楊向峰 徐計秀 梁廷宇

在中華民族的歷史長河中，酒及酒文化一直占據(jù)著重要地位，素有無酒不成席之說。過度飲酒對身體的危害很大，特別是對男性不育方面。從遺傳學(xué)角度分析，酒精對人體生殖細胞的損傷，是導(dǎo)致出生缺陷的重要原因之一[1-2]。有關(guān)男性生殖的狀況和研究是近十多年來男性學(xué)研究的熱門話題。研究表明，人類的生殖功能正逐漸退化，在過去五十年內(nèi)，人類精液質(zhì)量下降了近一半，將來不育癥的發(fā)生率可能高于目前文獻報道的12%～15%，甚至達到30%以上[3]。通過動物實驗研究過度飲酒對男性不育癥的機制，對男性不育癥的防治有著重要的意義。

1 資料與方法

1.1 實驗動物及分組處理 選擇8周齡實驗用健康成年雄性SD大鼠40只，體重(210±20)g，由山西醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供。將雄性大鼠隨機分成四組，每組10只。對照組(酒精0.0 g/kg)、低量組(酒精2.7 g/kg)、中量組(酒精4.5 g/kg)、高量組(酒精7.5 g/kg)。各酒精處理組均用無水酒精加入不同量蒸餾水灌胃，灌胃量為1.5 ml/l00 g，對照組給予等量蒸餾水，1次/d，連續(xù)13周。于末次染毒24 h后采用頸椎脫臼法處死，經(jīng)下腔靜脈采血并分離血清，置-20 ℃冰箱凍存，待測血清中睪酮(T)、卵泡刺激素(FSH)、黃體生成素(LH)含量；取大鼠精囊中精液，放入37 ℃恒溫箱中液化，5000 r/min離心30 min，分離出精漿于-70 ℃冰箱凍存，待測精漿中果糖含量、精漿中鋅含量。

1.2 觀察指標及方法

1.2.1 血清性激素測定 13周后，分別經(jīng)下腔靜脈采血并分離血清，置-20 ℃冰箱凍存待測。采用放免法檢測血清中睪酮(T)、卵泡刺激素(FSH)、黃體生成素(LH)含量。

1.2.2 精漿果糖、鋅測定 13周后，分別剖取大鼠精囊中精液，放入37 ℃恒溫箱中液化，5000 r/min離心30 min，分離出精漿于-70 ℃冰箱凍存待測。采用紫外法檢測精漿中果糖含量，采用比色法檢測精漿中鋅含量。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS 16.0統(tǒng)計軟件進行分析。計量資料以()表示，多組間的均數(shù)比較采用單因素方差分析(One-Way ANOVA)；方差齊性時采用Dunnett法，若方差不齊，采用Tamhane’s T2進行校正兩兩比較，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 酒精對性激素(T、FSH、LH)的影響 各酒精處理組大鼠血清T、FSH、LH含量均明顯低于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05或P<0.01)。詳見表1。

表1 酒精對血清T、FSH、LH的影響()

表1 酒精對血清T、FSH、LH的影響()

*P<0.05，△P<0.01，與對照組相比

組別 T(nmol/L) FSH(mIU/L) LH(mIU/L)對照組(n=10) 12.952±2.89 1.395±0.19 1.539±0.31酒精2.7 g/kg組(n=10) 8.598±2.19△ 0.716±0.14△ 1.213±0.26*酒精4.5 g/kg組(n=10) 6.321±2.77△ 0.582±0.31△ 1.098±0.20△酒精7.5 g/kg組(n=10) 3.005±2.21△ 0.421±0.47△ 0.821±0.11△

2.2 酒精對精漿生化(果糖、鋅)的影響 各酒精處理組大鼠精漿果糖、鋅的含量均明顯低于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05或P<0.01)。詳見表2。

表2 酒精對精漿果糖、鋅的測定結(jié)果()

表2 酒精對精漿果糖、鋅的測定結(jié)果()

*P<0.05，△P<0.01，與對照組相比

組別 果糖(mg/dl) 鋅(μg/ml)對照組(n=10) 0.133±0.021 0.019±0.003酒精2.7 g/kg組(n=10) 0.058±0.025△ 0.016±0.003*酒精4.5 g/kg組(n=10) 0.033±0.013△ 0.011±0.002△酒精 7.5 g/kg組(n=10) 0.029±0.010△ 0.006±0.003△

