培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)，兩種微藻的Fv/Fm均隨著起始氮濃度的增加而增加，在1760 μmol/L時達(dá)到最大值，其后隨著起始氮濃度的增加，上述指標(biāo)反而下降。

宋麗娜等［20］在不同濃度的磷溶液中培養(yǎng)海洋小球藻(Clllorella sp.)發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)v/Fm、Fv/F0、ΦPSⅡ和ETR均先升后降，并表現(xiàn)出低磷組(3.62 μmol/L)顯著低于其他各組，高磷組(434.52 μmol/L)一直處在較高水平。尹翠玲等［21］在不同濃度的磷溶液中培養(yǎng)鹽生杜氏藻(Dunaliella salina)和纖細(xì)角毛藻(Chaetoceros gracilis)，運(yùn)用葉綠素?zé)晒饧夹g(shù)進(jìn)行測量發(fā)現(xiàn)，鹽生杜氏藻的Fv/Fm隨著起始磷濃度的增加而增加，在290.4 μmol/L處達(dá)到最大值。纖細(xì)角毛藻的Fv/Fm在18.15 μmol/L處達(dá)到最大值，而后隨著磷濃度的繼續(xù)升高其值反而降低。梁英等［22］研究了小球藻(Chlorella sp.)在不同磷濃度培養(yǎng)其葉綠素?zé)晒鈪?shù)的變化發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)v/Fm、ΦPSⅡ、ETR和qP隨著起始磷濃度的增大而增大，在磷濃度為36.3 μmol/L達(dá)到最大，繼續(xù)加磷瞬時熒光不斷下降，PSⅡ出現(xiàn)瞬間的上升后恢復(fù)至原初狀態(tài)，qP和NPQ則不斷上升。Lippemeier等［23］研究了微小亞歷山大藻(Alexandrium minutum)在磷脅迫下的變化，在磷鹽缺少的情況下，ΔF/Fm'前5天的變化不明顯，從第6天開始下降，F(xiàn)和Fm'則顯著升高。

2.5 化學(xué)物質(zhì)

近年來在各種化學(xué)物質(zhì)對藻類葉綠素?zé)晒庥绊懷芯糠矫嬷饕?Miriam等［24］通過研究集胞藻(Synechocystis sp.PCC 6803)在5 mmol/L 的 NH4Cl，并在淬火光抑制下暴露12 min，發(fā)現(xiàn)Y下降至0。Nils等［25］將眼蟲藻(Euglena gracilis)和萊茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)在不同濃度的草木灰溶液中培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)，眼蟲藻在10和12.5 g/L時rETR發(fā)生劇烈的變化，NPQ表現(xiàn)出增長;萊茵衣藻的rETR不受抑制，反而表現(xiàn)出促進(jìn)作用，NPQ急劇增長。兩種藻的 Fv/Fm、qP與 rETR的趨勢相似。何藝等［26］研究披針舟形藻(Navicula lanceolata)在不同濃度的熒蒽下葉綠素?zé)晒鈪?shù)的變化，試驗表明，熒蒽對Y、ETR和qP等參數(shù)有顯著促進(jìn)作用，并且隨著濃度的升高，促進(jìn)作用逐步增大;但不同濃度的熒蒽對Fv/Fm和NPQ無顯著影響。楊慧麗等［27］通過在不同濃度的鄰苯二甲酸二丁酯(DBP)培養(yǎng)三角褐指藻(Phaeodactylum tricornutum)，對其葉綠素?zé)晒鈪?shù)進(jìn)行測量發(fā)現(xiàn)，隨著DBP暴露濃度的升高，F(xiàn)v/Fm、Fv/F0、Y和ETR均下降。但與對照組(丙酮)相比，低濃度處理組(≤4 mg/L)各指標(biāo)下降不明顯，而5 mg/L的試驗組在脅迫12 h后，F(xiàn)v/Fm、Fv/F0、Y和ETR逐漸上升，其參數(shù)值甚至超過其他處理組。劉雷等［28］通過在不同濃度的十二烷基苯磺酸鈉(LAS)下培養(yǎng)銅綠微囊藻(Microcystis aeruginosa)，并對葉綠素?zé)晒鈪?shù)進(jìn)行測定發(fā)現(xiàn)，小于0.05 mg/L的LAS對該藻未產(chǎn)生脅迫作用，反而能提高PSⅡ的ΦPSⅡ、qP和rETR，從而促進(jìn)光合作用;在10 mg/L時Y、Y'波動較大，ΦPSⅡ、qP和rETR急劇下降后回升，qN 和 NPQ 一直下降，直至為0。Ruan等［29］在不同濃度的草甘膦下培養(yǎng)藍(lán)藻葛仙米(Nostoc sphaeroides)，并測得葉綠素a濃度和Fv/Fm在最高濃度組(0.6 mmol/L)4 d后開始受到影響。冉春秋等［30-32］在不同濃度的解偶聯(lián)劑羰基氰化物間氯苯腙(CCCP)下培養(yǎng)海洋亞心型扁藻(Platymonas subcordiformis)、萊茵衣藻(Creinhardtii reinhardtii)發(fā)現(xiàn)，在光照期間PSⅡ光化學(xué)活性都降低，且CCCP的濃度越高對藻細(xì)胞PSⅡ光化學(xué)活性的抑制作用越明顯，一定濃度的藻細(xì)胞具有耐受CCCP抑制PSⅡ光化學(xué)活性的能力。Anita等［33］通過研究Thalassiosira weissflogii、Emiliania huxleyi、Tetraselmis sp.、Flagellate Japonicasiz四種藻在不同濃度的Irgarol? 1051(一種海洋防污損涂料添加劑)下的培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)Y'的變化與藻的生長速度一致，表現(xiàn)為隨著濃度的增加而變小。李卓娜等［34］用濃度為0.1，1.0 和2.5 μg/L 的2，2'，4，4'-四溴聯(lián)苯醚(BDE-47)處理海水小球藻(Chlorella autotrophica)，在8 h后的熒光參數(shù)與對照組(0 μg/L)比較如表1所示。

