吳林冬，楊曉艷，茍體忠，王紹云

(凱里學(xué)院化學(xué)與材料工程學(xué)院應(yīng)用化學(xué)研究所，貴州 凱里 556011)

天胡荽為傘形科植物天胡荽(Hydrocoty lesibthorpioides Lam)的全草，別名滿天星、破銅錢、落得打等，分布于江西、廣東、廣西、貴州、四川、云南等地。有祛風(fēng)清熱，化痰止咳之功效，具有抑菌、消炎、抗病毒等藥理作用，主要用于治療急性黃疸型肝炎、傷風(fēng)感冒等癥［1］，民間常用其全草治療各種蘚癥。大量研究表明，天胡荽全草中含有黃酮類、氨基酸、揮發(fā)油等多種化合物［2－4］，具有多種生物活性成分，在臨床醫(yī)藥中有廣泛應(yīng)用［5，6］。

天胡荽的藥用價值很高，對其有效成分的分離提取受到人們的關(guān)注，其中揮發(fā)油的提取可用用壓榨法、蒸餾法、溶劑提取法、吸收法等傳統(tǒng)方法［7］，隨著提取技術(shù)的發(fā)展，微波輔助提取技術(shù)具有場極化加熱的特點(diǎn)，使中藥組分在短時間內(nèi)有較大提取率，因而在中藥有效成分的提取中逐漸得到應(yīng)用［8］。

本文擬采用水蒸氣蒸餾法和微波輔助提取法分別對天胡荽的揮發(fā)油進(jìn)行提取，并通過氣質(zhì)聯(lián)用儀(GC－MS)對所提取的揮發(fā)油進(jìn)行成分檢測，比較提取方法對揮發(fā)油成分的影響，為天胡荽揮發(fā)油提取工藝優(yōu)化提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 實(shí)驗(yàn)儀器與材料

1．1 儀器與試劑 氣相色譜—質(zhì)譜聯(lián)用儀(日本島津，QP2010SE);常壓微波萃取儀(上海辰華，MAS－I);揮發(fā)油提取裝置(定制，符合中國藥典規(guī)范);電子天平(上海良平儀器，F(xiàn)A2004);電加熱套(北京科偉儀器);乙醚為分析純(北京化工廠)。

1．2 材料 黔產(chǎn)天胡荽鮮草，采集于貴州榕江縣，經(jīng)凱里學(xué)院植物研究所周江菊教授鑒定。

2 揮發(fā)油提取方法

2．1 水蒸氣蒸餾法 將天胡荽鮮草切細(xì)，準(zhǔn)確稱取樣品50 g倒入500 mL燒瓶中，加入300 mL蒸餾水，浸泡1 h，將電加熱套電壓調(diào)至220V，沸騰后調(diào)至110V，加熱3 h，冷卻后用10 mL乙醚將提取器支管部分的油層萃取出。將萃取液轉(zhuǎn)移至樣品瓶中編號，密封低溫保存待測。

2．2 微波輔助提取法 將天胡荽鮮草切細(xì)，準(zhǔn)確稱取樣品50g倒入500 mL燒瓶中，加入300 mL蒸餾水，浸泡1 h。將燒瓶部分放入常壓微波萃取儀內(nèi)，用標(biāo)準(zhǔn)磨口長二接管外接揮發(fā)油提取器，微波功率600W，加熱30 min，冷卻后用10 mL乙醚將提取器支管部分的油層萃取出。將萃取液轉(zhuǎn)移至樣品瓶中編號，密封低溫保存待測。

2．3 分析條件 氣相色譜條件:RTX－5MS彈性石英毛細(xì)管柱(30 m ×0．25 mm ×0．25 μm);柱溫:60℃保持1 min，以10℃/min升至200℃;汽化室溫度:250℃;溶劑延遲:2 min;進(jìn)樣量:1μL;載氣:He;載氣流量:1 mL/min;分流比:30:1。

