劉琳，莫麗春，郭艷，向晉龍，曾凡駿，*

（1.四川大學食品工程系，四川 成都 610065；2.四川省疾病預防控制中心，四川 成都 610041；3.四川麥力若科技發(fā)展有限責任公司，四川 成都 610065）

當人體組織得不到充足的氧，或不能充分利用氧時，細胞、組織、器官的代謝、機能、甚至形態(tài)結(jié)構(gòu)都可能發(fā)生異常變化，這一病理過程就稱為缺氧。缺氧多見于空氣稀薄的高原地區(qū)，一些低氧場所，如商場、辦公樓、地鐵、隧道、地下設施等。一些特殊人群也易發(fā)生缺氧癥狀，如利用氧的效率下降的老年人、腦力勞動者及運動員。因此開發(fā)具有缺氧耐受力的保健食品具有重要的意義。紅景天為保健食品可用資源，為景天科紅景天屬多種植物的根及根莖，主要成分有紅景天甙和酪醇[1]。紅景天具有抗缺氧、抗疲勞[2]等功能，臨床上紅景天可用于預防高原反應的輔助用藥[3]。紅景天通過降低耗氧量、耗氧速度，清除自由基或減少自由基對血管內(nèi)皮的損傷來實現(xiàn)抗缺氧作用[4]。以紅景天提取物為主要原料，輔以枸杞子提取物、西洋參提取物、?；撬幔_發(fā)一種具有提高缺氧耐受力功能的保健食品。

1 產(chǎn)品工藝和配方

紅景天能提高機體組織氧的利用率，增加有氧氧化酶的活性，提高機體的帶氧和供氧能力，來實現(xiàn)抗缺氧作用。在缺氧環(huán)境枸杞多糖對心、肝、肺、腦、肌組織、睪丸組織等器官和組織的缺氧損傷具有保護作用。除此之外，枸杞的抗疲勞功能也強化了提高缺氧耐受力功能。西洋參顯著的益氣、抗疲勞功能進一步強化了耐缺氧功效。?；撬嵬ㄟ^維持細胞功能穩(wěn)態(tài)，增強細胞對缺氧的耐受力。以紅景天提取物為主要原料，輔以枸杞子提取物、西洋參提取物和?；撬?，協(xié)同提高缺氧耐受力，研制出紅景天口服液。紅景天生藥經(jīng)水提、濃縮、噴霧干燥制成紅景天提取物；枸杞子生藥經(jīng)水提、醇沉、真空干燥、粉碎制成枸杞子提取物；西洋參生藥經(jīng)醇提、濃縮、噴霧干燥制成西洋參提取物。紅景天口服液經(jīng)3種提取物和?；撬釞z驗、計量稱重、制母液、配液、過濾、灌裝、封口、滅菌、燈檢、包裝、檢驗等工序制作而成。紅景天口服液推薦服用量為10 mL×3/（人·d），功效成分及用量為：紅景天甙6.82 mg/d，粗多糖66 mg/d。

2 安全性毒理學評價

2.1 材料

2.1.1 樣品

紅景天口服液：由四川麥力若科技發(fā)展有限責任公司中試生產(chǎn)。

2.1.2 試驗動物

清潔級昆明種小鼠和SD大鼠（白色封閉群大鼠）：四川省中醫(yī)藥科學院實驗動物中心提供。

2.1.3 主要儀器和試劑

CX4型全自動生化分析儀：美國貝克曼公司；CA620-Vet型全自動血細胞分析儀：瑞典麥道尼克公司；AL104型METTLER電子天平：瑞士梅特勒-托利多公司；OLYMPUS BH-2型顯微鏡：日本奧林巴斯公司；雙人單面垂直流凈化工作臺VS-1300L-U：蘇州達寶凈化設備有限公司。

生化試劑盒、環(huán)磷酰胺、1，8-二羥基蒽醌、疊氮化鈉、2-氨基芴、4-硝基喹啉-N氧化物、絲裂霉素C、S-9混合液。

2.2 安全性毒理學評價方法

對紅景天口服液進行急性毒性MTD（最大耐受劑量法）試驗、遺傳毒性試驗和大鼠30d喂養(yǎng)試驗。其中遺傳毒性試驗包括Ames（污染物致突變性檢測）試驗、小鼠骨髓嗜多染紅細胞微核試驗和小鼠精子畸形試驗。