3 討論

性腺軸功能的調(diào)節(jié)是人類生殖生理活動的關(guān)鍵，任何一個環(huán)節(jié)異常都可能導(dǎo)致男性不育。睪丸是精子發(fā)生和雄激素合成的重要器官。睪酮主要由睪丸的Leydig間質(zhì)細胞分泌，后者是黃體生成素(LH)作用的靶細胞，黃體生成素是控制睪酮產(chǎn)生的主要刺激激素。雄性激素睪酮(T)是維持精子發(fā)生和成熟的必要條件，睪酮的分泌不足可影響精子的發(fā)生和成熟，造成生殖能力的下降。劉長云等[4]研究了乙醇可以直接作用于睪丸間質(zhì)細胞，使間質(zhì)細胞合成和分泌T的能力下降，從而使血中T濃度降低。Shi等[5]的觀點是，乙醇對下丘腦、垂體及睪丸均存在毒性作用。正是乙醇的這種毒性作用影響了下丘腦-垂體-性腺軸的調(diào)節(jié)作用，致使血LH、FSH濃度降低[6]。El-Sokkary 等[7]用體視學(xué)方法觀察長期給予乙醇的雄性大鼠的睪丸組織，曲細精管直徑明顯縮小，各級生精細胞數(shù)目減少，并可見退化變性的生精細胞。Martinez等[8]給予大鼠含乙醇的液體飲食，亦有類似報道?？梢钥闯觯凭隗w內(nèi)經(jīng)血-睪屏障進入睪丸組織，損害生殖器官，還可經(jīng)血-腦屏障進入腦組織，代謝產(chǎn)生的自由基直接損害下丘腦和垂體，對下丘腦-垂體-性激素內(nèi)分泌軸造成損害，影響促性腺激素的分泌，影響支持細胞的內(nèi)分泌功能[9-10]。

隨著生物化學(xué)技術(shù)手段不斷發(fā)展，精漿生化檢測在男性不育診斷中起著越來越重要的作用。精囊腺分泌的果糖是供精子利用的主要能源物質(zhì)。前列腺分泌的鋅能促進生殖器官發(fā)育，維持正常生精功能，提高精子密度和活力[11]。Dieudonne等[12]報道，精漿果糖可作為男性不育癥研究中一項篩查指標。精漿果糖為精子直接利用，其濃度與精子運動及受精能力呈正相關(guān)。當精漿果糖濃度低于正常時，不能提供精子能源，影響精子運動，以致不易受孕[13]。精漿果糖的檢測有助于了解不育患者精囊腺的功能狀態(tài)以及不育癥的病因診斷，對判斷男性生育力具有重要意義。

鋅是人體重要的微量元素，鋅含量的測定也反映前列腺的功能。精漿鋅對男性生殖功能有非常重要的作用，通過影響下丘腦-垂體-睪丸軸的功能，進而影響性腺的發(fā)育及睪丸的生精功能[14]；鋅是維持精子染色質(zhì)穩(wěn)定性的重要物質(zhì)，可以清除由白細胞和有缺陷精子產(chǎn)生的氧自由基，減少氧自由基對精子的毒性[15]，鋅直接參與精子生成、成熟、激活和獲能過程，對精子活力、代謝及其穩(wěn)定性都具有重要作用。Chia等[16]報道，精漿鋅濃度與精子密度、活力和活率呈正相關(guān)。Ali等[17]報道，雄激素水平低下的少或無精子癥患者精漿鋅水平顯著下降，認為精漿鋅缺乏是不育患者睪丸功能低下的原因之一。提示鋅在精子發(fā)生過程中起重要作用，鋅的缺乏可能導(dǎo)致精子發(fā)生異常或停滯。

酒精是乙醇的俗稱，乙醇是親脂性的小分子物質(zhì)，過量飲用后，迅速吸收進入體內(nèi)的乙醇超過了肝臟的氧化代謝能力而蓄積，乙醇的代謝產(chǎn)物乙醛能與各種蛋白質(zhì)結(jié)合，形成乙醛-蛋白質(zhì)毒物，此毒物可以抑制蛋白質(zhì)合成，干擾細胞膜中類脂和蛋白結(jié)構(gòu)，引起細胞功能障礙。

Christeff報道，長期飲酒的人可導(dǎo)致細胞及機體免疫力異常，這可能是飲酒對睪丸功能產(chǎn)生影響的原因之一[18]。在本研究中，飲酒大鼠血清激素的含量，如LH、FSH及T都較正常對照組降低。本研究結(jié)果表明，各酒精組血清T水平均明顯低于對照組，說明酒精可以抑制睪丸間質(zhì)細胞合成睪酮，這與有關(guān)報道一致[19-20]，從而提示酒精所致的睪丸損傷的另一特征是抑制睪丸類固醇合成。本研究顯示，各酒精處理組大鼠血清LH均明顯低于對照組，高劑量組血清FSH水平也明顯低于對照組。酒精抑制睪丸間質(zhì)細胞合成T，使血清T水平下降，隨即因長反饋機制，下丘腦、垂體促使LH分泌增多來彌補間質(zhì)細胞功能受損，但隨著酒精暴露時間的延長，這種“中樞性補償”發(fā)生缺陷。從而引發(fā)下丘腦-垂體軸的損傷。另有研究表明，酒精可以使下丘腦LHRH mRNA表達上調(diào)，還使垂體雄激素受體數(shù)目減少，這說明除睪酮反饋機制外，酒精可以直接作用于下丘腦或垂體來干擾下丘腦-垂體-性腺軸的功能，從而進一步影響睪丸的結(jié)構(gòu)和功能。

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