聶鳳英 焦曉寧

河南省濮陽市中醫(yī)院檢驗科，河南濮陽 457000

不同抗凝劑對血液分析儀測定參數(shù)的影響

聶鳳英 焦曉寧

河南省濮陽市中醫(yī)院檢驗科，河南濮陽 457000

目的 探討乙二胺四乙酸鹽（EDTA－K2）、肝素、枸櫞酸鈉3種抗凝劑對血液各項指標的不同影響。方法2012年2月在本院體檢者中隨機選擇50例為研究對象，分別用3種不同抗凝劑抗凝后，對白細胞（WBC）計數(shù)、紅細胞（RBC）計數(shù)、血紅蛋白（Hb）、血細胞比容（HCT）、血小板（PLT）及淋巴細胞（LYM）計數(shù)等各項參數(shù)的檢測結(jié)果進行比較、分析和探討。 結(jié)果 WBC計數(shù)、RBC計數(shù)、Hb、HCT、LYM計數(shù)此5項參數(shù)在3種抗凝劑組間差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）；與EDTA-K2抗凝組相比，使用肝素和枸櫞酸鈉時，PLT計數(shù)降低，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.01）。結(jié)論在血常規(guī)的檢測中，使用EDTA-K2、肝素、枸櫞酸鈉不同抗凝劑時，WBC計數(shù)、RBC計數(shù)、Hb、HCT、LYM計數(shù)此5項參數(shù)在3種抗凝劑組間無差異；肝素和枸櫞酸鈉使PLT計數(shù)降低。

靜脈血；抗凝劑；血細胞參數(shù)；血小板（PLT）

血常規(guī)檢驗是最常用的檢驗項目之一，對人體健康狀態(tài)的評估、疾病診斷有重要的臨床意義。隨著科學技術(shù)的發(fā)展，全血細胞分析儀以其結(jié)果準確率高、采血量少、分析項目多、分析時間短等優(yōu)點被普遍應(yīng)用在血常規(guī)檢驗中[1]。然而，由于醫(yī)療條件因素的限制，目前無論是門診患者還是住院患者的標本都不能及時得到檢查，從而使抗凝劑的使用十分普遍[2]。在血細胞計數(shù)中廣泛使用的是國際血液學標準化委員會（ICSH）認定的乙二胺四乙酸鹽（EDTA-K2），但不同的抗凝劑對血液各項指標的影響是不同的[3]。在本次試驗中，筆者采用EDTA-K2、肝素及枸櫞酸鈉3種抗凝劑。選擇了白細胞（WBC）計數(shù)、紅細胞（RBC）計數(shù)、血紅蛋白（Hb）、血細胞比容（HCT）、血小板（PLT）及淋巴細胞（LYM）計數(shù)等各項血細胞參數(shù)的檢測結(jié)果進行比較、分析和探討。

1 資料與方法

1.1 一般資料

2012年2月在本院體檢者中隨機選擇50例，采集空腹靜脈血6 mL分別注入EDTA-K2、肝素、枸櫞酸鈉抗凝管中各 2 mL，室溫保存 2 h 后送檢，分別測定 WBC、RBC、Hb、HCT、LYM、PLT各項血細胞參數(shù)，平行測定3次，取平均值。

1.2 主要儀器與試劑

XT-1800i血細胞分析儀及其配套試劑（溶血素SYS-FBA、溶血素SYS-SLS、溶血素SYS-4DL、溶血素SYS-4DS）。

1.3 統(tǒng)計學分析

用SPSS 18.0統(tǒng)計軟件包進行分析，各組數(shù)值變量資料采用±s表示，組間比較采用配對t檢驗。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

50例標本經(jīng)軟件分析：WBC計數(shù)、RBC計數(shù)、Hb、HCT、LYM此5項參數(shù)在3種抗凝劑組間差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）；與EDTA-K2抗凝組相比，使用肝素和枸櫞酸鈉時，PLT計數(shù)降低，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.01）。具體結(jié)果見表1。

3 討論

目前三分類的半自動血液分析儀多采用電阻抗法進行血細胞分類和計數(shù)，根據(jù)血細胞相對非導電性質(zhì)懸浮在電解質(zhì)溶液中的細胞顆粒在通過計數(shù)小孔時，可引起電阻的變化為基礎(chǔ)，對血細胞進行計數(shù)和體積測定[4]。

表1 不同抗凝劑血細胞參數(shù)測定結(jié)果統(tǒng)計值（±s）

表1 不同抗凝劑血細胞參數(shù)測定結(jié)果統(tǒng)計值（±s）

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五分類的全自動血液分析儀則采用了多種技術(shù)相結(jié)合，多種參數(shù)共同判定的技術(shù)手段，對血細胞特別是WBC的計數(shù)和分類的準確性有了很大提高[5]。測WBC時采用了核酸熒光染色技術(shù)配合激光流式分析系統(tǒng)，避免了傳統(tǒng)三分類血細胞儀器中，因抗凝劑不同引起PLT的聚集被當成LYM計數(shù)，導致PLT下降而引起WBC和LYM比例顯著上升的現(xiàn)象。故在本實驗中不同的抗凝劑對WBC計數(shù)幾乎無影響[6]。