2.3 安全性毒理學評價結(jié)果

2.3.1 急性經(jīng)口毒性試驗

SD大鼠和昆明種小鼠的MTD值均大于15g/（kg·bw），按急性毒性分級屬無毒級。

2.3.2 遺傳毒性試驗

3項遺傳毒性試驗（Ames試驗、小鼠骨髓嗜多染紅細胞微核試驗以及小鼠精子畸形試驗）結(jié)果無致突變作用。

2.3.3 大鼠30 d喂養(yǎng)試驗

最高劑量為人體推薦量的100倍。可見動物生長發(fā)育正常，體重持續(xù)增長，體態(tài)活潑，大、小便未見異常改變。試驗期間未見動物出現(xiàn)中毒癥狀及死亡。3個劑量組雌雄大鼠的每周體重、每周進食量、每周食物利用率及總食物利用率、臟體比值與對照組相比較，均無顯著性差異（P＞0.05），血液學常規(guī)檢測及末期血生化指標檢測結(jié)果與對照組相比較，僅見雄鼠低劑量組和雌鼠中劑量組的白細胞計數(shù)降低有顯著性差異（P<0.05，P<0.05），雄鼠高劑量組的甘油三酯降低有顯著性差異外（P<0.05），其余指標均無顯著性差異（P＞0.05）。組織病理學檢查結(jié)果，除動物自發(fā)病變外，未見受試物高劑量組引起動物中毒性損傷改變。

3 提高缺氧耐受力功能評價

3.1 材料

3.1.1 樣品紅景天口服液

四川麥力若科技發(fā)展有限責任公司中試生產(chǎn)。

3.1.2 實驗動物

雌性昆明種小鼠，120只，體重18 g～22 g，由四川省中醫(yī)藥科學院實驗動物中心提供。

3.1.3 主要儀器和試劑

250 mL磨口瓶、秒表、凡士林、鈉石灰、亞硝酸鈉、1 mL注射器、剪刀、電子天平。

3.2 提高缺氧耐受力功能評價方法

試驗設5、10、15 mL/（kg·bw）3個劑量組（分別相當于人體推薦量的10、20、30倍），對紅景天口服液進行對小鼠體重的影響試驗、常壓耐缺氧試驗、亞硝酸鈉中毒存活試驗、急性腦缺血性缺氧試驗。

3.3 提高缺氧耐受力功能評價結(jié)果

3.3.1 紅景天口服液對小鼠體重的影響

各劑量組及對照組動物的初始體重經(jīng)統(tǒng)計學處理，方差齊（P>0.05），且方差分析結(jié)果（P>0.05），表明各組動物的初始體重是均衡的。3個劑量組動物的中期體重和結(jié)束時體重與對照組比較，經(jīng)統(tǒng)計學處理，均無顯著性差異（P>0.05）。

3.3.2 紅景天口服液對小鼠常壓耐缺氧時間的影響

紅景天口服液對小鼠常壓耐缺氧時間的影響，見表1。

由表1可見，3個劑量組小鼠的常壓耐缺氧時間與對照組比較，經(jīng)統(tǒng)計學處理，除低劑量組無顯著性差異（P>0.05），中、高劑量組常壓耐缺氧時間延長有顯著性差異（P<0.05）。

3.3.3 紅景天口服液對小鼠亞硝酸鈉中毒存活時間的影響

紅景天口服液對小鼠亞硝酸鈉中毒存活時間的影響，見表2。

表1 紅景天口服液對小鼠常壓耐缺氧時間的影響（）Table 1 Rhodiola Oral Liquid on the time of Hypoxia tolerance in mice

表1 紅景天口服液對小鼠常壓耐缺氧時間的影響（）Table 1 Rhodiola Oral Liquid on the time of Hypoxia tolerance in mice

注：*表示與對照組比較P<0.05。

劑量/[mL/（kg·bw）]動物數(shù)/只存活時間/minP值010 17.10±1.48510 18.46±1.84 0.16710 10 19.08±2.69* 0.02615 10 19.11±1.37* 0.024

表2 紅景天口服液對小鼠亞硝酸鈉中毒存活時間的影響（）Table 2 Rhodiola Oral Liquid on the survival time of Sodium Nitrite Poisoning in mice

表2 紅景天口服液對小鼠亞硝酸鈉中毒存活時間的影響（）Table 2 Rhodiola Oral Liquid on the survival time of Sodium Nitrite Poisoning in mice

注：*表示與對照組比較P<0.05。

劑量/[mL/（kg·bw）]動物數(shù)/只存活時間/minP值010 12.81±1.31510 14.55±2.57 0.20710 10 15.64±2.81* 0.01915 10 15.30±1.88* 0.043