表1 2，2'，4，4'-四溴聯(lián)苯醚(BDE-47)處理海水小球藻試驗組與對照組(BDE-47濃度為0)葉綠素?zé)晒鈪?shù)的比較Table 1 The chlorophyll fluorescence parameters comparison of the experimental group of Chlorella autotrophica processing by BDE-47 with the control group(BDE-47 concentration is 0)

由表1可見，在不同BDE-47濃度下，小球藻Fv/Fm與對照組無顯著性差異;Fv/F0、ΦPSⅡ和 rETR在BDE-47濃度為0.1和2.5 μg/L時測定值均顯著高于同期的對照組水平，而在1.0 μg/L時與對照組無顯著差異;qP表現(xiàn)為與對照組無顯著差異。

表2為用0.1，1.0和2.5 μg/L的BDE-47處理赤潮異彎藻(Heterosigam akashiwo)24，48和72 h后，熒光參數(shù)與對照組(0 μg/L)的變化［34］。從表2可以看出，赤潮異彎藻在BDE-47濃度為0.1 μg/L下暴露培養(yǎng)24 h，其 Fv/Fm、Fv/F0、ΦPSⅡ和 rETR 顯著高于對照組，而qP表現(xiàn)為與對照組無顯著差異;暴露培養(yǎng)48 h各參數(shù)都顯著高于對照組;暴露培養(yǎng)72 h各參數(shù)與對照組無顯著差異。在BDE-47濃度為1.0 μg/L下暴露培養(yǎng)24 h，除Fv/Fm顯著高于對照組，其余各參數(shù)均與對照組無顯著差異;暴露培養(yǎng)48 h各參數(shù)都顯著高于對照組;暴露培養(yǎng)72 h除qP與對照組無顯著差異外，其余參數(shù)都顯著高于對照組。在BDE-47濃度為2.5 μg/L下暴露培養(yǎng)24 h除Fv/Fm與對照組無關(guān)外其余各參數(shù)都與對照組無顯著差異;暴露培養(yǎng)48 h各參數(shù)顯著高于對照組;暴露培養(yǎng)72 h除qP與對照組無顯著差異外，其余參數(shù)都顯著高于對照組。

表2 2，2'，4，4'-四溴聯(lián)苯醚(BDE-47)赤潮異彎藻試驗組與對照組(BDE-47濃度為0)葉綠素?zé)晒鈪?shù)的比較Table 2 The chlorophyll fluorescence parameters comparison of the experimental group of Heterosigam akashiwo processing by BDE-47 with the control group(BDE-47 concentration is 0)