RBC計數(shù)是一個常規(guī)的檢測項目，大多數(shù)抗凝劑對RBC形態(tài)影響都有限，不同抗凝劑對紅系結(jié)果影響不大（P>0.05），故在檢測血氣分析、血液黏度或其他實驗中，需同時測RBC及HCT時，可以用肝素或枸櫞酸鈉抗凝[7]。任何類型、檔次的全血細胞分析儀，Hb測定原理都是相同的，即溶解RBC，釋放Hb進行測試。本研究也證實，不同的抗凝劑對Hb的檢測值之間的差異無統(tǒng)計學意義。

目前廣泛使用的抗凝劑是ICSH認定的EDTA-K2為血細胞分析檢測的抗凝劑。它能有效結(jié)合血液中的鈣離子，通過膜離子通道進入PLT膜內(nèi)。由于它螯合作用要比枸櫞酸鈉絡(luò)合鈣離子作用強，能更好地防止血液中PLT因各種因素而發(fā)生凝集，對PLT計數(shù)影響較小，有較好的穩(wěn)定性。

肝素抗凝主要是抑制凝血活酶與凝血酶形成，并激活纖溶酶而發(fā)揮作用。肝素能引起PLT聚集及腫脹，過量的肝素可導致PLT破壞，對PLT計數(shù)影響最大[8]。聚集的PLT通過微孔，由于體積較大，不易被識別，因此與EDTA抗凝劑比較，用肝素和枸櫞酸鈉抗凝時，PLY計數(shù)減少，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。

枸櫞酸鈉呈堿性，可與Ca形成可溶性螯合物，其抗凝性弱，易使PLT聚集而致總數(shù)減少，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。

綜上所述，EDTA可使離體后的PLT離散，抑制PLT聚集，使之成為一個顆粒或細胞通過微孔，而肝素和枸櫞酸鈉均無此作用。五分類血液分析儀檢測PLT時，應(yīng)用鞘流電阻抗原理：當PLT體積大或聚集成較大顆粒通過微孔時，儀器只識別顆粒大小而不能識別顆粒性質(zhì)，被誤認為LMY計數(shù)，某些PLT也會被誤認為小紅細胞而不納入PLT計數(shù)范圍，使PLT假性減低。本實驗結(jié)果顯示，EDTA-K2抗凝血的PLT及其參數(shù)的值分別高于其他兩種抗凝血，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.01）。

[1]劉紅軍.藥物治療肝硬化對抗凝血測定白細胞總數(shù)及形態(tài)的影響[J].中國當代醫(yī)藥，2010，17（34）：82.

[2]孫楊.抗凝劑EDTA致PLT假性減少[J].檢驗醫(yī)學與臨床，2008，5（8）：504.

[3]鄒鴻燕.抗凝劑對血液檢驗結(jié)果的影響[J].中外健康文摘，2012，9（4）：41-42.

[4]吳曉蔓.臨床檢驗基礎(chǔ)與臨床實驗指導[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2007：23-26.

[5]葉應(yīng)撫，王毓三.全國臨床檢驗操作規(guī)程[M].南京：東南大學出版社，1991：65-68.

[6]方蓉，黃宇烽，鄭均，等.抗凝劑濃度不同血液的血細胞計數(shù)儀分析結(jié)果[J].臨床檢驗雜志，2001，19（2）：105-106.

[7]許德英，常永超，張淑珍，等.4種抗凝劑對血液分析儀計數(shù)結(jié)果的影響[J].洛陽醫(yī)專學報，2001，19（2）：156-157.

[8]馬雨東.血細胞分析儀測定血小板時抗凝劑等影響因素分析[J].檢驗醫(yī)學與臨床，2010，7（11）：189-191.

The influnce of different anticoagulants on blood analyzer determine parameters

NIE Fengying JIAO Xiaoning
Department of Clinical Laboratory,Hospital of Traditional Chinese Medicine in Puyang City,He′nan Province,Puyang 457000,China

Objective To explore the different influence of three anticoagulant agent of EDTA-K2,heparin,folic acid sodium to the index of blood.Methods Fifty cases with medical examination in our hospital from February 2012 were randomly chosen as the research object.The parameters testing results of white blood cells(WBC)counting,red blood cell count(RBC),hemoglobin(Hb),red blood cell deposited(HCT),platelet(PLT)and lymph cells(LYM)count,and so on,were compared,analyzed and discussed after administration of three different anticoagulants,respectively.Results The differences of five parameters of WBC count,RBC count,Hb,HCT,LYM count between three anticoagulant agent groups were not statistically significant(P>0.05);and compared with EDTA-K2anticoagulant group,PLT count reduced,the difference was statistically significant(P<0.01)with the use of heparin and folic acid sodium.Conclusion In the blood detection,WBC count,RBC count,Hb,HCT,LYM count between the three kinds of anticoagulant EDTA-K2,heparin,sodium citrate has no difference;PLT count decreases in heparin and sodium citrate.

Venous blood;Anticoagulants;Blood cells parameters;Platelet(PLT)

R446.11

A

1674-4721（2012）08（b）-0140-02

2012-05-04 本文編輯：郭靜娟）