質(zhì)譜條件:EI離子源;離子源溫度:230℃ ;電子能量:70eV;檢測電壓:0．9kV;質(zhì)量范圍:20 ～800 amu。

3 結(jié)果與討論

采用水蒸氣蒸餾法和微波輔助提取法分別提取天胡荽的揮發(fā)油，將所得提取液用GC－MS分析，其總離子流色譜圖(TIC)見圖1和圖2;天胡荽揮發(fā)油的化學(xué)成分及相對含量見表1(A為水蒸氣蒸餾法提取的天胡荽揮發(fā)油;B為微波輔助提取的天胡荽揮發(fā)油)。

表1 天胡荽揮發(fā)油的化學(xué)成分及峰面積百分含量

(續(xù)表)

經(jīng)GC－MS分析，兩種方法共分離鑒定出56種化合物。

采用水蒸氣提取的揮發(fā)油，經(jīng)GC－MS測定分析，分離鑒定了39種化學(xué)成分，占揮發(fā)油總量的93．63%。峰面積百分含量在1%以上的有16種，含量占總化合物的83．64%;含量在2%以上的有5種，占總化合物的69．24%。相對含量由高到低的化合物依次為3－甲氧基 －1，2－丙二醇(32．26%)、鐮葉芹醇(24．15%)、石竹烯(5．08%)、β －欖香烯(4．26%)、α －丁子香烯(3．49%)。

微波輔助提取法提取的揮發(fā)油，經(jīng)GC－MS測定分析，鑒定了43種化學(xué)成分，占揮發(fā)油總量的94．88%。峰面積百分含量在1%以上的有17種，含量占總化合物的80．34%;含量在2%以上有8種，占總化合物的71．01%。相對含量由高到低的化合物依次為鐮葉芹醇(27．28%)、氧雜三環(huán)十二烷(21．18%)、β －欖香烯(7．38%)、棕櫚酸(3．76%)、2，4，4－三甲基己烯(2．83%)、β － 瑟林烯(2．17%)、烴基－八氫萘(2．14%)、α －衣蘭油烯(2．13%)，

由表1可知，經(jīng)GC－MS檢測，水蒸氣蒸餾提取的揮發(fā)油與微波提取的揮發(fā)油成分比較，具有相同化合物26種，在微波輔助提取法中占79．77%，在水蒸氣蒸餾法中占44．79%。提取的主要成分相同、含量有較大差異。此外，微波輔助提取所得的揮發(fā)油成分較多。

綜上所述，通過對水蒸氣蒸餾法和微波輔助法提取天胡荽的揮發(fā)油進(jìn)行了對比研究，對所提取的揮發(fā)油用氣質(zhì)聯(lián)用儀(GC－MS)進(jìn)行檢測分析。結(jié)果顯示，水蒸氣蒸餾法與微波輔助萃取法所提取的天胡荽揮發(fā)油，主要成分基本相同，水蒸氣蒸餾法比微波輔助提取法提取的成分種類多，在相對含量上有較大差別。在在本實(shí)驗(yàn)所設(shè)計(jì)的提取時間上，微波輔助提取耗時1．5 h，水蒸氣蒸餾法提取耗時4 h，在未進(jìn)行提取工藝優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)條件下，微波輔助提取法在種類和提取效率上已顯示出了較好優(yōu)勢，由此可見，微波輔助提取法更適合于天胡荽揮發(fā)油的提取。

［1］全國中草藥匯編編寫組．全國中草藥匯編［M］．北京:人民衛(wèi)生出版社，1975．164 －165．

［2］張?zhí)m，張德志．天胡荽的研究進(jìn)展［J］．現(xiàn)代食品與藥品雜志，2007，17(1):15－17．

［3］張?zhí)m，張德志．江西產(chǎn)天胡荽揮發(fā)油的GC－MS分析［J］．廣東藥學(xué)院學(xué)報，2008，24(1):35 －36．

［4］秦偉瀚，楊榮平，趙紀(jì)峰，等．重慶產(chǎn)天胡荽揮發(fā)油氣質(zhì)聯(lián)用法成分分析［J］．實(shí)用中醫(yī)藥雜志，2011，27(10):731－732．

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［8］李作平，張嫚麗，詹文紅．微波萃取技術(shù)在中藥有效成分提取中的應(yīng)用［J］．時珍國醫(yī)國藥，2004，15(1):55．