2.6 重金屬

隨著現(xiàn)代社會經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，重金屬污染問題越來越嚴(yán)重，對于重金屬的研究也越來越重視，其中重金屬對于藻類熒光的影響研究也頗多。Mallick等［35］運(yùn)用葉綠素?zé)晒饧夹g(shù)研究重金屬 Cu，Cr，Ni，Cd和Zn對斜生柵藻(Scenedesmus obliqnus)的影響發(fā)現(xiàn)，在12 h內(nèi)，這5種重金屬離子均使F0升高，F(xiàn)m下降，F(xiàn)v/Fm下降，qP下降和 qN上升，qN/2下降，F(xiàn)0/Fv顯著上升。王帥等［36］研究了在不同Cd2+濃度下培養(yǎng)綠色巴夫藻(Pavlova viridis sp.MACC/H61)等6種藻類，并對葉綠素?zé)晒鈪?shù)Fv/Fm、Fv/F0、ΦPSⅡ、rETR、細(xì)胞密度和葉綠素相對含量進(jìn)行了測定，發(fā)現(xiàn)各種葉綠素?zé)晒鈪?shù)與Cd2+濃度呈顯著的負(fù)相關(guān)，均隨著Cd2+濃度的增加而降低。李濤等［37］在 6種 Fe3+濃度下培養(yǎng)雨生紅球藻(Haeamatococcus pluvialis)，并對 F0、Fv/Fm、Fv/F0、ΦPSⅡ、qP和qN進(jìn)行了測定，發(fā)現(xiàn)在低濃度Fe3+(1.79 μmol/L)和高濃度 Fe3+(71.6 μmol/L)下 Fv/Fm、Fv/F0、ΦPSⅡ和 qP均明顯下降，而 F0和 qN 在兩種濃度下都上升。陳雷等［38］在不同Cu2+濃度不同時間下培養(yǎng)斜生柵藻(Scendesmus obliquus)，并對Fv/Fm、Fv/F0、ΦPSⅡ、rETR、葉綠素 a、葉綠素 b 及胡蘿卜素含量等進(jìn)行了測量，發(fā)現(xiàn)在高濃度Cu2+(20 ～100 μmol/L)下，F(xiàn)v/Fm、Fv/F0、ΦPSⅡ和 rETR 等參數(shù)隨著脅迫時間延長，數(shù)值下降幅度顯著，葉綠素a、葉綠素b和類胡蘿卜素含量也明顯下降。低濃度Cu2+(0～10 μmol/L)下，上述參數(shù)變化不顯著。簡建波等［39］研究不同濃度 Cu2+暴露對三角褐指藻(Phaeodactylum tricornutum)的影響發(fā)現(xiàn)，Y、Fv/Fm對Cu2+非常敏感，它們均隨Cu2+濃度的升高而顯著下降。曹春暉等［40］運(yùn)用葉綠素?zé)晒饧夹g(shù)研究Mn對米氏凱倫藻(Karenia mikinotoi MACC/D23)的影響發(fā)現(xiàn)，當(dāng)Mn濃度為10-12～10-18mol/L時，F(xiàn)v/Fm、Fv/F0、ΦPSⅡ和rETR在第3～9天隨著起始Mn濃度的增加而升高，F(xiàn)v/Fm和Fv/F0在第2～7天隨培養(yǎng)時間的延長而增加，qP在整個培養(yǎng)周期內(nèi)隨Mn濃度升高呈下降趨勢，qN則呈先下降后上升趨勢。王山衫等［41］在不同Zn2+濃度下培養(yǎng)固氮魚腥藻(Anabaena azotica Ley)，并對葉綠素?zé)晒鈪?shù)Fv/Fm進(jìn)行了測定發(fā)現(xiàn)，隨著Zn2+濃度的升高，F(xiàn)v/Fm降低，當(dāng) Zn2+濃度為 1.0 μmo/L時，F(xiàn)v/Fm達(dá)到最高值。Ivorra 等［42］研 究 了 Zn2+對微小異極藻(Gomphonema parvulum)的影響，在富含 Zn2+(60000 μg/L)的培養(yǎng)液中處理5 h后，其F0和Y顯著下降。Lu［43］研究發(fā)現(xiàn)，Hg2+對藍(lán)藻有急性毒性作用，F(xiàn)v/Fm、Fv'/Fm'、ΦPSⅡ、qP 和 qN 隨 Hg2+濃度的升高而逐漸下降。

3 展望

微藻是水環(huán)境中的第一營養(yǎng)水平，對外界環(huán)境異常敏感，對抑制光合作用的環(huán)境因子都能夠做出快速、準(zhǔn)確的反應(yīng)。而這些變化又可以通過先進(jìn)的葉綠素?zé)晒饧夹g(shù)，用熒光參數(shù)準(zhǔn)確反映出來。利用該特點可以進(jìn)一步運(yùn)用于:1)建立一種以微藻光合作用，葉綠素?zé)晒饧夹g(shù)為基礎(chǔ)的環(huán)境監(jiān)測標(biāo)準(zhǔn)，環(huán)境預(yù)警機(jī)制;2)進(jìn)一步拓展其研究領(lǐng)域，探討葉綠素?zé)晒饧夹g(shù)在浮游植物對環(huán)境污染反應(yīng)的監(jiān)測、水體中營養(yǎng)鹽限制情況的檢測、赤潮(或水華)的檢測以及赤潮(或水華)的發(fā)生機(jī)理等研究中的應(yīng)用。但是，縱觀上述對微藻葉綠素?zé)晒鈪?shù)的研究進(jìn)展，既往的研究主要在環(huán)境因子對微藻葉綠素?zé)晒庥绊懙睦碚搶用?，對微藻葉綠素?zé)晒鈪?shù)變化的深層次含義研究挖掘不夠，尤其是對于研究葉綠素?zé)晒鈪?shù)與環(huán)境因子之間的特異性響應(yīng)方面還有待進(jìn)一步挖掘。同時研究大多局限于在單一的環(huán)境因子影響下進(jìn)行、沒有表現(xiàn)自然環(huán)境的特性，因此要進(jìn)一步模擬現(xiàn)實環(huán)境，擴(kuò)展研究中環(huán)境因子的范圍(如生物、冷卻水、輻射等)，并進(jìn)行多種環(huán)境因子的疊加、交替試驗。隨著葉綠素?zé)晒饫碚撗芯亢蜏y定技術(shù)的進(jìn)一步發(fā)展，葉綠素?zé)晒夥治黾夹g(shù)必將會在微藻的研究中起著越來越重要的作用，為建立基于微藻葉綠素?zé)晒饧夹g(shù)的環(huán)境監(jiān)測方法和標(biāo)準(zhǔn)提供條件。

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