由表2可見，3個劑量組小鼠亞硝酸鈉中毒存活時間與對照組比較，經(jīng)統(tǒng)計學處理，除低劑量組無顯著性差異（P>0.05），中、高劑量組常壓耐缺氧時間延長有顯著性差異（P<0.05）。

3.3.4 紅景天口服液對小鼠急性腦缺血性缺氧時間的影響

紅景天口服液對小鼠急性腦缺血性缺氧時間的影響，見表3。

表3 紅景天口服液對小鼠急性腦缺血性缺氧時間的影響（）Table 3 Rhodiola Oral Liquid on the time of Acute Cerebral Ischemic Hypoxia in mice

表3 紅景天口服液對小鼠急性腦缺血性缺氧時間的影響（）Table 3 Rhodiola Oral Liquid on the time of Acute Cerebral Ischemic Hypoxia in mice

劑量/[mL/（kg·bw）]動物數(shù)/只存活時間/sP值010 18.90±2.64510 21.50±5.56 0.28710 10 20.50±2.22 0.65415 10 22.00±3.50 0.169

由表3可見，3個劑量組小鼠急性腦缺血性缺氧時間與對照組比較，經(jīng)統(tǒng)計學處理，3個劑量組無顯著性差異（P>0.05）。

紅景天口服液連續(xù)30 d經(jīng)口灌胃給予雌性小鼠后，可見動物生長良好，體重持續(xù)增長。中、高劑量組能明顯延長小鼠常壓耐缺氧時間，常壓耐缺氧試驗結(jié)果為陽性；中、高劑量組能顯著延長小鼠亞硝酸鈉中毒存活時間，試驗結(jié)果為陽性；小鼠急性腦缺血性缺氧試驗結(jié)果為陰性。按《保健食品檢驗與評價技術(shù)規(guī)范》（2003年版）中的規(guī)定，紅景天口服液對動物具有提高缺氧耐受力功能。

4 產(chǎn)品功效成分穩(wěn)定性試驗

對3個批次的紅景天口服液進行加速實驗，在（38±1）℃和相對濕度75%的環(huán)境中加速試驗3個月，每月測定口服液中功效成分紅景天甙和粗多糖的含量。經(jīng)3個月的加速實驗，功效成分變化情況如表4、表5所示。

表4 3批次紅景天口服液加速試驗中紅景天甙的變化Table 4 The changes of Rhodiola glucoside in Accelerated testing of three batches of Rhodiola Oral Liquid

表5 3批次紅景天口服液加速試驗中粗多糖的變化Table 5 The changes of Polysaccharide in Accelerated testing of three batches of Rhodiola Oral Liquid

紅景天口服液經(jīng)過3個月（38±1）℃和相對濕度75%的加速實驗，其中功效成分紅景天甙的變化在4%之內(nèi)，粗多糖的變化在10%之內(nèi)，該變化范圍都在檢測方法的誤差范圍之內(nèi)。因此，經(jīng)過上述工藝制備出的保健口服液中的功效成分均有良好的穩(wěn)定性。

5 結(jié)論

以紅景天提取物為主要原料，輔以枸杞子提取物、西洋參提取物和?；撬幔兄瞥黾t景天保健口服液。經(jīng)衛(wèi)生學評價表明紅景天口服液功效成分指標均符合要求，且于（38±1）℃、相對濕度75%環(huán)境存放3個月其功效成分指標變化均符合要求；經(jīng)安全性毒理學評價表明，紅景天口服液安全無毒，急性經(jīng)口MTD均大于15 g/（kg·bw），屬實際無毒類，本產(chǎn)品無致突變作用；經(jīng)提高缺氧耐受力功能評價表明紅景天口服液具有提高缺氧耐受力的功能。

[1]李君,陳志,李建民,等.紅景天的研究進展[J].云南農(nóng)業(yè)大學學報,2007,22(1):61-64

[2]鄧天吉,許小魚,甄麗華.藏藥紅景天口服液抗缺氧和抗疲勞的臨床觀察[J].華西醫(yī)學雜志,2006,16(3):233

[3]馬根順,羅丁.紅景天藥理作用研究進展[J].中國實用醫(yī)藥,2009,4(28):227-228

[4]陳玉滿,陳江,毛光明,等.大花紅景天的抗缺氧作用研究[J].浙江預防醫(yī)學,2009,19(1):92-93